Paroxysmální Noční Hemoglobinurie (PNH)

Tabulka 1

Existují Nějaké Faktory, Které By mohly Ovlivnit Výsledky?, Zejména, má váš pacient brát nějaké léky – OTC léky nebo Herbáře–, které by mohly ovlivnit výsledky?

použití nesprávné sběrné trubice, například EDTA, může blokovat aktivaci komplementu a vyvolat falešně negativní výsledky v testu lýzy sacharózy. Většina metod nyní používá pufrované roztoky sacharózy, protože bezuzdné roztoky sacharózy mohou také způsobit falešně negativní výsledky. EDTA může také blokovat aktivací komplementu v okyseleném séru test, produkovat falešně negativní výsledek. Přesné nastavení pH je nutné pro pH 6.78 +/- 0.1 pro spolehlivé výsledky., Použití referenční laboratoře může být vyžadováno, pokud není ve vaší instituci rutinní lýza sacharózy a acidifikované sérové testy. Moči hemosiderin nemusí být intracelulární být považován za pozitivní, vzhledem k tomu, že normální moči by měl být negativní na hemosiderin granule.

jaké laboratorní výsledky jsou naprosto potvrzující?

definitivní diagnóza PNH je k dispozici průtokovou cytometrií. Pacienti s PNH mají sníženou expresi proteinu zvaného glykofosfatidylinositol (GPI) kotevní proteiny na červených krvinkách., V důsledku toho dojde ke snížení vazby CD55 a CD59, které modulují aktivitu komplementu a primárně se váží na buněčný povrch GPI. Jak cd55, tak CD59 mohou být sníženy na povrchu červených krvinek; protože však CD55 je vysoce exprimován než CD59, je pravděpodobnější, že poskytne konečný výsledek.

průtoková cytometrie je velmi citlivá a může měřit malé buněčné populace nebo klony postižené onemocněním (na úroveň 1-5%). Může také detekovat vznik těchto klonů u aplastické anémie nebo pacientů s hypoplastickou kostní dření., Stejně jako u většiny průtokové cytometrie by měla být krev odebrána v heparinizovaných zkumavkách a hodnocena do 24 hodin po odběru Pro optimální testování.

jaké potvrzující testy bych měl požádat o své klinické Dx? Jaké následné testy by navíc mohly být užitečné?

gen zodpovědný za PNH je gen fosfatidylinositolglycan a (PIG-a). Nachází se na chromozomu X. Somatické mutace spojené s PNH mohou být vysoce variabilní. Většina mutací se skládá z malých delecí základních párů nebo vložení, ale mohou také nastat základní substituce., Mutace obvykle vedou k frameshiftu DNA a následně vedou ke snížené transkripci a translaci proteinového produktu.

mutace se mohou objevit také na více místech v genu PIG-a. Mutace v aplastické anémii spojené s PNH bývají větší a/nebo častější ve srovnání s pacienty pouze s PNH. Kromě komplementu modulačních proteinů (CD55 a CD59) GPI váže mnoho dalších proteinů, které mohou variabilně ovlivnit stabilitu membrány a aktivaci komplementu., Jedním z více matoucích problémů při identifikaci PNH je variabilita exprese GPI, což vede k pacientům, kteří se pohybují od mírného až po těžké potlačení syntézy GPI. Použití průtokové cytometrie pro detekci snížené vazby CD55 je jedním ze způsobů, jak vyřešit tuto mozaiku nebo výraz. Nakonec rutinní sekvenování genů a celého genomu může vést k důležitým informacím o PNH a jeho spojení s aplastickou anémií.

jaké faktory, pokud existují, mohou ovlivnit výsledky laboratoře?, Zejména, má váš pacient brát nějaké léky – OTC léky nebo Herbáře–, které by mohly ovlivnit výsledky?

Vzhledem k vzácnosti PNH, mnozí jsou chyby týkající se testování pacientů pro PNH, kteří nebyly důkladně vyhodnoceny pro častější etiologie jejich prezentace, ať už je to chronická hemolytická nemoc nebo nedostatek železa anémie. Většina chyb vyplývá z této neúplné klinické analýzy a vyskytuje se v raných stádiích klinického hodnocení., U všech pacientů s výskytem anémie z nedostatku železa, například, by měly být důkladně přezkoumány pro krvácení zdrojů a vyhodnocena pomocí standardní krevní OBRAZ, diferenciál, a screeningové testy pro nedostatek železa anémie před realizací PNH testování., Podobně pacientů léčících se s chronickými hemolytické onemocnění by měly být důkladně přezkoumány pro předchozí transfuze, drogami indukované hemolýze, a jiné chronické příčiny hemolýzy, než sleduje více konkrétních PNH testování

Od screeningové testy na PNH (sacharóza lysis test, Šunka test) spoléhají na biologické materiály od pacientů, ve srovnání s normální červených krvinek, testy nezbytnosti jsou méně přesné a jsou potenciálně méně citlivé, pokud nesprávně provedena. Tyto výsledky testů jsou kvalitativní a založené na vizuální kontrole., Je důležité adekvátně vyhodnotit kontrolní zkumavky pro nedostatek hemolýzy jak v testu na lýzu sacharózy, tak v testu šunky. Proto je vhodné nechat takové testování provést v referenční laboratoři se zkušenostmi se standardizací těchto testů.

průtoková cytometrie je pravděpodobně nejpřesnější z dostupných testů pro PNH; nicméně i průtoková cytometrie má několik problémů. Jedním z problémů je měření“ nepřítomnosti “ značky CD55. Prokázání negativních výsledků je vždy obtížnější interpretací patologa průtokové cytometrie., Také skutečnost, že CD59 je vyjádřena na úrovních osmkrát méně než CD55, činí z cd59 nedostatečnou „záložní“ značku pro PNH.