PŮVODNÍ VÝZKUM,
Sérum b2-mikroglobulin hodnoty mezi zdravé Brazilci pomocí DPC IMMULITE® assay
Hodnoty b2-mikroglobulin je brasileiros saudáveis použití nebo automatizovaný systém DPC IMMULITE®
Fabíola Branco Filippin; Liliete Hole Souza
Oddělení Klinické Analýzy, Věda a Zdravotní Středisko, Federal University of Santa Catarina – Florianópolis/SC, Brazílie. E-mail: [email protected].,br
ABSTRAKT
CÍL: tato studie byla navržena tak, aby určit normálním rozmezí sérového beta-2-mikroglobulin (Sb2M) v krvi u zdravých dobrovolníků v Brazílii. Hladiny Sb2M jsou zvýšené u pacientů infikovaných virem lidské imunodeficience (HIV) a ukázalo se, že jsou nejlepším prediktorem stavu infekce HIV a některých maligních poruch, zejména mnohočetného myelomu., Aby bylo dosaženo jeho optimálního využití v Brazilské klinická diagnóza, adekvátní referenční interval studie byla provedena pro Sb2M IMMULITE® assay, na základě skutečnosti, že jeho referenční meze rozsahu byly hodnoceny u Evropské populace.
METODY: Devadesát šest zdravých dárců krve byly hodnoceny, a Sb2M hladiny byly měřeny pomocí chemiluminiscenční enzymové imunoanalýzy s použitím IMMULITE® automatizovaný analyzátor.
VÝSLEDKY: normální rozsah Sb2M hodnoty stanovené pomocí neparametrické statistické metody, byl 1,05 na 3,9 mg/mL, s horní hranicí vyšší, než bylo uvedeno jinde.,
ZÁVĚRY: Tato studie představila nové údaje, což naznačuje, že existuje významný rozdíl mezi aktuální referenční meze pro Sb2M IMMULITE® assay a ty, které našel v Brazílii, poskytující důkaz, že významné rozdíly v rozmezí normálních hodnot, může dojít mezi různými populacemi, a že tyto nové hodnoty by měly být považovány za pro Brazilské jedinců.
klíčová slova: B2-mikroglobulin. Referenční interval. Chemiluminiscenční imunotest. Zdraví dobrovolníci. Prognostická hodnota.,
abstrakt
cíl: cílem této studie bylo stanovit základní hodnoty sérového B2-mikroglobulinu (Sb2M) u zdravých dobrovolníků. Je známo, že tento parametr je vysoká u pacientů nakažených virem lidské imunodeficience (HIV) a bylo prokázáno, že být lepší marker HIV infekce a maligní onemocnění, zejména mnohočetný myelom., Za účelem dosažení nejlepší klinické diagnózy Byl pomocí testu IMMULITE® stanoven odpovídající referenční rozsah Sb2M pro brazilskou populaci; protože má jako parametr referenční rozsah stanovený od evropských populací.
metody: devadesát šest zdravých dárců krve byly vyhodnoceny a Sb2M hodnoty byly měřeny pomocí chemiluminiscenční enzymoimuno metodou IMMULITE®automatizovaný analyzátor.
výsledky: hodnoty Sb2M, stanovené neparametrickou statistickou metodou, byly mezi 1,05 a 3.,9 mg / ml a získaná horní hranice byla vyšší než v jiných studiích.
závěr: tato studie představila nové hodnoty, což znamená, že existuje významný rozdíl mezi referenční meze Sb2M k dispozici pro IMMULITE® a ti nalezený v této studii, prokazující výskyt významné rozdíly mezi různými populacemi a že nové hodnoty by měly být považovány za Brazilci.
Uniterms: B2-mikroglobulin. Referenční rozsah. Chemiluminiscenční imunotest. Zdraví dobrovolníci. Prognostická hodnota.,
beta 2-mikroglobulin (b2M) protein nalezený ve všech nukleovaných buňkách je spojen s antigeny histokompatibilní třídy 1 na buněčných povrchových membránách (zvláště hojné na lymfocytech a monocytech).1 to bylo poprvé objeveno v moči pacientů s selháním ledvin.2, Protože jeho nízké molekulární hmotnosti (11,800 daltonů), 95% všech free b2M v plazmě je eliminován glomerulární filtrací, a na 99,9% je přijata do proximální tubulární buňky. Za přítomnosti normální rychlosti renální filtrace naznačují zvýšené hladiny B2M v séru (Sb2M) vysokou produkci b2M nebo uvolnění 3., Po aktivaci imunitního systému B-I T-lymfocyty aktivně uvolňují B2M do oběhu, odkud je později eliminován glomerulární filtrací a tubulární reabsorpcí.4 Zvýšená Sb2M koncentrace byly nalezeny u pacientů s krevní buňky dyskrazie, včetně mnohočetného myelomu,5,6 maligní lymfoproliferativní poruchy,7 myeloproliferativní poruchy,8 některých virových infekcí, jako je HIV infection9, cytomegalovirus, non-a a non-B hepatitidy a infekční mononukleózy.,10 Hladina Sb2M se také používá jako důležitý prognostický faktor u pacientů s mnohočetným myelomem5,6 a HIV infekcemi.9
normální referenční rozsah pro Sb2M u zdravých jedinců nalezených v literatuře byl stanoven pomocí severoamerické a evropské populace (test DPC Immulite®). Ve snaze určit normální rozsah hladin Sb2M u asymptomatických séronegativních afrických jedinců, Piwowar et al. (1995) 10 zjistilo, že 50% těchto subjektů mělo abnormální hodnoty (průměrné hodnoty 2, 35 mg/mL). V jiné studii byla průměrná hodnota Sb2M u zdravých dobrovolníků 1, 36 mg / ml.,11 V této zprávě, jsme se popsat Sb2M hodnoty u zdravých Brazilské předměty ze skupiny dárců krve na Hematologii a Hemoterapie Centru Santa Catarina (HEMOSC).do studie byly zařazeny subjekty
dárci krve, muži a netěhotné ženy ve věku od 25 do 50 let. Všichni jedinci podstoupili klinické hodnocení hodnoceny HEMOSC, včetně dotazníků a screeningové laboratorní testy podle Brazilských právních kritérií. Všichni dobrovolníci splňující tato kritéria dali ústní a písemný souhlas s odebráním dalších 5 mL krve pro účely studie., Experimentální protokol byl schválen etickým Výborem Fakultní nemocnice Florianópolis, Federální univerzity Santa Catarina.
metody
celá krev byla odebrána s Vacutainerovým systémem v 10 mL suchých zkumavkách a sérum bylo odděleno centrifugací. Za účelem odstranění lipidových složek byly vzorky séra ultracentrifugovány na 18000 g po dobu 20 minut. Všechny vzorky krve byly získány mezi 2:00 a 6:00 p. m. a byly zpracovány do 5 hodin po venepunkci., Vzorky byly předředěny 1-v-41 v b2M Vzorek Diluent (IMMULITE® Beta2 Mikroglobulin kit, DPC, USA) podle instrukcí výrobce, a 5 mL bylo potřebné pro postup testu. Sb2M byl měřen imunoanalýzou chemiluminiscenčního enzymu v pevné fázi 2 pomocí automatizovaného analyzátoru IMMULITE® (DPC, Los Angeles, USA).
Statistická analýza
ve studii referenčního rozsahu pro test DPC IMMULITE® byla průměrná hodnota 1, 26 mg/ml., Národní výbor pro klinické laboratorní standardy (NCCLS) se zabývá použitím a priori a posteriori vylučovacích kritérií pro získání zdravých vzorků.12 Tudíž, všechny předměty s Sb2M hodnoty vyšší než 2,0 mg/mL byly klinicky reevaluated pro value přijetí, aby zajistily, že každý jednotlivec byl „zdravý“. Data byla zadána a analyzována pomocí softwaru Microsoft Excel. Byly vypočteny hodnoty střední a standardní odchylky. Referenční rozsahy 95. percentilu byly určeny použitím 2, 5 a 97, 5 percentilů., Podle postupu doporučené NCCLS, připomínky byly seřazeny podle velikosti, a 2,5 a 97,5 percentil byly získány jako je 0, 025 (n + 1) a 0.975 (n + 1) nařídil pozorování, respektive (n= velikost vzorku). Pokud odhadované hodnoty hodnosti nebyly celá čísla, byla provedena lineární interpolace.12
výsledky
devadesát šest brazilských dárců krve, 60 mužů a 36 žen s průměrným věkem (yr) 33 byly zahrnuty do studie. Hodnoty Sb2M pohybovala mezi 1,05 a 3,9 mg/mL, jak je znázorněno na Obrázku 1, a tím byla 2.46 mg/mL (standardní odchylka = 0.73)., Proto bylo při použití 97,5 tého percentilu podle rutinní neparametrické metody považováno za horní normální limit 12 3,9 mg / ml. Rozsah stanovený byl 1,3-3,9 mg / ml.
diskuse
vědci po celém světě hlásili užitečnost Sb2M jako spolehlivého tvůrce při hodnocení progrese infekce HIV a mnohočetného myelomu.5-8,10,13 V HIV-infikovaných osob, Sb2M se jeví jako lepší prediktor infekce HIV status, než počet CD4 lymfocytů a také lepší prediktor přežití, se zvýšenou Sb2M úrovně je spojena s progrese onemocnění.,10
u pacientů s mnohočetným myelomem byla hlášena zvýšená produkce a následné uvolňování Sb2M do tělních tekutin. Význam těchto údajů pro lékaře je založen na skutečnosti, že myelom plazmatické buňky produkují Sb2M. Proto se předpokládá, že Sb2M hodnoty může znamenat nejen velikost, ale také proliferační aktivity myelomových cells13 a mohl být přijat jako nespecifické výrobce nádorové hmoty.5,6,13,14 navíc prognostická role Sb2M u jiných proliferativních poruch byla potvrzena mnoha autory,7,14, 15 usnadňující klinické hodnocení.,15 Na druhé straně, to bylo hlášeno, že u pacientů s nízkou glomerulární filtrace, Sb2M úrovně byly zvýšeny a laboratorní nálezy by měly být interpretovány s opatrností.6,7,13
referenční intervaly se používají klinicky spolu s dalšími informacemi jako pokyny týkající se stavu pacienta. Referenční rozsah studie pro IMMULITE® Sb2M (1.01.7 mg/mL, průměr 1.26 mg/mL) stanovené výrobcem byla stanovena pomocí sérové vzorky od téměř 800 dospělých dobrovolníků, včetně mužů a netěhotných žen, v rozmezí od 20 do 70 let věku., Předměty byly vybrány na základě dotazníků. Vzorky byly shromážděny ve Francii, Německu, Nizozemsku a Portugalsku a získané hodnoty byly analyzovány neparametricky. Navrhovaná horní hranice byla 1, 7 mg / ml. Tyto hodnoty nemusí být reprezentativní pro brazilské jednotlivce. V nepřítomnosti adekvátní referenční meze rozsahu pro Sb2M odvozen z Brazilské populace, mnoho vyšetřovatelů byly pomocí dat získaných ze Severní Ameriky a Evropské subjekty, které předložila horní hranice 2,3 krát nižší než získané v této studii.,
NCCLS doporučuje, aby neparametrický referenční intervaly být použity, a aby velikost vzorku, n, by se měl skládat z nejméně 120 hodnot, aby bylo možné vypočítat 95% referenční interval, 2,5% a 97,5% bodů z distribution12. Toto číslo je minimální počet hodnot potřebných pro konstrukci intervalů spolehlivosti dává informace o správnosti vypočtené referenční meze.
v této studii bylo hodnoceno 96 vzorků., Naším cílem není vyrábět nové referenční intervaly, ale přinést více zaměřit na nutnost pro každou laboratoř vyrábět své vlastní referenční intervaly pro všechny parametry navzdory mnoha obtížím, včetně praktické a vysoké náklady.
tato studie naznačuje, že výrazně odlišné rozsahy Sb2M hodnot mohou nastat mezi různými populacemi, což naznačuje, že každý Brazilský laboratoř by měla stanovit své vlastní referenční meze.,
PODĚKOVÁNÍ
děkujeme Hematologie a Hemoterapie Centru Santa Catarina a Klinické Analýzy Laboratoř, fakultní Nemocnice Florianópolis pro vzorky a technickou pomoc. Jsme vděčni DPC IMMULITE® pro poskytování činidla nastavit zdarma pro tuto studii a Dr. Joanita Del Moral z Oddělení Hematologie, fakultní Nemocnice v Florianópolis.
2. Berggard i & Bearn AG. Izolace a vlastnosti nízkomolekulárního beta-2-globulinu vyskytujícího se v lidských biologických tekutinách., J Biol Chem 1968; 243(15):4095-103.
6. Greipp PR, Katzman JA, O ‚ Fallon WM, Kyle RA. Hodnota beta-2-mikroglobulinu a indexy označování plazmatických buněk jako prognostické faktory u pacientů s nově diagnostikovaným myelomem. Krev 1988; 72(1): 219-23.
7. Constantines IP, Pathouli C, Karvountzis G, Papadopoulos P, Varvoutsi-Constantinides M, Eliakis P, et al. Sérový beta 2 mikroglobulin u maligních lymfoproliferativních poruch. Rakovina 1985; 15 (10):2384-89.
8. Rodriguez J, Cortes J, Talpaz M, O ‚ Brien S, Smith TL, Rios MB, et al., Hladiny mikroglobulinu beta-2 v séru jsou významným prognostickým faktorem u chronické myeloidní leukémie pozitivní na Philadelphii chomossome. Clin Cancer Res 2000; 6:147-52.
10. Cooper E, Forbes m & Hammbling m. sérové koncentrace beta 2-mikroglobulinu A C-reaktivního proteinu u virových infekcí. J Clin Pathol 1985;37: 1140-3.
11. Diamondstone LS, Tollerud DJ, Fuchs D, Wachter H, Brown LM, Maloney E, et al. Faktory ovlivňující hladiny neopterinu v séru a beta 2-mikroglobulinu u zdravé rozmanité populace. J Clin Immunol 1994;14 (6):368-74.
12., Národní výbor pro klinické laboratorní standardy. Jak definovat a určit referenční intervaly v klinické laboratoři: schválené obecné zásady, dokument NCCLS C28-a a C28-A2, Villanova, PA, 1995, 2001, NCCLS.