윤리
이 연구에 따라 수행되는 규정의 헬싱키 선언(1964)및 준수하는 지역 윤리위원회,예테보리.
개
두 마리의 개가 사용되었다,한나,10 세의 검은 거인 슈나우저(칩 번호., 967000000389928),및 Lotti,6-year-old black Giant Schnauzer(칩 no.098100311386). 소유자와 핸들러는 GH 입니다. 개는 주인과 그의 가족과 함께 가족 애완 동물로 산다. 하루 종일 신선한 물,그리고 하루에 세 번 먹이에 무료로 액세스 할 수 있습니다. 개들은 정원이나 산책에서 매일 몇 시간을 보냅니다. 건강 검진은 Värmdö Animal Clinic,Gustavsberg 에서합니다.
훈련
훈련 방법은 다른 곳에서 자세히 설명되었습니다. 현재 연구 이전에 2 년 동안 일주일에 한 번 유지 관리 교육 만 사용되었습니다., 교육 세션에는 각각 4-10 개의 상자가 포함되었으며 그 중 0-3 에는 난소 암 환자의 암 조직 또는 혈액이 들어있었습니다. 설정은 각 세션 전에 무작위로 선택되었습니다. 이 프로그램을 통해 개들은 각 훈련 행사에서 해결해야 할 다른 문제에 직면 할 수있었습니다. 개들은 올바른 신분증에 대해서만 보상을 받았습니다. 난소 암종의 지표로서>500U/ml CA-125 값을 갖는 혈액 샘플을 훈련에 사용 하였다. 훈련 샘플 한 방울을 각 상자 안의 작은 플라스틱 접시에 넣었습니다., 훈련 기간 동안 사용 된 혈액 샘플은 시험에 사용되지 않았습니다. 개들은 예테보리의 지역 윤리 검토위원회(Regional Ethical Review Board)의 허가,라이센스 번호:S-220-08 의 허가를 받아 실험에 사용되었습니다. 개들은 훈련과 시험 시간 동안 신선한 물 을 자유롭게 이용할 수있었습니다. 2 시간의 작업 후,개들은 산책을하거나 20 분의 자유 시간을 가졌습니다.
환자 선택
환자에 포함하도록 선택한 이 회고전 연구에서 클리닉과 바이오 데이터베이스 은행. 후자에는 난소 암 환자의 혈액 및 암 조직이 포함되어 있습니다., 자료는 개별 환자의 허가를 얻은 후 수집되었으며 서부 스웨덴의 난소 암 치료 프로그램에 의해 규제되었습니다. 환자 선택은 먼저 클리닉 데이터베이스에서 이루어졌으며 그 결과는 혈액 샘플을 얻기 위해 바이오 뱅크 데이터베이스와 상관되었습니다.
중요한 선택 기준을 적용하여 모든 연구는 환자의 임상 완전한 죄 사함(CR)기 전에 여섯 번째(으)예정된 화학요법이다. 시리즈 I 로 선택된 환자는 3 개의 그룹으로 나뉘었다., 그룹 포함되는 환자들과 3 년 동안의 재발-무료 생존 그룹 B 포함되는 환자 relapsed 후 6 개월 이내에 마지막 처리 회의,그리고 C 그룹 포함되는 환자 relapsed1 과 2 년 후에 치료입니다. 2001-2007 년 동안 CR 을 가진 총 66 명의 환자가 시리즈 1 에서 선정되었습니다. 모두 예테보리 지역 출신이었고 바이오 뱅크 데이터베이스에도 있었다. Forty-two 환자는 샘플에서 바이오 뱅크 중 하나에 해당하는 세 개의 보조에 대한 선택 기준에 포함 그룹 A,B,C., 시리즈 II 에 대한 선택은 biobank 데이터베이스 만 사용하여 이루어졌습니다.
혈액 샘플
혈액 샘플 수집된 환자에서 생활에서 예테보리의 스웨덴입니다. 인구는 약 60 만 명입니다. 에서 난소 암 치료 프로그램은 두 차례에 걸쳐 CA-125 분석이 필요합니다. 첫째,일차 수술 전 또는 직후에,그리고 화학 요법 치료의 여섯 번째 과정 전에 두 번째. 그러나,일반적인 치료 프로그램를 위해 난소암,CA-125 수준에 포함되지 않은 follow-up 지만 의사 확인할 수 있는 옵션이다., 혈액 샘플과 함께>500U/ml CA-125 값을 사용했던 개를 위한 훈련으로,하나의 드롭다는 위치에 작은 플라스틱 요리 내부에는 각 상자입니다. 훈련 기간 동안 사용 된 혈액 샘플은 시험에 사용되지 않았습니다.
참조 혈액 샘플
자료에 대한 참조는 그룹에서 선택한 바이오 데이터베이스 은행. Clinicopathological 변수로 간주되지 않기 때문에 우리의 이전 연구 결과 나타났다 그들은 영향을 미치지 않았 개의 민감도 감지합니다., 총 62 개의 샘플을(42Series I 고 20 시리즈 II)에서,다른 개인과 함께,CA-125 값>200U/ml 무작위로 선택한 참조 자료로서 시리즈 I 및 II.
테스트에서 혈액 샘플 시리즈
Forty-두 개의 샘플의 수집 및 이용으로 테스트에서 재료 시리즈 I. 이러한 혈액 샘플이 촬영하기 전에 여섯 번째 코스의 화학요법. 환자는 세 그룹으로 나뉘었다., 그룹 A 는 마지막 치료 과정 전에 CR,3 년 재발없는 생존 및 정상(<35U/ml)CA-125values 를 가진 13 명의 환자로 구성되었다. B 그룹의 구성 12 환자 CR,relapsed6 개월 이내에,그리고 모든을 제외하고 2(61U/ml;<200U/ml)했 CA-125<35UI. 그룹 C 는 CR,1 년에서 2 년 사이의 재발 및 정상 CA-125 값을 가진 17 명의 환자로 구성되었다. 종양 조직 병리학,단계 및 등급은 그룹 내에서 다양했다.,
혈액 샘플과 함께>500U/ml CA-125 값을 사용되었을 위해 훈련 중 하나,드롭고에 위치한 작은 플라스틱 요리 내부에는 각 상자입니다. 훈련 기간 동안 사용 된 혈액 샘플은 시험에 사용되지 않았습니다.
시리즈 II
샘플의 시험 혈액 샘플은 여섯 번째,최종 화학 요법 과정 후 3 개월 및 6 개월 후에 채취되었다. 불행히도,우리는 시리즈 I,그룹 A 에서 환자를 따라갈 수 없었기 때문에 그들 중 누구도 혈액 은행에 혈액이 없었기 때문입니다. 우리는 정기적으로 추적 관찰 된 10 명의 다른 환자들로부터 혈액을 수집했습니다., 평균 기증자 연령은 65 세(범위,38-78 세)였다.
제 혈액 샘플
컨트롤 샘플 수집하는 동안 2 년 2007 년과 2009 년 사이에,대부분에서 여성 의 직원들 봉사자들에서 예테보리. 포함 기준은 환자가 건강하다고 느끼고 임신하지 않았으며 부인과 질환이 없다는 것이 었습니다. 대조군과 시험 자료는 연령과 일치하지 않았다. 젊은 사람들이 의식적으로 선택된 원본으로 제어 샘플의 위험을 줄이기 위해 존재 무증상의 난소암입니다., 따라서 대조군과 시험군 모두 폐경 전 및 폐경 후 여성의 샘플을 가지고있었습니다.
샘플 준비
혈액 샘플 수집에 EDTA 관한 다음 원심 분리 3000rpm 에서 10 분과 플라즈마분을 통해 작은 플라스틱 튜브입니다. 원심 분리 후,혈장을 두 부분으로 나누었고,하나는 CA-125 분석 용이고 다른 하나는 후속 실험용이었다. 후반부에 -80°C 에서 종양 은행(윤리위원회 라이센스 수:S-220-08,지역 윤리적인 검토 위원회에서 예테보리)., 대조군 혈장 샘플을 처리하여 표적과 동일하게 저장 하였다. 그러나 대조 혈액이있는 튜브는 별도로 보관되었습니다. 평균 기증자 연령은 45 세(범위,29-65 세)였다.
테스트 설계
테스트는 이전에 설명한대로 이중 맹검 방식으로 수행되었습니다. 요약하면 두 지도자 테스트 및 처리기부터 눈을 대상의 위치 샘플과 존재 테스트에 위치 때만 개되었다. 개들은 두 가지 시리즈로 테스트되었습니다. 시리즈 I 는 4 일(행사 당 2 일)을 다루었으며 시리즈 II 는 2 일을 다루었습니다., 11 번의 실행이 수행되었을 때 시리즈 I 에서 1 일을 제외하고 매일 10 번의 실행이 수행되었습니다. 각 실행에는 서로 약 2m 떨어져있는 원에 배치 된 7 개의 상자가 포함되었습니다. 각 박스에 포함된 드롭 플라즈마의 다섯이 포함된 제어 소재,하나는 포함되는 테스트 샘플,그리고 중 하나에 포함된 참조 샘플입니다. 참고 자료는 1 차 작업 전 또는 직후에 취해졌으며,따라서 냄새 분자의 농도가 높았다. 대상 및 참조 상자의 배치는 각 실행 사이에 보조자에 의해 변경되었습니다. 각 상자는 실행 사이에 알코올로 청소되었습니다., 테스트는 테스트 리더와 한 명의 조수가 종이와 DVD 에 문서화했습니다.
개 응답
긍정적인 응답했으로 정의를 나타내는 대상자에 의해를 긁적으로 지상에 누워,스니다(그리고 나타내는 컨트롤 샘플). 부정적인 반응은 스니핑 및 제어 상자를 나타내고 대상을 나타내지 않는 것으로 정의되었습니다. 불확실한 응답으로 정의 중지에서는 상자,그것을 냄새,긁기에서 그것은,가능하게 짖는 소리하지만,똑바로에 거짓말을하지 않습니다.,
치료의 난소 carcinomas
라인에 표준 치료 프로그램에서 웨스트 스웨덴,환자들에 의해 처리된 총 자궁절제술,양국 난관-난소절제술,omentectomy,여러 개의 복 생체검사 및 복 세척과 세포학. 1 차 수술 후 약 4 주 후에 첫 번째 카보 플 라틴,시클로 포스 파 미드 및 에피 루비 신 조합이 주어졌습니다. 총 6 개의 코스가 4 주 간격으로 투여되었습니다.,
통계적 방법
원시 데이터를 요약으로 감도(조건부 확률의 개를 나타내는 암을 때 조건이 제시)및 특이성 테스트(조건부 확률의 개를 무시하는 샘플에서 건강한 기증자). 민감성과 특이성은 강아지의 일반적인 분류 능력에 대한 통찰력을 제공합니다.
검사가 올바른 진단을 내릴 것이라는 양성 및 음성 예측 확률도 계산되었습니다. 포인트 추정치는 95%신뢰 구간으로 계산되었습니다., 민감도와 특이성 모두 비율로 표현되었으므로 통계적 추론을 위해 비율에 대한 표준 기술을 적용 할 수있었습니다. 신뢰 구간은 정상 근사,p±1.96p1−p/n 여기서 p 는 추정 된 민감도,각각의 특이성 및 n 은 테스트 실행 횟수를 기준으로합니다.