ORIGINAL FORSKNING
Serum b2-microglobulin verdier blant friske Brasilianere ved hjelp av en DPC IMMULITE® – analysen
Verdier av b2-microglobulin em brasileiros saudáveis bruker eller automatisert system for DPC IMMULITE®
Fabíola Branco Filippin; Liliete Canes Souza
Institutt for Klinisk Analyse, Vitenskap og Helse Senter, Federal University of Santa Catarina – Florianópolis/SC, Brasil. E-post: [email protected].,br
ABSTRAKT
FORMÅL: denne studien var designet for å bestemme normal utvalg av serum beta-2-microglobulin (Sb2M) nivåer blant friske frivillige i Brasil. Nivåer av Sb2M er forhøyet i humant immunsviktvirus (HIV)-infiserte pasienter og har vist seg å være den beste prediktor for HIV-status, og av noen ondartede sykdommer, spesielt multippel myelom., For å oppnå optimal bruk i Brasiliansk klinisk diagnose, en god referanse intervall studien ble utført for Sb2M IMMULITE® – analysen, som er basert på det faktum at dens referanse utvalg grenser ble evaluert blant Europeiske populasjoner.
METODER: seks og Nitti, friske blodgivere ble evaluert, og Sb2M nivåene ble målt ved kjemisk luminescente enzym immunoassay bruke IMMULITE® automated analyzer.
RESULTATER: EN normal utvalg av Sb2M verdier, som er opprettet av en nonparametric statistisk metode, var 1.05 3,9 mg/mL, med øvre grense være høyere enn det som er rapportert andre steder.,
KONKLUSJON: Denne studien presenteres nye data indikerer at det er en betydelig forskjell mellom de aktuelle referanse grenser for Sb2M IMMULITE® – analysen og de som finnes i Brasil, og gir bevis for at betydelige forskjeller i omfanget av normale verdier kan oppstå mellom ulike bestander, og at disse nye verdiene bør vurderes for Brasilianske enkeltpersoner.
Søkeord: b2-microglobulin. Referanse intervall. Kjemisk luminescente immunoassay. Friske frivillige. Prognostisk verdi.,
abstrakt
mål: målet med denne studien var å finne ut baseline verdier i serum B2-microglobulin (Sb2M) i friske frivillige. Det er kjent at denne parameteren er for høy i pasienter infisert med humant immunsviktvirus (HIV) og har vist seg å være en bedre markør av HIV-infeksjon og ondartede sykdommer, spesielt multippel myelom., For å oppnå best klinisk diagnose, en god referanse utvalg av Sb2M for den Brasilianske befolkningen ble bestemt ved hjelp av IMMULITE® – analysen, siden dette er en parameter som er en referanse utvalg bestemt fra Europeiske populasjoner.
metoder: seks og nitti, friske blodgivere ble evaluert og Sb2M verdier ble målt ved kjemisk luminescente enzym immunoassay metode som bruker IMMULITE®automated analyzer.
resultater: verdier av Sb2M, etablert av nonparametric statistisk metode, var mellom 1.05 og 3.,9 mg / ml, og den øvre grensen som er innhentet var høyere enn det som er rapportert i andre studier.
konklusjon: denne studien presenteres nye verdier, noe som indikerer at det er en betydelig forskjell mellom referanse grensene for Sb2M tilgjengelig for IMMULITE® og de som er funnet i denne undersøkelsen, der det er tydelig at forekomsten av viktige variasjoner mellom ulike befolkningsgrupper, og at nye verdier bør vurderes for Brasilianerne.
Uniterms: B2-microglobulin. Referanse utvalg. Kjemisk luminescente immunoassay. Friske frivillige. Prognostisk verdi.,
Beta-2-microglobulin (b2M) et protein som finnes i alle nucleated celler, er forbundet med histocompatibility klasse 1-antigener på celleoverflaten slimhinner (spesielt rikt på lymfocytter og monocytter).1 Det ble først oppdaget i urinen hos pasienter med nyresvikt.2 på Grunn av sin lave molecular vekt (11,800 dalton-brødrene), 95% av alle gratis b2M i plasma er eliminert ved glomerular filtration, og 99.9% av det som er tatt opp ved proksimal tubulær celler. I nærvær av en normal nedsatt filtrering pris, forhøyet serum-b2M (Sb2M) nivåer indikerer høy b2M produksjon eller release3., Ved aktivering av immunsystemet, både B – og T-lymfocytter aktivt utgivelsen b2M i sirkulasjon fra der det er senere eliminert via glomerular filtration og tubulær reabsorpsjon.4 Økt Sb2M konsentrasjoner har blitt funnet hos pasienter med blod celler dyscrasias, inkludert myelomatose,5,6 ondartet lymphoproliferative lidelser,7 myeloproliferativ lidelser,8 visse virusinfeksjoner som HIV infection9, cytomegalovirus, ikke-En og ikke-hepatitt B, og mononukleose.,10 nivået av Sb2M er også brukt som en viktig prognostisk faktor hos pasienter med flere myeloma5,6 og HIV-infeksjoner.9
normal referanse utvalg for Sb2M i friske individer som finnes i litteraturen som ble fastsatt ved hjelp av Nord-Amerikanske og Europeiske populasjoner (DPC Immulite® – analysen). I et forsøk på å bestemme normal utvalg av Sb2M nivåer blant asymptomatiske seronegative Afrikanske enkeltpersoner, Piwowar et al. (1995)10 funnet at 50% av disse fagene hadde unormale verdier (middelverdier 2.35 mg/mL). I en annen studie, mener Sb2M verdi blant friske frivillige ble 1.36 mg/mL.,11 I denne rapporten beskriver vi Sb2M verdier i sunn Brasilianske motiver fra en gruppe av blodgivere i Hematologi og Hemotherapy Sentrum av Santa Catarina (HEMOSC).
FAG
blodgivere, menn og nonpregnant kvinner alt fra 25 til 50 år, ble inkludert i studien. Alle personer gjennomgikk en klinisk vurdering evaluert av HEMOSC, inkludert spørreskjemaer og screening tester i laboratorium i henhold til Brazilian juridiske kriterier. Alle frivillige som oppfyller disse kriteriene ga muntlige og skriftlige samtykke, å ha en ekstra 5 mL blod trukket for studiet formålet., Den eksperimentelle protokollen ble godkjent av Etisk Komité ved University Hospital of Florianópolis, Federal University of Santa Catarina.
METODER
Hele blod ble samlet inn med en Vacutainer-systemet i 10 mL tørr-rør, og serum ble skilt ved sentrifugering. For å eliminere lipid komponenter, serumprøver var ultracentrifuged på 18000 g for 20 min. Alle blodprøver ble innhentet mellom 2:00 og 6:00 pm og ble behandlet innen 5 timer etter venepunksjon., Prøvene ble forhåndsfortynnet 1-i-41 i b2M-prøvediluent (IMMULITE® Beta2 Microglobulin kit, DPC, USA) i henhold til produsentens instruksjoner, og 5 mL var nødvendig for analysen prosedyre. Sb2M ble målt ved en fast-fase 2-nettstedet luminescent enzym immunoassay bruke IMMULITE® Automated Analyzer (DPC, Los Angeles, USA).
Statistiske analyser
I referanse utvalg studie for DPC IMMULITE® analyse, og middelverdien var 1.26 mg/mL., Den Nasjonale Komiteen for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), adresser bruk av a priori og a posteriori eksklusjonskriterier for å få en sunn prøver.12 Derfor, alle fag med Sb2M verdier større enn 2,0 mg/mL var klinisk revurderes for verdien aksept for å sikre at hver enkelt var «frisk». Data ble registrert og analysert med Microsoft Excel-programvare. Middelverdi og standardavvik verdiene ble beregnet. Den 95.-persentilen referanseområdet ble bestemt ved hjelp av 97.5 2.5 og prosentiler., I henhold til den prosedyre som er anbefalt av clsi (NCCLS), observasjoner ble rangert i forhold til størrelsen, og den 2,5 og 97.5 prosentiler ble innhentet som 0.025 (n + 1) og 0.975 (n + 1) bestilte observasjoner henholdsvis (n= utvalgsstørrelsen). Dersom den estimerte verdi verdier ble ikke heltall, lineær interpolasjon ble gjennomført.12
RESULTATER
seks og Nitti, som Brasilianske blodgivere, 60 menn og 36 kvinner, med en gjennomsnittsalder (år) av 33, ble inkludert i studien. Verdier av Sb2M varierte mellom 1.05 og 3,9 mg/mL, som vist i Figur 1, og mener var 2.46 mg/mL (standardavvik = 0.73)., Derfor bruker 97.5 th-persentilen i henhold til en rutine nonparametric metode,12 3.9 mg/mL ble ansett som den øvre normal grense. Serien ble etablert 1.33.9 mg/mL.
DISKUSJON
Forskere over hele verden har rapportert om nytten av Sb2M som en pålitelig maker i vurdering av progresjon av HIV-infeksjon og myelomatose.5-8,10,13 I HIV-infiserte fag, Sb2M ser ut til å være en bedre prediktor for HIV-smitte status enn CD4 teller, og også en bedre prediktor for overlevelse, med økt Sb2M nivåer er assosiert med progresjon av sykdommen.,10
Økt produksjon og påfølgende utslipp av Sb2M i kroppsvæsker har blitt rapportert hos pasienter med myelomatose. Betydningen av disse data for klinikere som er basert på det faktum at myelom plasmacellene produserer Sb2M. Derfor er det antatt at Sb2M verdier kan indikere ikke bare størrelsen, men også proliferativ aktivitet av myelom cells13 og kan bli akseptert som en uspesifikk maker of tumor masse.5,6,13,14 I tillegg prognostiske rollen Sb2M i andre proliferativ lidelser har blitt bekreftet av mange forfattere,7,14,15 tilrettelegging for klinisk vurdering.,15 På den andre siden, har det blitt rapportert at pasienter med lav glomerular filtration rate, Sb2M nivå ble hevet og laboratorium resultatene bør tolkes med forsiktighet.6,7,13
Referanse intervaller er brukt klinisk, sammen med mer informasjon, som retningslinjer om tilstanden til pasienten. Referanse utvalg studie for IMMULITE® Sb2M (1.01.7 mg/mL, mener 1.26 mg/mL) som er definert av produsenten ble fastsatt ved hjelp av serumprøver fra nesten 800 voksne frivillige, inkludert både menn og nonpregnant kvinner, alt fra 20 til 70 år., Temaene ble valgt ut basert på spørreskjemaer. Prøvene ble samlet inn i Frankrike, Tyskland, Nederland og Portugal, og verdier fremstilt ble analysert nonparametrically. Den foreslåtte øvre grensen var 1,7 mg/mL. Disse verdiene kan ikke være representant for Brasilianske enkeltpersoner. I fravær av tilstrekkelig referanse utvalg grenser for Sb2M avledet fra noen Brasilianske befolkningen, mange etterforskere har vært ved hjelp av data innhentet fra Nord-Amerikanske og Europeiske fag som er presentert øvre grenser 2.3 ganger lavere enn det som ble oppnådd i denne studien.,
NCCLS anbefaler at nonparametric referanse intervaller bli brukt, og at utvalgsstørrelsen n, skal bestå av minst 120 verdier for å beregne et 95% referanse intervall, 2.5% – og 97.5% – poeng av distribution12. Dette nummeret er det minste antallet verdier som er nødvendige for konstruksjon av konfidensintervaller å gi informasjon om nøyaktigheten til de beregnede referanse grenser.
I denne studien, 96 prøvene ble evaluert., Målet vårt var ikke å produsere nye referanse intervaller, men for å gi mer fokus på behovet for ethvert laboratorium for å produsere sin egen referanse intervaller for alle parametre på tross av mange problemer, inkludert de praktiske og høye utgifter.
Den foreliggende studien viser at betydelig forskjellige områder av Sb2M verdier kan oppstå mellom ulike bestander, noe som tyder på at hver Brasilianske laboratorium bør etablere sin egen referanse grenser.,
TAKK
Vi takker Hematologi og Hemotherapy Sentrum av Santa Catarina og den Kliniske Analysen Laboratory, University Hospital of Florianópolis for prøvene og teknisk assistanse. Vi er takknemlige for DPC IMMULITE® for å gi reagens sett gratis for denne studien og til Dr. Joanita Del Moral fra Hematologi Avdeling, universitetssykehuset i Florianópolis.
2. Berggard jeg & Bearn AG. Isolasjon og egenskapene til en lav molekylvekt, beta-2-globulin som oppstår i menneskelige biologiske væsker., J Biol Kem 1968;243(15):4095-103.
6. Greipp PR, Katzman JA, O ‘ Fallon, WM, Kyle RA. Verdien av beta-2microglobulin nivå og plasma celle merking indekser som prognostiske faktorer hos pasienter med nylig diagnostisert myelom. Blod 1988;72(1):219-23.
7. Constantines IP, Pathouli C, Karvountzis G, Papadopoulos P, Varvoutsi-Constantinides M, Eliakis P, et al. Serum beta 2-microglobulin i ondartet lymphoproliferative lidelser. Kreft 1985;15(10):2384-89.
8. Rodriguez J, Cortes J, Talpaz M, O ‘ Brien S, Smith TL, Rios MB, et al., Serum beta-2 microglobulin nivåer er en signifikant prognostisk faktor i Philadelphia chomossome-positiv kronisk myelogen leukemi. Clin Cancer Res 2000;6:147-52.
10. Cooper E, Forbes M & Hammbling M. Serum beta-2-microglobulin og C-reaktivt protein konsentrasjoner i viral infeksjoner. J Clin Pathol 1985;37:1140-3.
11. Diamondstone LS, Tollerud DJ, Fuchs D, Wachter H, Brun LM, Maloney E, et al. Faktorer som påvirker serum neopterin og beta-2-microglobulin nivåer i en sunn mangfoldig befolkning. J Clin Immunol 1994;14(6):368-74.
12., National Committee for Clinical Laboratory Standards. Hvordan til å definere og bestemme referanse intervaller i kliniske laboratorier: godkjent veiledning, clsi (NCCLS) dokument C28-En og C28-A2, Villanova, PA, 1995, 2001, clsi (NCCLS).