Hemoglobinúria paroxística Noturna (HPN)

Tabela 1

Existem alguns Fatores Que Podem Afetar os Resultados de Laboratório?, Em particular, o seu paciente toma algum medicamento-medicamentos OTC ou herbais – que possa afectar os resultados do laboratório?

a utilização do tubo de recolha errado, por exemplo EDTA, pode bloquear a activação do complemento e produzir resultados falsos negativos no teste de lise de sacarose. A maioria dos métodos utiliza agora soluções de sacarose tamponadas, uma vez que as soluções de sacarose não-Barradas também podem produzir resultados falsos-negativos. O EDTA também pode bloquear a activação do complemento no teste sérico acidificado, produzindo um resultado falso-negativo. É necessário um ajuste preciso do pH para o pH 6.78 +/- 0.1 para resultados confiáveis., A utilização de um laboratório de referência pode ser necessária se a lise da sacarose e os testes séricos acidificados não forem de rotina na sua instituição. A hemossiderina urinária não tem de ser intracelular para ser considerada positiva, dado que a urina normal deve ser negativa para os grânulos de hemossiderina.que resultados laboratoriais são absolutamente confirmatórios?

um diagnóstico definitivo de HPN está disponível através da citometria de fluxo. Os doentes com HPN têm uma expressão diminuída de uma proteína chamada glicofosfatidilinositol (GPI) ancora proteínas nos glóbulos vermelhos., Consequentemente, haverá menor ligação de CD55 e CD59, que modulam a atividade do complemento e se ligam principalmente à superfície celular GPI. Tanto o CD55 quanto o CD59 podem ser diminuídos nas superfícies dos glóbulos vermelhos; no entanto, uma vez que o CD55 é mais expressado do que o CD59, é mais provável que forneça o resultado definitivo.a citometria de fluxo é muito sensível e pode medir pequenas populações celulares ou clones afetados pela doença (ao nível de 1-5%). Pode também detectar o aparecimento destes clones em doentes com anemia aplástica ou com medula óssea hipoplástica., Tal como acontece com a maior parte da citometria de fluxo, o sangue deve ser colhido em tubos heparinizados e avaliado nas 24 horas seguintes à colheita para um teste óptimo.que testes de confirmação devo solicitar para o meu Dx clínico? Além disso, que testes de acompanhamento podem ser úteis?

o gene responsável pela HPN é o gene a fosfatidilinositolglicano (Porco-A). Encontra-se no cromossoma X. As mutações somáticas associadas à HPN podem ser altamente variáveis. A maioria das mutações consistem em pequenas supressões de pares de base ou inserções, mas substituições de base também podem ocorrer., As mutações conduzem tipicamente a uma transformação do ADN e, consequentemente, resultam numa redução da transcrição e tradução do produto proteico.

As mutações também podem ocorrer em múltiplos locais dentro do gene PIG-A. As mutações na HPN associada à aplástica-anemia tendem a ser maiores e/ou mais frequentes quando comparadas apenas com doentes com HPN. Para além das proteínas moduladoras complementares (CD55 e CD59), o GPI liga-se a muitas outras proteínas que podem afectar variavelmente a estabilidade da membrana e a activação do complemento., Um dos problemas mais perplexos na identificação de HPN é a variabilidade na expressão do GPI, resultando em pacientes que variam de leve a grave supressão da síntese do GPI. O uso de citometria de fluxo para detecção de ligação CD55 reduzida é uma maneira de resolver este mosaicismo ou expressão. Em última análise, o sequenciamento rotineiro do gene e do genoma completo pode levar a informações importantes sobre a HPN e sua associação com anemia aplástica.que factores, se houver, podem afectar os resultados do Laboratório?, Em particular, o seu paciente toma algum medicamento-medicamentos OTC ou herbais – que possa afectar os resultados do laboratório?

devido à raridade da HPN, muitos erros estão relacionados ao teste de pacientes com HPN que não foram completamente avaliados para as etiologias mais comuns de sua apresentação, seja doença hemolítica crônica ou anemia de deficiência de ferro. A maioria dos erros resulta desta análise clínica incompleta e ocorrem nos estágios iniciais da revisão clínica., Todos os pacientes com o aparecimento de anemia por deficiência de ferro, por exemplo, devem ser cuidadosamente revistos para Fontes de sangramento e avaliados usando o padrão CBC, diferencial, e testes de triagem para anemia por deficiência de ferro antes de prosseguir o teste de HPN., Da mesma forma, um paciente que se apresente com hemolítica crônica da doença devem ser cuidadosamente analisados para a anterior transfusões, induzida por drogas, hemólise, e outras enfermidades crônicas e causas de hemólise, antes de buscar mais específicos PNH teste

Desde que os testes de triagem para a PNH (sacarose lise de teste, Presunto de teste) dependem de materiais biológicos do paciente, em comparação com o normal de glóbulos vermelhos, os testes de necessidade são menos precisos e são potencialmente mais sensíveis quando incorrectamente executada. Estes resultados são qualitativos e baseados em inspeção visual., É importante avaliar adequadamente os tubos de controle por falta de hemólise tanto no teste de lise de sacarose quanto no teste de Ham. Assim, vale a pena ter tais testes realizados em um laboratório de referência com experiência na padronização desses testes.

citometria de fluxo é provavelmente o mais preciso dos testes disponíveis para PNH; no entanto, mesmo citometria de fluxo tem várias questões. Uma questão é a medição da” ausência ” do marcador CD55. Provar resultados negativos é sempre uma interpretação mais difícil para o patologista da citometria de fluxo., Além disso, o facto de o CD59 ser expresso em níveis oito vezes inferiores ao CD55 torna o CD59 um marcador “back-up” inadequado para a HPN.