Kliniske og laboratorietesting for Trichomonas vaginalis Infeksjon

DIAGNOSTIKK

Påvisning av infeksjon kan oppnås ved en rekke teknikker, alt fra klinisk diagnose til laboratorie-basert testing (Tabell 1). Klinisk diagnose er passende for kvinner presenterer med symptomer på infeksjon, utflod, kløe og/eller vaginal lukt. De mest brukte diagnostiske testen er våt forberedelse mikroskopi., En bomullspinne som er brukt for å samle inn materiale fra vaginal fornix og plassert i en liten mengde, 0,5 til 1,0 ml, av fysiologisk saltvann. En dråpe saltvann forberedelse er plassert på en side og sett på med et mikroskop med en 40× mål. Motile trichomonads kan bli sett på vei i forberedelsene med en særegen asynkron bevegelse. Flagella og en bølgende membran på den ene siden av organismen må være synlig., Forsiktighet må utvises for å sørge for at organismer er motile fordi størrelsen av en trichomonad er omtrent den samme som for en hvite blodlegemer, som trolig vil være til stede i prøver fra pasienter med en utladning. Organismer miste motilitet ex vivo på grunn av temperatursvingninger, så glir bør være forberedt på og lese så snart som mulig etter prøvetaking, for å unngå falske negative resultater. Mens motile trichomonads er svært karakteristiske hvis observert mikroskopisk, organismen legg nødvendig for å fange opp tilstrekkelige organismer for visualisering er ukjent., Sammenligningen med nyere diagnostiske analyser tyder på at vått forberedelse mikroskopi er bare 40 til 60% sensitiv, selv blant symptomatisk kvinner (24). Imidlertid, observasjon av motile trichomonads er svært spesifikke og dermed er veldig nyttig for å bestemme behandlingen. Mikroskopi bør aldri brukes som en screening-metode for asymptomatiske kvinner.

Bedre alternativer til mikroskopi er tilgjengelig som kan oppdage flere infeksjoner og kan brukes uavhengig av tilstedeværelse av symptomer. En slik analyse kan brukes på point of care (POC) er OSOM (Sekisui, Framingham, MA) immunochromatographic enzym-analysen er utført på en kapillær flow peilepinnen enheten med en vaginale vattpinneprøver. Analysen baserer seg på en latex-merket antistoff bindes spesifikt til trichomonas proteiner og en sekundær fange antistoff til å binde komplisert å lateral-flow-enheten., Testen er Klinisk Laboratorium Forbedring Endringer (CLIA) frafalles, noe som gjør det egnet for bruk POC, og resultatene er tilgjengelig innen 15 minutter. Egenskapene til denne analysen er ganske god. I flere studier, bruk av denne testen har forbedret sak å finne betydelig i forhold til antallet av tilfeller finnes bare ved mikroskopi. I studier å sammenligne OSOM analysen med nucleic acid amplification tester (Naat), den POC test utført ganske godt, med følsomhet lik som Naat (>80% i forhold til Naat på >90%) (24, 25)., Den eneste ulempen til denne testen er at den kan bare brukes for kvinner, og kan ikke være sammen med POC chlamydia/gonoré screening. Dermed, kvinner som er behandlet for trichomonas-infeksjon i løpet av et kontor besøk basert på en positiv OSOM test kan fortsatt behov for å gå tilbake et sekund på besøk hvis de blir senere diagnostisert med enten klamydia eller gonoré på grunnlag av et laboratorium diagnostisk test.

bruk av POC-testen er tydelig fremgå når symptomatisk kvinner tilstede for diagnostisk evaluering., Evnen til å definere causative agent og gi riktig behandling mens pasienten er fortsatt i klinikken er kritisk viktig for å redusere smitteoverføring (26). Men, når du er å stole på mikroskopi, leverandører bør du være oppmerksom på at negative resultater kan være falske, mangler 50% eller mer av infeksjoner, og laboratorium evaluering kan gi nyttig informasjon. Dette er særlig aktuelt for kvinner uten tegn eller symptomer og for testing av menn (selv de med symptomer)., Våt forberedelse mikroskopi er et nyttig første test for kvinner med symptomer siden behandling kan bli gitt umiddelbart. Men, det skal brukes i en kaskade prosess der mikroskopi-negative prøvene sendes til et laboratorium for videre evaluering.

Laboratorie-basert diagnostikk har den ulempen av ikke å gi umiddelbare resultater, mens pasienten venter, slik at behandling kan bli gitt før utløpet av pasienten besøk., Men evnen til å isolere organismer, utnytte molekylær teknologi, test for flere patogener, som er ofte funnet sammen, eller kjøre store batch-størrelser kan resultere i stordriftsfordeler og mer medisinsk informasjon som støtter bruk av disse testene i mange innstillinger. Disse fordelene er spesielt relevante for kvinner uten symptomer, men der risikoen for smitte er høy, og for menn generelt siden organismen laste ser ut til å være lettere i disse gruppene, og dermed høy følsomhet og lave deteksjonsgrenser er nødvendig.,

Den tradisjonelle laboratorie-baserte diagnostiske testen ble trichomonas kultur med en modifisert Diamond medium. Kulturer er vurdert ved mikroskopi av et lysbilde forberedt fra en dråpe av kultur medium daglig i opptil 7 dager. En betydelig utvikling i kultur ble sett på med tilgjengeligheten av InPouch (Biomed Diagnostikk, Santa Clara, CA, usa) – systemet, som inneholder kultur medium i en pose som kan være plassert på mikroskopet scenen. Dermed er hele volumet av kultur kan bli vurdert for tilstedeværelse av trichomonads., Den InPouch system oppnådd en trinnvis økning i følsomheten over rutine kultur (27), men den virkelige fordelen med systemet er forbedret logistikk. Dette systemet har potensial som verktøy i ressurs-begrenset innstillinger der clinic-basert mikroskopi kan ikke være gjennomførbart, men et sentralt laboratorium kan være i stand til å gi low-tech behov som inkubasjon og mikroskopisk vurdering. I høy-ressurs innstillinger, den eneste virkelige nytteverdien av kultur er å få levedyktige organismer som kan være relevant for antimikrobiell resistenstesting., Rapporter om motstand mot metronidazol, den mest brukte behandlingen for trichomonas infeksjoner, er beskrevet i litteraturen, men det virkelige omfanget av dette problemet er ukjent og resistenstesting utføres ikke rutinemessig (5).

Ikke-kultur-baserte tester ofte gi en økning i evnen til å oppdage infeksjoner siden levedyktige organismer er ikke lenger nødvendig. Den første kommersielt tilgjengelige ikke-kultur-basert test for T. vaginalis var Bekrefter VPIII (BD, Gnister, MD). Denne analysen bruker DNA-probe-teknologi for å oppdage Candida albicans, Gardnerella vaginalis, og T., vaginalis-DNA i en enkelt vaginale vattpinneprøver. Testen er konstruert kun for bruk med prøver fra kvinner med utflod. Testen er rask (resultatene er tilgjengelig i <1 h) og kjøres på en liten analyse-spesifikt instrument. Analysen kan utføres i kliniske eller nettstedet laboratorier som er akkreditert for å utføre CLIA moderat kompleksitet testing. Resultatene av analysen for påvisning av T. vaginalis hos kvinner med vaginitt er bedre enn mikroskopi (28), men betydelig dårligere enn for Naat-er., Den virkelige nisje for denne analysen er disentangling den utløsende agenter av utflod i populasjoner der Soi (f.eks., klamydia eller gonoré) er ikke utbredt. Manglende evne til å utnytte denne test for screening av blant høy-risiko, asymptomatiske kvinner og mangel på følgesvenn chlamydia/gonoré tester på samme plattform begrense denne testen er anvendelige i mange innstillinger.

– Naat-ene har blitt anerkjent gold standard for screening og diagnostisering av C. trachomatis og N. gonorrhoeae (29)., Årlig chlamydia screening anbefales for alle kvinner <25 år gammel, uavhengig av atferdsmessige risikofaktorer eller symptomer, i Usa og i mange Europeiske land. Anbefalinger for screening for gonokokkinfeksjoner er knyttet til spesifikke atferdsmessige risikofaktorer heller enn generalisert screening på grunn av mye lavere prevalens av denne organismen. Som nevnt ovenfor, målrettet screening av kvinner i høy-risiko populasjoner for trichomonas-infeksjon er anbefalt (7)., Til tross for disse forskjellene i anbefalinger, spesielt i Usa, som er vanlig praksis er å bundle klamydia og gonoré testing for kvinner som er kvalifisert for chlamydia screening. I løpet av de siste 5 årene, og flere produsenter av klamydia/gonoré-Naat-ene har produsert trichomonas-Naat-ene som kan utføres med det samme prøve (en vaginale vattpinneprøver er eksempel på valg, men endocervikale prøver og urinprøver fra kvinner er ryddet for eksempel for noen typer analyser)., Som et resultat, STI kontroll programmer har nå muligheten til å gi screening-og diagnostiske tjenester og samtidig skape bedre epidemiologiske data om infeksjon med T. vaginalis i ulike populasjoner. Nedenfor finner du beskrivelser av flere tiden tilgjengelig Naat-er som benytter ulike forsterkning teknologier. På grunn av raskt skiftende landskap av smittsom sykdom diagnostikk, denne listen er ikke uttømmende, men fokuserer på analyser der data er tilgjengelig på dette tidspunktet. Videre, bestemte karakteristika er ikke gitt her., Begrunnelsen for dette er at følsomheten og spesifisiteten estimatene er bare så god som de tester som en ny analyse er sammenlignet. Dermed, mikroskopi kan ha vist seg å være svært sensitive i forhold til ingenting, men klinisk observasjon. Men vi vet nå at mikroskopi utfører dårlig i forhold til nyere tester. Den iboende skjevheter i analysen evaluering er mange og gjøre over-studie sammenligninger vanskelig til det punktet at de er nesten uninterpretable. Mens eksakte-punkt estimater har liten betydning, det er klart at Naat-ene gjør det bedre enn alle andre klasser av tester for T. vaginalis.,

Den første NAAT for påvisning av T. vaginalis å være godkjent av Food and Drug Administration (FDA) i Usa er Aptima TV-analysen (Hologic, San Diego, CA, usa). Analysen er en tilpasning av Aptima Combo 2-Chlamydia/gonorétest, slik at utnyttelsen av prøvene som er samlet inn for chlamydia/gonoré screening (30). Tatt av kliniker vaginale vattpinner for endocervikale vattpinneprøver, og endocervikale vattpinneprøver, prøver i PreservCyt (Hologic, San Diego, CA, usa), en væskebasert cytologi medium, er godkjent for eksempel typer for analysen., Teknologien er basert på rRNA utvinning fra prøver, etterfulgt av transkripsjonsformidlet amplifikasjon av fanget rRNA. Bruk av dette målet gir en naturlig økning av grensen for påvisning siden 102 103 kopier eksisterer innenfor hver organisme. Amplifiserte produkter som følge av isotermisk forsterkning er oppdaget av en kjemisk luminescente reaksjon målt med et luminometer. Analysen kan utføres med enten Tigris DTS-systemet eller Panther-systemet, som begge er fullt automatiserte og kan produsere 275 400 resulterer i en 8-timers arbeide skift., Testing er atskilt fra chlamydia/gonoré testing, slik at den opprinnelige prøven må prøves to ganger for å få resultater for alle tre organismer, men testing kan gjøres samtidig på Panther-systemet slik at alle resultater er tilgjengelig på samme tid. Resultatene av denne analysen er utmerket, med sensitivitet og spesifisitet estimater av >90% og >95%, henholdsvis (30).

en Annen høy gjennomstrømning, fullt automatisert system med en godkjent analysen for T., vaginalis er Viper XTR-systemet, som utfører BD ProbeTec Trichomonas vaginalis Qx (TVQ) analyse (BD, Gnister, MD). Denne analysen er basert på strand displacement amplification (SDA) av DNA ekstrahert fra pasientprøver med jern-oksid (31). SDA er en isotermisk prosessen med real-time amplifikasjon og detektering av lys-utslipp med god sensitivitet og spesifisitet (>95% og >99%, henholdsvis) (31)., Viper plattformen kan generere >700 resultater i et enkelt verk skift og kan teste for chlamydia/gonoré og trichomonas infeksjoner i et enkelt trekk fra pasienten eksempel container (dvs., en enkelt DNA elution trinn kan gi alle tre resultater). I tillegg til pasient-fikk vaginale vattpinneprøvene og endocervikale prøver, denne analysen har en FDA-krav for urinprøver fra kvinner. Mens kvinnelige urin er ikke den ideelle eksempel skriver for trichomonas (eller chlamydia/gonoré) infeksjon testing (29), det er en vanlig innhentet eksempel type, noe som gjør dette til et nyttig fordel.,

Mens høy gjennomstrømning plattformer i referanse laboratorier kan bidra til å realisere kostnadsbesparelser, kan det være forbundet frakt tid og kostnader som vil gjøre testing i mindre, lokale laboratorier som et attraktivt alternativ. Det Bekrefter analysen nevnt ovenfor er et eksempel på en test (CLIA-moderat) som kan brukes i stedet laboratorium. Imidlertid, som nevnt, denne analysen er kun for bruk med prøver fra kvinner med vaginitt. – Naat-ene er raskt å bli tilgjengelig som er ment å fylle denne testingen nisje og gi forbedret følsomhet forbundet med Naat-er., Disse analysene er viktig å STI kontroll innsats, og vil skifte gjeldende paradigme som er testet og i hvilke innstillinger. For kvinner med tegn eller symptomer på infeksjon, disse analysene kan være nyttig på grunn av sin høye følsomhet og relativt rask tid til resultater. For eksempel, en kvinne med bekken smerte, men ingen utflod ikke ville være kvalifisert for testing med Bekrefter analysen, men kan dra nytte av NAAT bruk i en akuttavdeling (ED) eller kriminalomsorgen anlegget omgivelser, hvor en 60 – til 90-min vente på resultatene ville ikke være urimelig.,

En slik analyse fått FDA-godkjenning i 2015 er AmpliVue Trichomonas-analysen (Quidel, San Diego, CA, usa). Denne analysen bruker isotermisk helicase avhengige av forsterkning (32) til å gjenkjenne trichomonas DNA med en lateral-flow avlesing. En liten, analysespesifikke analyzer er nødvendig, og denne analysen er det utpekt en CLIA-moderat-nivå test. Resultatene er tilgjengelig i 1 h, og sensitivitet og spesifisitet synes å være lik de av kultur., Det bør bemerkes at ingen publikasjoner som er tilgjengelig om sammenligninger mellom denne testen, og andre-Naat-ene, slik at følsomheten data i pakningsvedlegget, som ble innhentet i sammenligningen med de av de mindre sensitive mikroskopi og kultur metoder, bør tas som en potensiell overvurdere. Dessverre, denne analysen kan ikke kjøres i forbindelse med chlamydia/gonoré testing på samme plattform, som noe som begrenser dens anvendelse i mange innstillinger.,

På denne tiden, Xpert-TV-analysen (Cepheid, Sunnyvale, CA, usa) har ennå ikke blitt godkjent av FDA, men det er tilgjengelig med et CE-merke i Europa, og forventes å være tilgjengelig i Usa i nær fremtid. Denne analysen bruker en real-time PCR-system i en engangs-kassett. Instrumenter varierer fra en enkelt-patron-modulen til 80-kassett instrumenter. Produksjonen varierer på grunnlag av størrelsen på den instrumentering, med hver kassett krever ca 60 min for å generere trichomonas resultater., Den Xpert-systemet har en fordel i at menyen for denne plattformen er bred og fleksibel ettersom alle analysene er utført innen blekkpatroner. Dermed, en trichomonas tonerkassetten kan være å kjøre, mens en klamydia/gonoré tonerkassetten kjører i neste modul. Menyen strekker seg utover Kjønnssykdommer til et bredt spekter av patogener, noe som gjør dette instrumentet ideelt for lav gjennomstrømning innstillinger som velger å konsolidere et stort antall tester på en enkelt plattform., For eksempel, en ED kan bruke dette systemet for å generere STI resultater for en pasient presenterer med klager i slekt å seksuell sunnhet, samtidig som kjører meticillin-resistente Staphylococcus aureus og Clostridium difficile testing for andre pasienter. Videre er denne analysen har et krav i Europa, og vil, det er håpet, har en i Usa for urinprøver fra menn, noe som gjør dette den eneste plattformen som testing kan være tilgjengelig for menn. Dette er relevant fordi frekvensen av smitte blant menn som har seksuell kontakt med kvinner med trichomonas infeksjoner er rapportert å være så høy som 70% (16).,

T. vaginalis-infeksjon har vært en stor grad oversett STI i mange år. Imidlertid, i løpet av det siste tiåret, epidemiologiske undersøkelser har vist at foreninger med unødvendige negative helsevirkninger. Mens begrunnelsen for ikke å legge T. vaginalis til listen over er meldepliktig sykdommer i Usa er lyd (9), er det fortsatt et behov for bedre testing muligheter, spesielt for kvinner., I mange innstillinger, men det er ingen anbefaling fra CDC, når screening for chlamydia/gonoré er utført i løpet av første trimester av prenatal behandling, trichomonas-infeksjon screening blir nå lagt til. Dette screening har blitt lagt i stor grad som et resultat av fordelene av å være i stand til å bestille flere tester av pasientprøver. Data å støtte dette screening er å bli sterkere som mer høyverdig tester blir brukt og mer nøyaktige data som blir generert (20)., Videre, i de fleste obstetrikk og gynekologi og familieplanlegging innstillinger i Usa, frekvensen av trichomonas-infeksjon er vesentlig høyere enn for gonoré og når leverandører har tilgang til data om deres spesifikke pasientpopulasjoner, de er veldig interessert i å ha tilgang til denne testingen.

Mange POC og lavt hele alternativer som gjør det mulig for lokale testing er i utvikling. De som vil ha størst innvirkning er tester som har muligheten til å kjøre med chlamydia/gonoré testing, har høy sensitivitet, og gi resultater raskt., Som med alle medisinske tester, koste vil spille en avgjørende rolle i opptak, men å utvide konkurransen i markedet vil bidra til å holde kostnadene rimelig. Klinikken flow design som kan kapitalisere på pasient-innhentet prøver og rutinemessig test bestilling kan være i stand til å dra nytte av en prøve-og-behandle paradigme innen en rutine seksuell helse eller påtrengende-omsorg besøk., Tilgjengeligheten av testing for menn som er seksuelle partnere av kvinner med trichomonas infeksjoner, noe som er viktig gitt den høye frekvensen av infeksjon concurrency innen seksuelle partnerskap (16), eller menn som har urinrørsbetennelse vil sannsynlig økning i etterspørselen om at testing kan være gitt som en nær-pasienten rask test. Screening i områder som i det sørøstlige Usa, hvor både trichomonas prevalens og HIV-forekomst blant svarte kvinner er de høyeste i landet, kan gi et ekstra verktøy i vår HIV-forebygging toolkit (23)., Dermed er trichomonas-testing er her for å bli og vil bare bli mer ofte benyttes i fremtiden som analysene er tilgjengelig for testing fortsette å øke i korrektheten og bekvemmelighet for både pasienter og tilbydere.