URSPRUNGLIGA FORSKNING
Serum b2-mikroglobulin värden bland friska Brasilianare med hjälp av en DPC IMMULITE® – analysen
– Värden i b2-mikroglobulin em brasileiros saudáveis hjälp eller automatiserade system DPC IMMULITE®
Fabíola Branco Filippin; Liliete Käppar Souza
Institutionen för Klinisk Analys, Science and Health Center, Federal University of Santa Catarina – Florianopolis/SC, Brasilien. E-post: [email protected].,br
abstrakt
syfte: denna studie var utformad för att bestämma det normala intervallet av serum beta 2-mikroglobulin (Sb2M) nivåer bland friska frivilliga i Brasilien. Nivåerna av Sb2M är förhöjda hos HIV-infekterade patienter och har visat sig vara den bästa prediktorn för HIV-infektionsstatus och vissa maligna sjukdomar, särskilt multipelt myelom., För att uppnå optimal användning vid Brasiliansk klinisk diagnos utfördes en adekvat referensintervallstudie för Sb2M IMMULITE® – analys, baserat på det faktum att dess referensintervallsgränser utvärderades bland europeiska populationer.
metoder: nittiosex friska blodgivare utvärderades, och Sb2M-nivåer mättes med kemiluminescent enzymimmunanalys med hjälp av IMMULITE ® automatiserad analysator.
resultat: ett normalt intervall av Sb2M-värden, fastställt med en icke-parametrisk statistisk metod, var 1,05 till 3,9 mg / mL, med den övre gränsen högre än den som rapporterats på annat håll.,
slutsatser: Denna studie presenterade nya data som tyder på att det finns en signifikant skillnad mellan de nuvarande referensgränserna för Sb2M IMMULITE® – analysen och de som finns i Brasilien, vilket tyder på att betydande skillnader i normalvärdena kan förekomma bland olika populationer och att dessa nya värden bör beaktas för Brasilianska individer.
nyckelord: b2-mikroglobulin. Referensintervall. Kemiluminescent immunoassay. Friska frivilliga. Prognostiskt värde.,
abstrakt
syfte: Syftet med denna studie var att fastställa utgångsvärdena för serum B2-mikroglobulin (Sb2M) hos friska frivilliga. Det är känt att denna parameter är hög hos patienter infekterade med humant immunbristvirus (HIV) och har visat sig vara en bättre markör för HIV-infektion och maligna sjukdomar, särskilt multipelt myelom., För att få den bästa kliniska diagnosen bestämdes ett adekvat referensintervall av Sb2M för den brasilianska befolkningen med hjälp av IMMULITE® – analysen; eftersom detta har som parameter ett referensintervall bestämt från europeiska populationer.
metoder: nittiosex friska blodgivare utvärderades och Sb2M-värden mättes med kemiluminescent enzymimmunanalysmetod med hjälp av IMMULITE ® automatiserad analysator.
resultat: värdena för Sb2M, fastställda med icke-parametrisk statistisk metod, var mellan 1,05 och 3.,9 mg / ml och den övre gränsen som erhölls var högre än den som rapporterades i andra studier.
slutsats: denna studie presenterade nya värden, vilket indikerar att det finns en signifikant skillnad mellan Referensgränserna för Sb2M som är tillgängliga för IMMULITE® och de som finns i denna studie, vilket visar förekomsten av viktiga variationer mellan olika populationer och att nya värden bör övervägas för brasilianer.
Uniterms: B2-mikroglobulin. Referensintervall. Kemiluminescent immunoassay. Friska frivilliga. Prognostiskt värde.,
Beta 2-mikroglobulin (b2M) ett protein som finns i alla nukleerade celler, är associerat med histokompatibilitetsklass 1-antigener på cellytmembran (särskilt rikligt på lymfocyter och monocyter).1 Det upptäcktes först i urinen hos patienter med njursvikt.2 på grund av sin låga molekylvikt (11 800 Dalton) elimineras 95% av all fri B2M i plasma genom glomerulär filtrering och 99,9% av den tas upp av proximala tubulära celler. I närvaro av en normal njurfiltreringshastighet indikerar förhöjda B2M-nivåer (Sb2M) i serum Hög B2M-produktion eller release3., Vid aktivering av immunsystemet frigör både B-och T-lymfocyter aktivt b2M i cirkulation från vilken det senare elimineras via glomerulär filtrering och tubulär reabsorption.4 ökade Sb2M-koncentrationer har påvisats hos patienter med blodceller dyskrasi, inklusive multipelt myelom, 5, 6 maligna lymfoproliferativa störningar, 7 myeloproliferativa störningar, 8 vissa virusinfektioner såsom HIV-infektion9, cytomegalovirus, icke-A-och icke-B-hepatit och infektiös mononukleos.,Nivån av Sb2M används också som en viktig prognostisk faktor hos patienter med multipelt myelom5,6 och HIV-infektioner.9
det normala referensområdet för Sb2M hos friska individer som finns i litteraturen bestämdes med hjälp av nordamerikanska och europeiska populationer (DPC Immulite® – analys). I ett försök att bestämma det normala intervallet för Sb2M nivåer bland asymtomatiska seronegativa Afrikanska individer, Piwowar et al. (1995) 10 fann att 50% av dessa individer hade onormala värden (medelvärden 2, 35 mg/mL). I en annan studie var det genomsnittliga Sb2M-värdet bland friska frivilliga 1, 36 mg / mL.,11 I denna rapport beskriver vi Sb2M värden i friska Brasiliansk ämnen från en grupp av blodgivare vid Hematologi och Hemotherapy Centrum av Santa Catarina (HEMOSC).
försökspersoner
blodgivare, män och icke-gravida kvinnor från 25 till 50 års ålder inkluderades i studien. Alla individer genomgick en klinisk bedömning utvärderad av HEMOSC, inklusive frågeformulär och screeninglaboratorietester enligt brasilianska juridiska kriterier. Alla frivilliga som uppfyllde dessa kriterier gav muntligt och skriftligt samtycke till att ha ytterligare 5 mL blod ritat för studiens syfte., Det experimentella protokollet godkändes av den etiska kommittén vid Universitetssjukhuset i Florianópolis, federala universitetet i Santa Catarina.
metoder
helblod samlades med ett Vacutainer-system i 10 mL torra rör och serum separerades genom centrifugering. För att eliminera lipidkomponenter var serumprover ultracentrifuged vid 18000 g för 20 min. Alla blodprov erhölls mellan 2: 00 p. m.och 6:00 p. m. och behandlades inom 5 h efter venpunktur., Prover togs prediluted 1: 41 i b2M Sample Diluent (IMMULITE® Beta2-Mikroglobulin kit, DPC, USA) enligt tillverkarens anvisningar, och 5 mL krävdes för analysförfarandet. Sb2M mättes med en fast fas 2-plats kemiluminescent enzymimmunanalys med hjälp av IMMULITE ® automatiserad analysator (DPC, Los Angeles, USA).
statistisk analys
i referensintervallstudien för DPC IMMULITE® – analysen var medelvärdet 1,26 mg / mL., National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) behandlar användningen av a priori och a posteriori uteslutningskriterier för att erhålla en hälsosam prover.Därför utvärderades alla försökspersoner med Sb2M-värden större än 2, 0 mg/mL kliniskt för värdegodkännande för att säkerställa att varje individ var ”frisk”. Data infördes och analyserades med Microsoft Excel-programvara. Medel – och standardavvikelsevärdena beräknades. De 95: e percentila referensintervallen bestämdes genom användning av 2,5 och 97,5 percentiler., Enligt det förfarande som rekommenderas av nccls rankades observationerna efter storlek och 2,5 och 97,5-percentilerna erhölls som 0,025 (n + 1) respektive 0,975 (n + 1) beställda observationer (n= provstorlek). Om de uppskattade rankvärdena inte var heltal utfördes linjär interpolering.12
resultat
nittiosex brasilianska blodgivare, 60 män och 36 kvinnor, med medelålder (år) på 33, inkluderades i studien. Värdena för Sb2M varierade mellan 1,05 och 3,9 mg / mL, vilket visas i Figur 1, och medelvärdet var 2,46 mg / mL (standardavvikelse = 0,73)., Med 97,5: e percentilen enligt en rutinmässig icke-parametrisk metod ansågs därför 12, 9 mg/mL vara den övre normala gränsen. Det fastställda intervallet var 1, 33, 9 mg/mL.
diskussion
forskare över hela världen har rapporterat nyttan av Sb2M som en pålitlig tillverkare för att utvärdera utvecklingen av HIV-infektion och multipelt myelom.5-8,10,13 hos HIV-infekterade individer verkar Sb2M vara en bättre prediktor för HIV-infektionsstatus än CD4-antal och också en bättre prediktor för överlevnad, med ökade Sb2M-nivåer som är associerade med sjukdomsprogression.,10
ökad produktion och därav följande frisättning av Sb2M i kroppsvätskor har rapporterats hos patienter med multipelt myelom. Betydelsen av dessa data för kliniker bygger på det faktum att myelomplasmaceller producerar Sb2M. därför antas det att Sb2M-värden kan indikera inte bara storleken utan också den proliferativa aktiviteten hos myelomcellerna13 och kan accepteras som en icke-specifik tillverkare av tumörmassa.5,6,13,14 dessutom den prognostiska Roll Sb2M i andra proliferativa sjukdomar har bekräftats av många författare, 7, 14, 15 underlätta klinisk bedömning.,15 å andra sidan har det rapporterats att hos patienter med låg glomerulär filtrationshastighet höjdes Sb2M-nivåerna och laboratoriefynd bör tolkas med försiktighet.6,7,13
referensintervall används kliniskt, tillsammans med ytterligare information, som riktlinjer för patientens tillstånd. Referensintervallstudien för IMMULITE ® Sb2M (1,01,7 mg/mL, medelvärde 1,26 mg/mL) definierad av tillverkaren bestämdes med användning av serumprover från nästan 800 vuxna frivilliga, inklusive både män och icke-gravida kvinnor, som sträcker sig från 20 till 70 år., Ämnena valdes utifrån frågeformulär. Prover samlades in i Frankrike, Tyskland, Nederländerna och Portugal, och erhållna värden analyserades nonparametriskt. Den föreslagna övre gränsen var 1, 7 mg/mL. Dessa värden kanske inte är representativa för Brasilianska individer. I avsaknad av adekvata referensgränser för Sb2M som härrör från någon brasiliansk befolkning har många utredare använt data från nordamerikanska och Europeiska ämnen som presenterade övre gränser 2,3 gånger lägre än de som erhölls i denna studie.,
NCCLS rekommenderar att icke-parametriska referensintervall används och att provstorleken, n, ska bestå av minst 120 värden för att beräkna ett referensintervall på 95%, 2,5% och 97,5% av distributionen12. Detta nummer är det minsta antal värden som behövs för att bygga konfidensintervaller som ger information om noggrannheten hos de beräknade referensgränserna.
i denna studie utvärderades 96 prover., Vårt mål var inte att ta fram nya referensintervaller, utan att ta mer fokus på behovet av att varje laboratorium producerar sina egna referensintervaller för alla parametrar trots många svårigheter, inklusive praktiska och höga kostnader.
den aktuella studien visar att signifikant olika Sfb2m-värden kan förekomma bland olika populationer, vilket tyder på att varje Brasilianskt laboratorium bör fastställa sina egna referensgränser.,
bekräftelse
Vi tackar hematologi och Hemotherapy Center i Santa Catarina och clinical Analysis Laboratory, Universitetssjukhuset i Florianópolis för prover och tekniskt stöd. Vi är tacksamma för DPC IMMULITE® för att ge reagenset gratis för denna studie och till Dr Joanita del Moral från Hematology Division, Universitetssjukhuset i Florianópolis.
2. Berggard jag & Bearn AG. Isolering och egenskaper hos en lågmolekylär beta-2-globulin som förekommer i humana biologiska vätskor., J Biol Chem 1968;243(15):4095-103.
6. Greipp PR, Katzman JA, O ’ Fallon WM, Kyle RA. Värdet av beta 2-mikroglobulinnivå och plasmacellmärkningsindex som prognostiska faktorer hos patienter med nydiagnostiserat myelom. Blod 1988;72(1):219-23.
7. Constantines IP, Pathouli C, Karvountzis G, Papadopoulos P, Varvoutsi-Constantinides M, Eliakis P, et al. Serum beta 2 mikroglobulin i maligna lymfoproliferativa sjukdomar. Cancer 1985;15(10):2384-89.
8. Rodriguez J, Cortes J, Talpaz M, O ’ Brien S, Smith TL, Rios MB, et al., Serum beta-2 mikroglobulinnivåer är en signifikant prognostisk faktor i Philadelphia chomossome-positiv kronisk myelogen leukemi. Clin Cancer Res 2000;6:147-52.
10. Cooper E, Forbes m & Hammbling M. serum beta 2-mikroglobulin och C-reaktiva proteinkoncentrationer vid virusinfektioner. J Clin Pathol 1985;37:1140-3.
11. Diamondstone LS, Tollerud DJ, Fuchs D, Wachter H, Brun LM, Maloney E, et al. Faktorer som påverkar neopterin-och beta-2-mikroglobulinnivåerna i en frisk, varierad population. J Clin Immunol 1994;14(6):368-74.
12., Nationella kommittén för kliniska Laboratoriestandarder. Så här definierar och bestämmer du referensintervaller i det kliniska laboratoriet: godkänd riktlinje, nccls-dokument C28-A och C28-A2, Villanova, PA, 1995, 2001, nccls.