Tabell 1
| osmotisk bräcklighet | urin Hemosiderin | surgjort serumtest (Ham Test) |
|---|---|---|
| hemolys med sackaros | positiv | positiv för hemolys |
finns det några faktorer som kan påverka laboratorieresultaten?, I synnerhet tar din patient några mediciner-OTC-läkemedel eller Herbals – som kan påverka laboratorieresultaten?
användning av fel uppsamlingsrör, till exempel EDTA, kan blockera komplementaktivering och ge falskt negativa resultat i sackaroslystestet. De flesta metoder använder nu buffrade sackaroslösningar, eftersom obuffrade sackaroslösningar också kan ge falskt negativa resultat. EDTA kan också blockera komplementaktivering i det surgjorda serumprovet, vilket ger ett falskt negativt resultat. Noggrann pH-justering krävs för pH 6.78 +/- 0.1 för tillförlitliga resultat., Användning av ett referenslaboratorium kan krävas om sackaros Lys och surgjorda serumtest inte är rutin vid din institution. Urinhemosiderin behöver inte vara intracellulär för att anses vara positiv, eftersom normal urin ska vara negativ för hemosideringranuler.
vilka laboratorieresultat är absolut bekräftande?
en definitiv diagnos av PNH är tillgänglig genom flödescytometri. PNH-patienter har minskat uttryck för ett protein som kallas glykofosfatidylinositol (GPI) ankarproteiner på röda blodkroppar., Följaktligen kommer det att finnas minskad bindning av CD55 och CD59, som modulerar komplementaktivitet och primärt binder till cellytan GPI. Både CD55 och CD59 kan minskas på röda blodkroppsytor, men eftersom CD55 är mer uttryckt än CD59 är det mer sannolikt att ge det definitiva resultatet.
flödescytometri är mycket känslig och kan mäta små cellulära populationer eller kloner som påverkas av sjukdomen (till nivån 1-5%). Det kan också upptäcka uppkomsten av dessa kloner i aplastisk anemi eller hypoplastiska benmärgspatienter., Liksom vid de flesta flödescytometri ska blod samlas in i hepariniserade rör och bedömas inom 24 timmar efter insamling för optimal testning.
vilka bekräftande tester ska jag begära för min kliniska Dx? Vilka uppföljningstester kan dessutom vara användbara?
den gen som ansvarar för PNH är genen fosfatidylinositolglycan a (PIG-A). Det finns på X-kromosomen. De somatiska mutationerna i samband med PNH kan vara mycket varierande. De flesta mutationer består av små baspar deletioner eller Infogningar, men bassubstitutioner kan också förekomma., Mutationerna leder vanligtvis till en DNA-frameshift och resulterar följaktligen i minskad transkription och översättning av proteinprodukt.
mutationerna kan också förekomma på flera platser inom grisen-a-genen. Mutationer i aplastisk anemi associerad PNH tenderar att vara större och / eller mer frekvent jämfört med patienter med endast PNH. Förutom komplementmodulerande proteiner (CD55 och CD59) binder GPI många andra proteiner som kan påverka membranstabiliteten och komplementaktiveringen., Ett av de mer förbryllande problemen med att identifiera PNH är variationen i GPI-uttryck, vilket resulterar i patienter som sträcker sig från mild till svår undertryckning av GPI-syntes. Användningen av flödescytometri för detektering av minskad CD55-bindning är ett sätt att reda ut denna mosaicism eller uttryck. I slutändan kan rutinmässig gen och hel genomsekvensering leda till viktig information om PNH och dess association med aplastisk anemi.
vilka faktorer kan, om några, påverka laboratorieresultaten?, I synnerhet tar din patient några mediciner-OTC-läkemedel eller Herbals – som kan påverka laboratorieresultaten?
på grund av sällsyntheten hos PNH är många fel relaterade till testpatienter för PNH som inte har utvärderats grundligt för de vanligaste etiologierna i deras presentation, oavsett om det är kronisk hemolytisk sjukdom eller järnbristanemi. De flesta fel beror på denna ofullständiga kliniska analys och förekommer i de tidiga stadierna av klinisk granskning., Alla patienter med uppkomsten av järnbristanemi, till exempel, bör noggrant ses över för blödningskällor och utvärderas med hjälp av standard CBC, differential, och screeningtest för järnbristanemi innan PNH testning., På samma sätt bör en patient som uppvisar kronisk hemolytisk sjukdom noggrant ses över för tidigare transfusioner, läkemedelsinducerad hemolys och andra kroniska orsaker till hemolys innan man fortsätter mer specifik PNH-testning
eftersom screeningtesterna för PNH (sackaros lystest, Hams test) är beroende av biologiska material från patienten, jämfört med normala röda blodkroppar, är testerna av nödvändighet mindre exakta och potentiellt mindre känsliga när de utförs felaktigt. Dessa testresultat är kvalitativa och bygger på visuell inspektion., Det är viktigt att noggrant utvärdera kontrollrör för brist på hemolys i både sackaroslystestet och Hams test. Således är det värt att ha sådan testning utförd vid ett referenslaboratorium med erfarenhet av att standardisera dessa test.
flödescytometri är förmodligen den mest exakta av de tester som finns tillgängliga för PNH; men även flödescytometri har flera problem. Ett problem är mätningen för” frånvaro ” av CD55-markören. Att bevisa negativa resultat är alltid en svårare tolkning för flödescytometripatologen., Även det faktum att CD59 uttrycks på nivåer som är åtta gånger mindre än CD55 gör CD59 en otillräcklig ”back-up” – markör för PNH.