etik
denna studie genomfördes i enlighet med bestämmelserna i Helsingforsdeklarationen (1964) och överensstämmer med den regionala etikkommittén, Göteborg.
hundar
två hundar användes, Hanna, en 10-årig svart jätte schnauzer (chip nr., 967000000389928), och Lotti, en 6-årig svart riesenschnauzer (chip nr. 098100311386). Ägaren och hanteraren är GH. Hundarna lever som familjedjur med ägaren och hans familj. Det finns fri tillgång till färskt vatten hela dagen och matar tre gånger om dagen. Hundarna spenderar flera timmar varje dag i en trädgård eller på promenader. Hälsokontroller görs på Värmdö Djurklinik, Gustavsberg.
utbildning
träningsmetoden har beskrivits i detalj på annat håll . Under 2 år före den aktuella studien användes endast underhållsträning en gång i veckan., Var och en av träningssessionerna inkluderade 4-10 lådor , varav 0-3 innehöll cancervävnad eller blod från patienter med äggstockskarcinom. Inställningen valdes slumpmässigt före varje session. Detta program gjorde det möjligt för hundarna att konfronteras med ett annat problem att lösa i varje träningstillfälle. Hundarna belönades endast för en korrekt identifiering. Blodprov med>500 U/ml ca-125 värden som en indikator på äggstockscancer användes för träning. En droppe av träningsprovet placerades i en liten plasträtt inuti varje låda., Blodproverna som användes under träningsperioden användes inte i testen. Hundarna användes i experimentet med tillstånd från den regionala Etikprövningsnämnden i Göteborg, licensnummer: s-220-08. Hundarna hade fri tillgång till färskvatten under träning och testtimmar. Efter 2 timmars arbete gick hundarna eller hade 20 minuters ledig tid.
patientval
patienter valdes för inkludering i denna retrospektiva studie från kliniken och bio-bank databaser. Den senare innehåller blod och cancervävnad från patienter med äggstockscancer., Material samlades in efter tillstånd från den enskilda patienten och reglerades av behandlingsprogrammet för äggstockscancer i Västsverige. Patientval först gjordes från klinikdatabasen, då var resultaten korrelerade med bio-bankdatabasen för att erhålla blodprov.
det viktigaste urvalskriteriet för alla studiepatienter var klinisk fullständig remission (CR) före den sjätte (slutliga) schemalagda kemoterapikursen. Patienter valda för serie i delades in i 3 grupper., Grupp A inkluderade patienter med 3 års återfallsfri överlevnad, grupp B inkluderade patienter som hade fått återfall inom 6 månader efter det senaste behandlingssessionen och för Grupp C inkluderade patienter som hade fått återfall mellan 1 och 2 år efter behandlingen. Totalt 66 patienter med CR under åren 2001-2007 valdes i Serie 1. Alla var från Göteborgsområdet och var också i bio-bank-databasen. Fyrtiotvå patienter hade prover i en biobank som motsvarar ett av de tre sekundära urvalskriterierna för inkludering i Grupp A, B eller C., Urval för Serie II gjordes endast med hjälp av biobankdatabasen.
blodprover
blodprover samlades in från patienter som bor i Göteborgsområdet Västsverige. Befolkningen är cirka 600 000. Behandlingsprogrammet för äggstockscancer i kräver ca-125-analys vid två tillfällen. Först före eller direkt efter primär kirurgi, och den andra före den sjätte kursen av kemoterapi behandling. Men som vanligt i behandlingsprogrammet för äggstockscancer inkluderades CA-125-nivån inte i uppföljningen, även om läkare har möjlighet att kontrollera det., Blodprov med>500 U/ml ca-125 värden användes för hundträning, med en droppe placeras i en liten plastskål inuti varje låda. Blodprover som användes under träningsperioden användes inte i testen.
referensblodprover
Material för referensgruppen valdes ut från bio-bank-databasen. Kliniska patologivariabler beaktades inte eftersom våra tidigare studieresultat visade att de inte påverkade hundens detektionskänslighet ., Totalt 62 prover (42 för Serie I och 20 för Serie II), från olika individer, med ca-125-värden >200 U/ml valdes slumpmässigt som referensmaterial i Serie I och II.
testblodprover i serie i
fyrtiotvå prover samlades in och användes som testmaterial i Serie I. dessa blodprover togs före den sjätte kursen av kemoterapi. Patienterna delades in i tre grupper., Grupp A bestod av 13 patienter som hade en CR, 3 års återfallsfri överlevnad och normal (<35 U/ml) ca-125värden före sin sista behandlingskurs. Grupp B bestod av 12 patienter som hade CR, skovlade inom 6 månader, och alla utom 2 (61 U/ml; <200 U/ml) hade CA-125 <35UI. Grupp C bestod av 17 patienter med CR, återkommande mellan 1 och 2 år och normala CA-125-värden. Tumörhistopatologi, Stadium och grad varierade inom grupperna.,
blodprover med>500 U / ml ca-125-värden användes för träning, med en droppe placerad i en liten plastfat inuti varje låda. Blodprover som användes under träningsperioden användes inte i testen.
testblodprover i Serie II
prover togs 3 och 6 månader efter den sjätte slutliga kemoterapikursen. Tyvärr kunde vi inte följa patienter i serie i, Grupp A eftersom ingen av dem hade blod i Blodbanken. Vi samlade blod från 10 andra patienter som följdes regelbundet., Medianen för donatoråldern var 65 år (intervall 38-78 år).
kontrollblodprover
kontrollprover samlades in under de två åren mellan 2007 och 2009, främst från kvinnliga medicinska volontärer i Göteborg. Inklusionskriterier var att patienterna kände sig friska, inte var gravida och var fria från gynekologisk sjukdom. Kontroll-och testmaterial var inte åldersmatchade. Yngre personer valdes medvetet som källa till kontrollprover för att minska risken för förekomst av asymptomatisk äggstockscancer., Således hade både kontroll-och testgrupperna prover från pre-och postmenopausala kvinnor.
provberedning
blodprover samlades i EDTA-rör och centrifugerades sedan vid 3000 rpm i 10 min med plasmaprukor över de små plaströren. Efter centrifugering delades plasman i två delar, en för CA-125-analys och den andra för efterföljande experiment. Den senare delen hölls vid -80°C i tumören bank (Etiska Kommittén licensnummer: S-220-08, Regionala etikprövningsnämnden i Göteborg)., Kontrollplasmaprover bearbetades och lagrades identiskt till målen. Rör med kontrollblod lagrades dock separat. Medianen för donatoråldern var 45 år (intervall 29-65 år).
testdesign
tester utfördes på ett dubbelblint sätt som tidigare beskrivits . Sammanfattningsvis var både testledare och handler blinda för placeringen av målproverna och var endast närvarande i testplatsen när hundarna arbetade. Hundarna testades i två serier. Serie i omfattade 4 dagar (2 dagar per tillfälle), medan Serie II omfattade 2 dagar., Tio körningar utfördes varje dag, förutom en dag i Serie I när 11 körningar utfördes. Varje körning inkluderade sju lådor, placerade i en cirkel ca 2 m från varandra. Varje låda innehöll en droppe plasma; fem innehöll kontrollmaterial, en innehöll ett testprov och en innehöll ett referensprov. Referensmaterial togs före, eller strax efter den primära operationen, och hade därmed en hög koncentration av luktmolekyler. Placeringen av mål-och referensrutorna ändrades av en assistent mellan varje körning. Varje låda rengjordes med alkohol mellan körningar., Testerna dokumenterades på papper och DVD av testledaren och en assistent .
hundsvar
ett positivt svar definierades som att ange målrutan genom att skrapa med foreleg, ligga ner och sniffa den (och inte ange kontrollproverna). Ett negativt svar definierades som sniffning och indikerar en kontrollruta och inte indikerar målet. Ett osäkert svar definierades som att stanna vid lådan, lukta den, skrapa på den och eventuellt skälla, men gå rakt på och inte ligga ner.,
behandling av äggstockscancer
i linje med standardbehandlingsprogrammet i Västsverige behandlades patienterna genom total hysterektomi, bilateral salpingo-ooforektomi, omentektomi, multipla peritoneala biopsier och peritoneala tvättar med cytologi. Cirka 4 veckor efter primär kirurgi gavs den första karboplatin -, cyklofosfamid-och epirubicinkombinationen. Totalt sex kurser administrerades med 4 veckors intervall.,
statistiska metoder
rådata sammanfattades som känslighet (den villkorliga sannolikheten för hunden som indikerar cancer när tillståndet var närvarande) och testspecificitet (den villkorliga sannolikheten för att hunden ignorerar ett prov från en hälsosam givare). Känslighet och specificitet ger insikt i hundens allmänna klassificeringsförmåga.
den positiva och negativa prediktiva sannolikheten att testet skulle ge rätt diagnos beräknades också. Punktskattningar beräknades med 95% konfidensintervall ., Både känslighet och specificitet uttrycktes som proportioner, och standardtekniker för proportioner kunde därför användas för statistisk inferens. Konfidensintervall baserades på normal approximation, p ± 1.96 p 1-p / n där p är den uppskattade känsligheten, respektive specificitet och n är antalet provkörningar.