a Ética
Este estudo foi conduzido de acordo com as normas da Declaração de Helsinki (1964) e está de acordo com o Regional, Comitê de Ética, em Gotemburgo.
cães
dois cães foram usados, Hanna, um Schnauzer gigante preto de 10 anos (chip no., 967000000389928), e Lotti, um Schnauzer gigante preto de 6 anos (chip no. 098100311386). O dono e o encarregado é o GH. Os cães vivem como animais de estimação da família com o proprietário e sua família. Há livre acesso à água doce durante todo o dia, e alimentação três vezes por dia. Os cães passam várias horas por dia em um jardim ou em caminhadas. Os controlos sanitários são efectuados na Clínica Veterinária de Värmdö, Gustavsberg.
formação
o método de formação foi descrito em pormenor noutro local . Nos 2 anos anteriores ao presente estudo, foi utilizada apenas formação de manutenção uma vez por semana., Cada uma das sessões de treinamento incluiu 4-10 caixas, 0-3 das quais continham tecido cancerígeno ou sangue de pacientes com carcinoma do ovário. A configuração foi seleccionada aleatoriamente antes de cada sessão. Este programa permitiu que os cães fossem confrontados com um problema diferente para resolver em cada ocasião de treinamento. Os cães foram recompensados apenas por uma identificação correta. Foram utilizadas amostras de sangue com valores
500 U/ml CA-125 como indicador de carcinoma ovárico. Uma gota da amostra de treino foi colocada num pequeno prato de plástico dentro de cada caixa., As amostras de sangue utilizadas durante o período de treino não foram utilizadas nos testes. Os cães foram usados no experimento com a permissão do Conselho de Ética Regional em Gotemburgo, número de licença: S-220-08. Os cães tiveram livre acesso à água doce durante o treinamento e horas de teste. Depois de 2 horas de trabalho, os cães foram caminhados ou tiveram 20 minutos de tempo livre.os doentes foram seleccionados para inclusão neste estudo retrospectivo a partir das bases de dados clínica e bio-bancária. Este último contém sangue e tecido canceroso de doentes com cancro do ovário., O Material foi coletado após a obtenção da permissão do paciente individual e foi regulado pelo Programa de tratamento para o câncer de ovário na Suécia Ocidental. A seleção do paciente foi feita a partir da base de dados clínica, depois os resultados foram correlacionados com a base de dados bio-banco para obter amostras de sangue.
o principal critério de selecção aplicado a todos os doentes do estudo foi a remissão clínica completa (CR) antes do sexto esquema de quimioterapia (final). Os doentes seleccionados para a primeira série foram divididos em 3 grupos., O grupo a, incluiu doentes com 3 anos de sobrevivência sem recidiva, o Grupo B incluiu doentes que tiveram recidiva nos 6 meses após a última sessão de tratamento; e para o Grupo C incluiu doentes que tiveram recidiva entre 1 e 2 anos após o tratamento. Um total de 66 doentes com CR nos anos 2001-2007 foram seleccionados na série 1. Todos eram da área de Gotemburgo e também estavam na base de dados bio-bank. Quarenta e dois doentes apresentaram amostras num biobank, correspondendo a um dos três critérios secundários de selecção para inclusão no Grupo A, B ou C., A seleção para a segunda série foi feita usando apenas a base de dados biobank.
foram colhidas amostras de sangue
de doentes que vivem na área de Gotemburgo, na Suécia Ocidental.
= = ligações externas = = O programa de tratamento do câncer de ovário requer análise CA-125 em duas ocasiões. Primeiro, antes ou diretamente após a cirurgia primária, e o segundo antes do sexto curso de tratamento de quimioterapia. No entanto, como de costume no programa de tratamento para carcinoma do ovário, o nível CA-125 não foi incluído no acompanhamento, embora os médicos têm a opção de verificá-lo., Foram utilizadas amostras de sangue com valores
500 U/ml CA-125 para treino de cães, com uma gota a ser colocada numa pequena placa de plástico dentro de cada caixa. As amostras de sangue utilizadas durante o período de treino não foram utilizadas nos testes.as amostras de sangue de referência para o grupo de referência foram seleccionadas a partir da base de dados bio-bank. As variáveis clinicopatológicas não foram consideradas porque os resultados do nosso estudo anterior mostraram que não afetaram a sensibilidade de detecção dos cães ., Um total de 62 amostras (42 Série I, e 20 para II Série), de diferentes indivíduos, com o CA-125 valores >200 U/ml foram aleatoriamente selecionados como material de referência na Série I e II.
Teste de amostras de sangue em Série I
Quarenta e duas amostras foram coletadas e utilizadas como material de teste em Série I. Estas amostras de sangue foram tomadas antes do sexto curso de quimioterapia. Os doentes foram divididos em três grupos., O grupo a consistiu em 13 doentes que tinham uma CR, sobrevivência sem recidiva de 3 anos e valores normais (
35 U/ml) CA-125valores antes do último tratamento. O grupo B consistiu em 12 doentes com CR, recidivados em 6 meses, e todos com excepção de 2 (61 U/ml; <200 U/ml) tiveram CA-125 <35UI. O Grupo C consistiu em 17 doentes com CR, recorrência entre 1 e 2 anos e valores normais de CA-125. Histopatologia tumoral, estágio e grau variaram dentro dos grupos.,foram utilizadas amostras de sangue com valores de CA-125
500 U / ml, sendo colocada uma gota numa pequena placa de plástico dentro de cada caixa. As amostras de sangue utilizadas durante o período de treino não foram utilizadas nos testes.as amostras de sangue da série II foram colhidas 3 e 6 meses após o sexto ciclo de quimioterapia final. Infelizmente, não conseguimos seguir os pacientes da primeira série, Grupo A, porque nenhum deles tinha sangue no banco de sangue. Recolhemos sangue de 10 outros doentes que eram seguidos regularmente., A idade mediana do dador foi de 65 anos (intervalo de 38-78 anos).
amostras de sangue de controlo
amostras de controlo foram colhidas durante os 2 anos entre 2007 e 2009, principalmente em voluntários do pessoal médico feminino em Gotemburgo. Os critérios de inclusão foram que as doentes se sentiam saudáveis, não estavam grávidas e estavam isentas de doença ginecológica. Os materiais de controlo e de ensaio não eram compatíveis com a idade. As pessoas mais jovens foram conscientemente escolhidas como fonte de amostras de controle para reduzir o risco de presença assintomática de câncer de ovário., Assim, tanto os grupos de controle quanto de teste tinham amostras de mulheres pré e pós-menopáusicas.as amostras de sangue foram recolhidas em tubos EDTA e depois centrifugadas a 3000 rpm durante 10 minutos com vasos de plasma sobre os pequenos tubos de plástico. Após a centrifugação, o plasma foi dividido em duas partes, uma para análise CA-125 e a outra para experimentos subsequentes. A última parte foi mantida a -80 ° C no banco de tumores (número de licença do Comitê de Ética: S-220-08, Conselho Regional de revisão ética em Gotemburgo)., As amostras de plasma de controlo foram processadas e armazenadas de forma idêntica aos alvos. No entanto, os tubos com sangue de controlo foram armazenados separadamente. A idade mediana do dador foi de 45 anos (intervalo de 29-65 anos).os testes foram realizados de forma dupla-cega, como descrito anteriormente . Resumindo, tanto o test leader como o handler ficaram cegos para a localização das amostras-alvo, e estavam presentes no local de teste apenas quando os cães estavam a trabalhar. Os cães foram testados em duas séries. A série I abrangeu 4 dias (2 dias por ocasião), enquanto a Série II abrangeu 2 dias., Dez corridas foram realizadas em cada dia, exceto um dia na primeira série, quando 11 corridas foram realizadas. Cada corrida incluiu sete caixas, colocadas em um círculo a cerca de 2 m de distância uma da outra. Cada caixa continha uma gota de plasma; cinco materiais de controlo contidos, um continha uma amostra de ensaio e um continha uma amostra de referência. Materiais de referência foram obtidos antes, ou pouco depois da operação primária, e, portanto, tinha uma alta concentração de moléculas de odor. A colocação do alvo e caixas de referência foi alterada por um assistente entre cada execução. Cada caixa foi limpa com álcool entre as corridas., Os testes foram documentados em papel e DVD pelo líder do teste e um assistente .
as respostas do cão
uma resposta positiva foi definida como indicando a caixa-alvo, arranhando com a perna dianteira, deitado e cheirando-a (e não indicando as amostras de controlo). Uma resposta negativa foi definida como farejando e indicando uma caixa de controle e não indicando o alvo. Uma resposta incerta foi definida como parar na caixa, cheirá-la, arranhá-la, e possivelmente ladrar, mas indo em frente e não deitado.,
tratamento de carcinomas do ovário
de acordo com o programa de tratamento padrão na Suécia Ocidental, os doentes foram tratados por histerectomia total, salpingo-ooforectomia bilateral, omentectomia, biopsias peritoneais múltiplas e lavagem peritoneal com citologia. Aproximadamente 4 semanas após a cirurgia primária foi administrada a primeira combinação de carboplatina, ciclofosfamida e epirrubicina. Foi administrado um total de seis ciclos em intervalos de 4 semanas.,
métodos estatísticos
os dados brutos foram resumidos como sensibilidade (a probabilidade condicional do cão indicar cancro quando a condição estava presente) e especificidade de teste (a probabilidade condicional do cão ignorar uma amostra de um dador saudável). Sensibilidade e especificidade dão uma visão sobre a capacidade de classificação geral dos cães.a probabilidade preditiva positiva e negativa de que o teste daria o diagnóstico correto também foi calculada. As estimativas pontuais foram calculadas com intervalos de confiança de 95%., Tanto a sensibilidade como a especificidade foram expressas em proporções, pelo que as técnicas padrão para as proporções podem ser aplicadas para a inferência estatística. Os intervalos de confiança basearam − se na aproximação normal, p ± 1, 96 p 1-p / n em que p é a sensibilidade estimada, a respectiva especificidade e n é o número de ensaios.