testarea clinică și de laborator pentru infecția cu Trichomonas vaginalis

caracteristici ale metodelor de diagnostic pentru detectarea T., sunt disponibile alternative mai bune la microscopie care pot detecta mai multe infecții și pot fi utilizate independent de prezența simptomelor. Un astfel de test poate fi utilizat la punctul de ingrijire (POC) este OSOM (Sekisui, Framingham, MA) immunochromatographic enzimă test efectuat pe un circulația capilară joja dispozitiv cu un tampon vaginal specimen. Testul se bazează pe un anticorp etichetat cu latex pentru a se lega în mod specific de proteinele trichomonas și un anticorp secundar de captare pentru a lega complexul de dispozitivul cu flux lateral., Testul este modificări clinice de îmbunătățire de laborator (CLIA) renunțat, făcându-l potrivit pentru utilizarea POC, iar rezultatele sunt disponibile în termen de 15 min. Caracteristicile de performanță ale acestui test sunt destul de bune. În mai multe studii, utilizarea acestui test a îmbunătățit semnificativ găsirea cazurilor în comparație cu numărul de cazuri găsite doar prin microscopie. În studiile care au comparat OSOM test cu testele de amplificare a acizilor nucleici (Hiv), POC test efectuat destul de bine, cu sensibilitate similară cu cea a NAATs (>80% în comparație cu NAATs la >90%) (24, 25)., Singurul dezavantaj al acestui test este că acesta poate fi utilizat numai pentru femei și nu poate fi inclus în screeningul pentru chlamydia/gonoreea POC. Astfel, femeile care sunt tratate pentru infecția cu trichomonas în timpul unei vizite de birou pe baza unui test OSOM pozitiv ar putea avea nevoie să se întoarcă pentru oa doua vizită dacă sunt ulterior diagnosticate fie cu chlamydia, fie cu gonoree pe baza unui test de diagnostic de laborator.utilizarea oricărui test POC este clar justificată atunci când femeile simptomatice sunt prezente pentru evaluarea diagnosticului., Capacitatea de a defini agentul cauzal și de a oferi un tratament adecvat în timp ce pacientul se află încă în clinică este extrem de importantă pentru reducerea transmiterii bolii (26). Cu toate acestea, atunci când se bazează pe microscopie, furnizorii ar trebui să fie conștienți de faptul că rezultatele negative pot fi false, lipsesc 50% sau mai mult din infecții, iar evaluarea de laborator poate oferi informații utile. Acest lucru este relevant În special pentru femeile fără semne sau simptome și pentru testarea bărbaților (chiar și a celor cu simptome)., Pregătirea umedă microscopia este un prim test util pentru femeile cu simptome, deoarece tratamentul poate fi furnizat imediat. Cu toate acestea, ar trebui să fie utilizat într-un proces în cascadă în care probele negative la microscopie sunt trimise la un laborator pentru evaluare ulterioară.diagnosticul bazat pe laborator are dezavantajul de a nu oferi rezultate imediate în timp ce pacientul așteaptă, astfel încât tratamentul să poată fi furnizat înainte de sfârșitul vizitei pacientului., Cu toate acestea, capacitatea de a izola organismele, de a utiliza tehnologii moleculare, de a testa mai mulți agenți patogeni care se găsesc frecvent împreună sau de a rula dimensiuni mari ale loturilor poate duce la economii de scară și informații medicale suplimentare care susțin utilizarea acestor teste în multe setări. Aceste avantaje sunt deosebit de relevante pentru femeile fără simptome, dar al căror risc de infecție este ridicat și pentru bărbați în general, deoarece încărcarea organismului pare a fi mai ușoară în aceste grupuri și, prin urmare, este necesară o sensibilitate ridicată și limite scăzute de detectare.,testul tradițional de diagnostic bazat pe laborator a fost cultura trichomonas cu un mediu diamantat modificat. Culturile sunt evaluate prin microscopie a unui diapozitiv preparat dintr-o picătură de mediu de cultură zilnic timp de până la 7 zile. Un progres semnificativ în cultură a fost observat cu disponibilitatea sistemului Inpouch (Biomed Diagnostics, Santa Clara, CA), care conține mediu de cultură într-o pungă care poate fi plasată pe o scenă de microscop. Astfel, întregul volum al culturii poate fi evaluat pentru prezența trichomonadelor., Sistemul InPouch a obținut o creștere incrementală a sensibilității față de cultura de rutină (27), dar adevăratul avantaj al sistemului este logistica îmbunătățită. Acest sistem are o utilitate potențială în setările cu resurse limitate, unde microscopia bazată pe clinică poate să nu fie fezabilă, dar un Laborator central poate fi capabil să ofere nevoi low-tech, cum ar fi incubarea și evaluarea microscopică. În medii cu resurse mari, singura utilitate reală a culturii este de a obține organisme viabile care pot fi relevante pentru testarea susceptibilității antimicrobiene., Rapoartele privind rezistența la metronidazol, cel mai frecvent utilizat tratament pentru infecțiile cu trichomonas, sunt descrise în literatura de specialitate, dar adevărata amploare a acestei probleme este necunoscută și testarea susceptibilității nu este efectuată în mod obișnuit (5).testele Non-culturi oferă adesea o creștere a capacității de detectare a infecțiilor, deoarece organismele viabile nu mai sunt necesare. Primul test non-cultură disponibil comercial pentru T. vaginalis a fost Affirm VPIII (BD, Sparks, MD). Acest test utilizează tehnologia sondei ADN pentru a detecta Candida albicans, Gardnerella vaginalis și T., ADN vaginalis într-un singur tampon vaginal. Testul este destinat utilizării numai cu probe de la femei cu descărcare vaginală. Testul este rapid (rezultatele sunt disponibile în <1 h) și este rulat pe un instrument mic, specific testului. Testul poate fi efectuat în laboratoare clinice sau de teren acreditate pentru a efectua teste CLIA de complexitate moderată. Performanța testului pentru detectarea T. vaginalis la femeile cu vaginită este mai bună decât cea a microscopiei (28), dar semnificativ mai slabă decât cea a NAATs., Nișa reală pentru această analiză este separarea agenților cauzali ai secreției vaginale în populațiile în care Its (de exemplu, chlamydia sau gonoreea) nu sunt predominante. Incapacitatea de a utiliza acest test pentru screening în rândul femeilor cu risc ridicat, asimptomatice și lipsa testelor de chlamydia/gonoree însoțitoare pe aceeași platformă limitează aplicabilitatea acestui test în multe setări.NAATs au devenit standardul de aur recunoscut pentru screeningul și diagnosticul C. trachomatis și N. gonorrhoeae (29)., Screeningul anual pentru chlamydia este recomandat tuturor femeilor < 25 de ani, indiferent de factorii de risc comportamentali sau de simptome, în Statele Unite și în multe țări europene. Recomandările pentru screeningul infecțiilor gonococice sunt legate de factori de risc comportamentali specifici, mai degrabă decât de screeningul generalizat, din cauza ratelor de prevalență mult mai mici ale acestui agent patogen. După cum sa menționat mai sus, se recomandă screeningul vizat al femeilor din populațiile cu risc ridicat pentru infecția cu trichomonas (7)., În ciuda acestor diferențe în recomandări, în special în Statele Unite, o practică comună este de a grupa chlamydia și gonoreea testare pentru femeile care sunt eligibile pentru chlamydia screening. În ultimii 5 ani, mai mulți producători de chlamydia/gonoreea NAATs au produs trichomonas NAATs care pot fi efectuate cu aceeași probă (un tampon vaginal este proba de alegere, dar probele endocervicale și urina Feminină sunt tipuri de probe eliminate pentru unele teste)., Drept urmare, programele de control al ITS au acum posibilitatea de a furniza servicii de screening și diagnostic și de a genera simultan date epidemiologice îmbunătățite privind infecția cu T. vaginalis la diferite populații. Mai jos sunt descrieri ale mai multor Naat-uri disponibile în prezent, care utilizează diferite tehnologii de amplificare. Din cauza peisajului în schimbare rapidă a diagnosticării bolilor infecțioase, această listă nu este exhaustivă, ci se concentrează pe testele pentru care sunt disponibile date în acest moment. În plus, caracteristicile specifice de performanță nu sunt furnizate aici., Motivul pentru aceasta este că estimările de sensibilitate și specificitate sunt la fel de bune ca testele la care este comparat un nou test. Astfel, microscopia poate părea a fi extrem de sensibilă în comparație cu nimic altceva decât observația clinică. Cu toate acestea, acum știm că microscopia are performanțe slabe în comparație cu testele mai noi. Prejudecățile inerente în evaluarea testului sunt numeroase și fac comparațiile între studii dificile până la punctul în care sunt aproape neinterpretabile. În timp ce estimările punctuale exacte au puțină semnificație, este clar că NAATs depășește toate celelalte clase de teste pentru T. vaginalis.,primul NAAT pentru detectarea T. vaginalis care urmează să fie aprobat de Food and Drug Administration (FDA) în Statele Unite este testul Aptima TV (Hologic, San Diego, CA). Testul este o adaptare a testului Aptima Combo 2 pentru Chlamydia / gonoreea, permițând astfel utilizarea probelor colectate pentru screeningul pentru chlamydia/gonoreea (30). Tampoanele vaginale colectate de Clinician, tampoanele endocervicale și specimenele endocervicale în PreservCyt (Hologic, San Diego, CA), un mediu citologic pe bază de lichid, sunt tipuri de probe aprobate pentru test., Tehnologia se bazează pe extracția ARNr din specimene, urmată de amplificarea mediată de transcripție a ARNr capturat. Utilizarea acestui obiectiv oferă un impuls natural pentru limita de detectare, deoarece există 102 până la 103 exemplare în fiecare organism. Produsele amplificate rezultate din amplificarea izotermică sunt detectate printr-o reacție chemiluminescentă măsurată cu un luminometru. Testul poate fi efectuat fie cu sistemul Tigris DTS, fie cu sistemul Panther, ambele fiind complet automatizate și pot produce între 275 și 400 de rezultate într-o tură de lucru de 8 ore., Testarea este separată de testarea chlamidiei/gonoreei, astfel încât specimenul original trebuie să fie prelevat de două ori pentru a obține rezultate pentru toate cele trei organisme, dar testarea se poate face simultan pe sistemul Panther, astfel încât toate rezultatele să fie disponibile în același timp. Performanțele acestui test este excelent, cu sensibilitate și specificitate estimări ale >90% și >95%, respectiv (30).

Un alt sistem cu debit mare, complet automatizat, cu un test aprobat pentru T., vaginalis este sistemul Viper XTR, care efectuează testul BD ProbeTec Trichomonas vaginalis Qx (TVQ) (BD, Sparks, MD). Acest test se bazează pe amplificarea deplasării firelor (SDA) a ADN-ului extras din probele pacientului cu oxid feric (31). SDA este un proces izoterm de timp real de amplificare și detecție de emisie de lumină cu o excelentă sensibilitate și specificitate (>95% si >99%, respectiv) (31)., Viper platforma poate genera >700 rezultatele într-un singur schimb de lucru și teste pentru chlamydia/gonoree și infecții cu trichomonas într-o singură remiză de la pacient container de proba (de exemplu, un singur ADN eluție pas poate oferi toate cele trei rezultate). În plus față de tampoanele vaginale obținute de pacient și probele endocervicale, acest test are o cerere FDA pentru urina Feminină. În timp ce urina feminină nu este tipul ideal de probă pentru testarea infecției cu trichomonas (sau chlamydia/gonoreea) (29), este un tip de probă obținut în mod obișnuit, ceea ce face ca acesta să fie un avantaj util.,în timp ce platformele cu randament ridicat din laboratoarele de referință pot ajuta la realizarea economiilor de costuri, pot exista costuri de transport și timp asociate care ar face testarea în laboratoare locale mai mici o opțiune atractivă. Testul Affirm menționat mai sus este un exemplu de test (CLIA moderat) care ar putea fi utilizat într-un laborator la fața locului. Cu toate acestea, după cum sa menționat, acest test este destinat utilizării numai cu probe de la femei cu vaginită. NAATs devin rapid disponibile, care sunt destinate să umple această nișă de testare și să ofere sensibilitatea sporită asociată cu NAATs., Aceste teste sunt importante pentru eforturile de control al STI și vor schimba paradigma actuală a cine este testat și în ce setări. Pentru femeile cu semne sau simptome de infecție, aceste teste pot fi utile datorită sensibilității lor ridicate și timpului relativ rapid pentru rezultate. De exemplu, o femeie cu dureri pelvine dar nu de descărcare de gestiune vaginale nu ar fi eligibile pentru testarea cu Afirma test, dar ar putea beneficia de NAAT folosi într-un departament de urgență (ED) sau închisoarea de setare, în cazul în care un 60 – 90 min așteptați pentru rezultate nu ar fi nerezonabil.,un astfel de test care a primit aprobarea FDA în 2015 este testul AmpliVue Trichomonas (Quidel, San Diego, CA). Acest test utilizează amplificarea Izotermă dependentă de helicază (32) pentru a detecta ADN-ul trichomonas cu o citire a fluxului lateral. Este necesar un analizor mic, specific testului, iar acest test este desemnat un test de nivel moderat CLIA. Rezultatele sunt disponibile în decurs de 1 oră, iar sensibilitatea și specificitatea par a fi similare cu cele ale culturii., Trebuie remarcat faptul că nu sunt disponibile publicații cu privire la comparațiile dintre acest test și alte Naat-uri, astfel încât datele de sensibilitate din prospect, care au fost obținute în comparație cu cele ale metodelor de microscopie și cultură mai puțin sensibile, ar trebui considerate ca o potențială supraestimare. Din păcate, acest test nu poate fi rulat împreună cu testarea chlamidiei/gonoreei pe aceeași platformă, ceea ce limitează oarecum aplicabilitatea acesteia în multe setări.,în acest moment, testul Xpert TV (Cepheid, Sunnyvale, CA) nu a fost încă aprobat de FDA, dar este disponibil cu o marcă CE în Europa și este de așteptat să fie disponibil în Statele Unite în viitorul apropiat. Acest test utilizează un sistem PCR în timp real într-un cartuș de unică folosință. Instrumentele variază de la un modul cu un singur cartuș la instrumente cu 80 de cartușe. Debitul variază în funcție de dimensiunea instrumentației, fiecare cartuș necesitând aproximativ 60 de minute pentru a genera rezultate trichomonas., Sistemul Xpert are un avantaj prin faptul că meniul pentru această platformă este larg și flexibil, deoarece toate testele sunt efectuate în cartușe. Astfel, un cartuș de trichomonas poate fi rulat în timp ce un cartuș de chlamydia/gonoree rulează în modulul următor. Meniul se extinde dincolo de its la o gamă largă de agenți patogeni, ceea ce face acest instrument ideal pentru setările cu debit redus care aleg să consolideze un număr mare de teste pe o singură platformă., De exemplu, un ED poate utiliza acest sistem pentru a genera rezultate its pentru un pacient care prezintă plângeri legate de sănătatea sexuală, în timp ce efectuează simultan testarea Staphylococcus aureus rezistent la meticilină și Clostridium difficile pentru alți pacienți. Mai mult, acest test are o pretenție în Europa și, se speră, va avea unul în Statele Unite pentru urina masculină, ceea ce face ca aceasta să fie singura platformă pe care pot fi furnizate teste pentru bărbați. Acest lucru este relevant, deoarece rata de infecție în rândul bărbaților care sunt contacte sexuale ale femeilor cu infecții cu trichomonas a fost raportată a fi la fel de mare ca 70% (16).,infecția cu T. vaginalis a fost o its ignorată în mare parte de mulți ani. Cu toate acestea, în ultimul deceniu, cercetarea epidemiologică a demonstrat în mod constant asociații cu rezultate negative de sănătate evitabile. În timp ce rațiunea de a nu adăuga T. vaginalis la lista bolilor care pot fi notificate în Statele Unite este solidă (9), rămâne nevoie de oportunități îmbunătățite de testare, în special pentru femei., În multe situații, deși nu există nicio recomandare din partea CDC, atunci când se efectuează screening-ul pentru chlamydia/gonoreea în timpul primului trimestru de îngrijire prenatală a sănătății, se adaugă acum screeningul infecției cu trichomonas. Acest screening a fost adăugat în mare parte ca urmare a comodității de a putea comanda mai multe teste ale unui singur eșantion de pacient. Datele care sprijină această examinare devin din ce în ce mai puternice pe măsură ce se utilizează mai multe teste de înaltă calitate și se generează date mai precise (20)., Mai mult, în cele mai multe obstetrică și ginecologie și planificare familială setări în Statele Unite, rata de infecție trichomonas este substanțial mai mare decât cea de gonoree și odată ce furnizorii au acces la datele lor specifice de pacienți, ele sunt foarte interesați în a avea acces la această testare.multe opțiuni POC și low-throughout care permit testarea locală sunt în curs de dezvoltare. Cele care vor avea cel mai mare impact sunt testele care au opțiunea de a fi rulate cu testarea chlamidiei/gonoreei, au o sensibilitate ridicată și produc rezultate rapid., Ca și în cazul tuturor testelor medicale, costul va juca un rol-cheie în adoptarea, dar extinderea concurenței pe piață va contribui la menținerea costurilor rezonabile. Proiectele de flux Clinic care pot valorifica probele obținute de pacient și ordonarea testelor de rutină pot fi capabile să profite de o paradigmă de testare și tratare în cadrul unei îngrijiri de sănătate sexuală de rutină sau al unei vizite de urgență., Disponibilitatea testării pentru bărbații care sunt parteneri sexuali ai femeilor cu infecții cu trichomonas, ceea ce este important având în vedere rata ridicată de concurență a infecției în cadrul parteneriatelor sexuale (16) sau bărbații care au uretrită vor crește probabil cererea dacă testarea poate fi furnizată ca un test rapid aproape de pacient. Screeningul în regiuni precum sud-estul Statelor Unite, unde atât prevalența trichomonas, cât și ratele de incidență HIV în rândul femeilor de culoare sunt cele mai ridicate din țară, poate oferi un instrument suplimentar în setul nostru de instrumente pentru prevenirea HIV (23)., Astfel, testarea trichomonas este aici pentru a rămâne și va deveni mai frecvent utilizată în viitor, deoarece testele disponibile pentru testarea continuă să îmbunătățească precizia și confortul atât pentru pacienți, cât și pentru furnizori.