os testes clínicos e laboratoriais para detecção da infecção por Trichomonas vaginalis

estão disponíveis melhores alternativas ao microscópio que podem detectar mais infecções e podem ser usadas independentemente da presença de sintomas. Um desses testes que pode ser usado no ponto de cuidado (POC) é o osom (Sekisui, Framingham, MA) teste enzimático imunocromatográfico realizado em um dispositivo de medição do fluxo capilar com uma amostra de esfregaço vaginal. O ensaio baseia-se num anticorpo marcado com látex para se ligar especificamente às proteínas de trichomonas e num anticorpo de captura secundário para ligar o complexo ao dispositivo de fluxo lateral., Trata-se de alterações de melhoria clínica laboratorial (CLIA) dispensadas, tornando-as adequadas para utilização de COP, e os resultados estão disponíveis no prazo de 15 minutos. As características de desempenho deste ensaio são bastante boas. Em vários estudos, o uso deste teste melhorou significativamente a descoberta de casos em comparação com o número de casos encontrados apenas por microscopia. Em estudos comparando o OSOM do ensaio com testes de amplificação de ácido nucleico (Naat), o POC teste realizado muito bem, com sensibilidade semelhante à de Naat (>80% em relação a Naat em: >90%) (24, 25)., A única desvantagem deste teste é que ele só pode ser usado para mulheres e não pode ser empacotado com clamídia de COP/gonorréia triagem. Assim, as mulheres que são tratadas para a infecção por trichomonas durante uma visita ao escritório com base num teste de OSOM positivo podem ainda precisar de voltar para uma segunda visita se forem posteriormente diagnosticados com clamídia ou gonorreia com base num teste de diagnóstico laboratorial.a utilização de qualquer teste de COP é claramente justificada quando mulheres sintomáticas Presentes para avaliação de diagnóstico., A capacidade de definir o agente causador e fornecer tratamento adequado enquanto o paciente ainda está na clínica é extremamente importante para reduzir a transmissão da doença (26). No entanto, ao confiar em microscopia, os provedores devem estar cientes de que os resultados negativos podem ser falsos, faltando 50% ou mais de infecções, e a avaliação laboratorial pode fornecer informações úteis. Isto é particularmente relevante para mulheres sem sinais ou sintomas e para o teste de homens (mesmo aqueles com sintomas)., Preparação húmida microscopia é um primeiro teste útil para mulheres com sintomas, uma vez que o tratamento pode ser fornecido imediatamente. No entanto, deve ser utilizado num processo em cascata em que amostras microscópicas negativas são enviadas para um laboratório para avaliação posterior.os diagnósticos laboratoriais têm a desvantagem de não fornecer resultados imediatos enquanto o paciente espera para que o tratamento possa ser fornecido antes do final da visita., No entanto, a capacidade de isolar organismos, utilizar tecnologias moleculares, testar múltiplos patógenos que são frequentemente encontrados juntos, ou executar grandes tamanhos de lotes pode resultar em economias de escala e informações médicas adicionais que suportam o uso destes testes em muitas configurações. Estas vantagens são particularmente relevantes para as mulheres sem sintomas, mas cujo risco de infecção é elevado e para os homens em geral, uma vez que a carga do organismo parece ser mais leve nestes grupos e, portanto, alta sensibilidade e baixos limites de detecção são necessários.,

o teste de diagnóstico tradicional laboratorial foi a cultura de trichomonas com um meio Diamante modificado. As culturas são avaliadas por microscopia de uma lâmina preparada a partir de uma gota do meio de cultura diariamente por até 7 dias. Um avanço significativo na cultura foi visto com a disponibilidade do sistema InPouch (Biomed Diagnostics, Santa Clara, CA), que contém meio de cultura em uma bolsa que pode ser colocada em um estágio microscópico. Assim, todo o volume da cultura pode ser avaliado para a presença de trichomonads., O sistema InPouch alcançou um aumento incremental de sensibilidade sobre a cultura de rotina (27), mas a verdadeira vantagem do sistema é a logística melhorada. Este sistema tem potencial utilidade em ambientes com recursos limitados onde a microscopia clínica pode não ser viável, mas um laboratório central pode ser capaz de fornecer necessidades de baixa tecnologia, tais como incubação e avaliação microscópica. Em ambientes de alto recurso, a única utilidade real da cultura é obter organismos viáveis que possam ser relevantes para testes de susceptibilidade antimicrobiana., As notificações de resistência ao metronidazol, o tratamento mais frequentemente utilizado para infecções por trichomonas, são descritas na literatura, mas a verdadeira extensão deste problema é desconhecida e os testes de susceptibilidade não são realizados por rotina (5).os testes não baseados na cultura proporcionam frequentemente um aumento na capacidade de detectar infecções, uma vez que os organismos viáveis já não são necessários. O primeiro teste comercialmente disponível não baseado em cultura para T. vaginalis foi o Afirm VPIII (BD, Sparks, MD). Este ensaio utiliza a tecnologia de sonda de ADN para detectar Candida albicans, Gardnerella vaginalis e T., ADN vaginal numa única amostra vaginal. O teste é projetado para uso apenas com amostras de mulheres com corrimento vaginal. O teste é rápido (os resultados estão disponíveis em <1 h) E é executado com um pequeno instrumento específico do ensaio. O ensaio pode ser realizado em laboratórios clínicos ou locais acreditados para realizar testes de complexidade moderada de CLIA. O desempenho do teste para detecção de T. vaginalis em mulheres com vaginite é melhor do que o do microscópio (28), mas significativamente mais pobre do que o das NAATs., O nicho real para este ensaio é a separação dos agentes causadores do corrimento vaginal em populações em que não prevalecem DSTs (por exemplo, clamídia ou gonorreia). A incapacidade de utilizar este teste para triagem entre mulheres de alto risco e assintomáticas e a falta de testes de clamídia/gonorreia companheiros na mesma plataforma limitam a aplicabilidade deste teste em muitas configurações.

NAATs tornaram-se o padrão-ouro reconhecido para o rastreio e diagnóstico de C. trachomatis e N. gonorrhoeae (29)., A triagem anual de clamídia é recomendada para todas as mulheres <25 anos de idade, independentemente de fatores de risco comportamental ou sintomas, nos Estados Unidos e em muitos países europeus. Recomendações para o rastreio de infecções gonocócicas estão ligadas a fatores de risco comportamentais específicos ao invés de rastreio generalizado por causa das taxas de prevalência muito mais baixas deste patógeno. Tal como acima referido, recomenda-se o rastreio selectivo das mulheres em populações de alto risco para a infecção por trichomonas (7)., Apesar destas diferenças nas recomendações, particularmente nos Estados Unidos, a prática comum é agrupar testes de clamídia e gonorreia para mulheres que são elegíveis para rastreio de clamídia. Ao longo dos últimos 5 anos, vários fabricantes de naatas de clamídia/gonorreia produziram trichomonas NAATs que podem ser realizadas com a mesma amostra (um esfregaço vaginal é a amostra de escolha, mas amostras endocervicais e urina feminina são amostras depuradas para alguns testes)., Como resultado, os programas de controle de STI agora têm a oportunidade de fornecer serviços de rastreio e diagnóstico e, simultaneamente, gerar dados epidemiológicos melhorados sobre a infecção com T. vaginalis em várias populações. Abaixo estão descrições de várias NAATs atualmente disponíveis que utilizam várias tecnologias de amplificação. Devido à rápida evolução do panorama dos diagnósticos de doenças infecciosas, esta lista não é exaustiva, mas centra-se em ensaios para os quais existem dados disponíveis neste momento. Além disso, não são aqui apresentadas características de desempenho específicas., A razão para isso é que as estimativas de sensibilidade e especificidade são apenas tão boas quanto os testes com os quais um novo ensaio é comparado. Assim, a microscopia pode ter parecido ser altamente sensível em comparação com apenas a observação clínica. No entanto, sabemos agora que a microscopia funciona mal em comparação com os testes mais recentes. Os preconceitos inerentes à avaliação doseamento são numerosos e dificultam as comparações entre estudos, ao ponto de serem quase desinterpretáveis. Embora as estimativas do ponto exato tenham pouco significado, é claro que as NAATs superam todas as outras classes de testes para T. vaginalis.,

o primeiro NAAT para detecção de T. vaginalis a ser aprovado pela Food and Drug Administration (FDA) nos Estados Unidos é o teste Aptima TV (Halic, San Diego, CA). O ensaio é uma adaptação do teste de clamídia Combo 2/gonorreia, permitindo assim a utilização de amostras colhidas para rastreio de clamídia/gonorreia (30). São aprovados para o ensaio os esfregaços vaginais colhidos pelo médico, os esfregaços endocervicais e os espécimes endocervicais em PreservCyt (Halic, San Diego, CA), um meio citológico à base de líquido., A tecnologia é baseada na extração de rRNA de espécimes, seguida pela amplificação mediada por transcrição de rRNA capturado. O uso deste alvo proporciona um impulso natural para o limite de detecção desde 102 A 103 cópias existem dentro de cada organismo. Os produtos amplificados resultantes da amplificação isotérmica são detectados por uma reacção quimioluminescente medida com um luminómetro. O ensaio pode ser realizado quer com o sistema Tigris DTS quer com o sistema Panther, ambos totalmente automatizados e podem produzir 275 a 400 resultados num turno de trabalho de 8 horas., O ensaio é separado dos ensaios com clamídia/gonorreia, de modo a que a amostra original seja amostrada duas vezes para obter resultados para os três organismos, mas os ensaios podem ser efectuados simultaneamente no sistema Pantera, de modo a que todos os resultados estejam disponíveis ao mesmo tempo. O desempenho deste ensaio é excelente, com sensibilidade e especificidade estimativas de >90% e >95%, respectivamente (30).outro sistema de alta capacidade, totalmente automatizado, com um ensaio aprovado para T., vaginalis é o sistema Viper XTR, que executa o ensaio BD ProbeTec Trichomonas vaginalis Qx (TVQ) (BD, Sparks, MD). Este ensaio baseia-se na amplificação por deslocamento da cadeia (SDA) do ADN extraído de amostras de doentes com óxido férrico (31). SDA é um processo isotérmico de real-tempo de amplificação e de detecção de emissão de luz com excelente sensibilidade e especificidade (>95% e >99%, respectivamente) (31)., A plataforma Viper pode gerar > 700 resulta em um único turno de trabalho e pode testar para infecções por clamídia/gonorréia e trichomonas em um único sorteio a partir do recipiente de amostra de pacientes (ou seja, um único passo de eluição de DNA pode fornecer todos os três resultados). Além de esfregaços vaginais obtidos pelo doente e amostras endocervicais, este ensaio tem uma alegação da FDA para a urina feminina. Embora a urina feminina não seja o tipo de amostra ideal para testes de infecção por trichomonas (ou clamídia/gonorréia) (29), é um tipo de amostra comumente obtido, tornando esta uma vantagem útil.,embora as plataformas de alto rendimento em laboratórios de referência possam ajudar a realizar economias de custos, pode haver custos associados de envio e tempo que tornariam os testes em laboratórios locais mais pequenos uma opção atraente. O ensaio Afirm mencionado acima é um exemplo de um teste (CLIA moderate) que pode ser usado em um laboratório no local. Contudo, tal como mencionado, este ensaio destina-se a ser utilizado apenas com amostras de mulheres com vaginite. NAATs estão rapidamente se tornando disponíveis que são destinados a preencher este nicho de teste e fornecer a sensibilidade aumentada associada com NAATs., Estes ensaios são importantes para controlar os esforços e irão mudar o paradigma actual de quem é testado e em que contextos. Para mulheres com sinais ou sintomas de infecção, estes testes podem ser úteis devido à sua elevada sensibilidade e tempo relativamente rápido para resultados. Por exemplo, uma mulher com dor pélvica mas sem corrimento vaginal não seria elegível para testes com o teste Affirm, mas poderia beneficiar do uso de NAAT em um departamento de emergência (ED) ou estabelecimento correcional, onde uma espera de 60 a 90 minutos por resultados não seria irracional.,

um desses testes que recebeu aprovação da FDA em 2015 é o teste AmpliVue Trichomonas (Quidel, San Diego, CA). Este ensaio utiliza a amplificação isotérmica dependente da helicase (32) para detectar o ADN de trichomonas com uma leitura do fluxo lateral. É necessário um pequeno analisador específico do ensaio, que é designado por ensaio de nível moderado CLIA. Os resultados estão disponíveis dentro de 1 h, e a sensibilidade e especificidade parecem ser semelhantes às da cultura., Note-se que não existem publicações disponíveis sobre comparações entre este teste e outras NAATs, pelo que os dados de sensibilidade no Folheto Informativo, obtidos em comparação com os dos métodos de microscopia e cultura menos sensíveis, devem ser considerados como uma sobrestimação potencial. Infelizmente, este ensaio não pode ser executado em conjunto com testes de clamídia/gonorreia na mesma plataforma, o que limita um pouco a sua aplicabilidade em muitas configurações.,

neste momento, o Xpert TV ensaio (Cefeidas, Sunnyvale, CA) ainda não foi aprovado pelo FDA, mas está disponível com a marca CE na Europa e é esperado para estar disponível nos Estados Unidos em um futuro próximo. Este ensaio utiliza um sistema PCR em tempo real num cartucho descartável. Os instrumentos variam de um módulo de cartucho único a instrumentos de cartucho de 80. O débito varia com base no tamanho da instrumentação, com cada cartucho exigindo aproximadamente 60 minutos para gerar resultados de trichomonas., O sistema Xpert tem uma vantagem em que o menu para esta plataforma é amplo e flexível, uma vez que todos os ensaios são realizados dentro de cartuchos. Assim, um cartucho de trichomonas pode estar rodando enquanto um cartucho de clamídia / gonorreia está rodando no módulo seguinte. O menu estende-se além de STIs para uma ampla gama de patógenos, tornando este instrumento ideal para configurações de baixa produção que optam por consolidar um grande número de testes em uma única plataforma., Por exemplo, uma ED pode usar este sistema para gerar resultados de STI para um paciente apresentando queixas relacionadas com a saúde sexual enquanto simultaneamente executando Staphylococcus aureus resistente à meticilina e testes de Clostridium difficile para outros pacientes. Além disso, este teste tem uma reivindicação na Europa e vai, espera-se, ter um nos Estados Unidos para a urina masculina, tornando esta a única plataforma em que os testes podem ser fornecidos para os homens. Isto é relevante uma vez que a taxa de infecção entre os homens que são contactos sexuais de mulheres com infecções por trichomonas foi relatada como sendo de 70% (16).,

T. a infecção vaginalis tem sido uma STI largamente ignorada por muitos anos. No entanto, ao longo da última década, a pesquisa epidemiológica tem demonstrado consistentemente associações com resultados negativos evitáveis para a saúde. Embora a justificação para não incluir T. vaginalis na lista de doenças notificáveis nos Estados Unidos seja sólida (9), continua a ser necessário melhorar as oportunidades de testes, especialmente para as mulheres., Em muitos contextos, embora não haja recomendação do CDC, quando o rastreio da clamídia/gonorreia é realizado durante o primeiro trimestre de cuidados de saúde pré-natais, o rastreio da infecção por trichomonas está agora a ser adicionado. Esta triagem foi adicionada em grande parte como resultado da conveniência de ser capaz de encomendar vários testes de uma única amostra de paciente. Os dados para apoiar esta triagem estão se tornando mais fortes à medida que testes de alta qualidade estão sendo usados e dados mais precisos estão sendo gerados (20)., Além disso, na maioria obstetrícia e ginecologia e planejamento familiar configurações nos Estados Unidos, a taxa de infecção por trichomonas é substancialmente maior do que a de gonorréia e uma vez que os provedores de acesso a dados sobre sua específicas de populações de pacientes, eles estão muito interessados em ter acesso a este teste.

muitas opções POC e low-throughout que permitem testes locais estão em desenvolvimento. Aqueles que terão o maior impacto são testes que têm a opção de ser executado com testes de clamídia/gonorreia, têm alta sensibilidade, e produzem resultados rapidamente., Tal como acontece com todos os testes médicos, o cost desempenhará um papel fundamental na aceitação, mas a expansão da concorrência no mercado ajudará a manter os custos razoáveis. Projetos de fluxo clínico que podem capitalizar em amostras obtidas pelo paciente e pedidos de teste de rotina podem ser capazes de tirar proveito de um paradigma de teste e tratamento dentro de uma rotina de cuidados de saúde sexual ou de visita de cuidados urgentes., Disponibilidade de testes para os homens que são parceiros sexuais de mulheres com infecções por trichomonas, o que é importante, dada a alta taxa de infecção de concorrência dentro de parceiros sexuais (16), ou homens que têm uretrite provável aumento na demanda se que o teste pode ser fornecido como um quase-paciente teste rápido. A triagem em regiões como o sudeste dos Estados Unidos, onde tanto a prevalência de trichomonas quanto as taxas de incidência de HIV entre as mulheres negras são as mais altas do país, pode fornecer uma ferramenta adicional em nosso kit de ferramentas de prevenção de HIV (23)., Assim, o teste de trichomonas está aqui para ficar e só se tornará mais frequentemente utilizado no futuro, uma vez que os testes disponíveis para esse teste continuam a melhorar em precisão e conveniência tanto para os pacientes quanto para os provedores.