ORIGINALE de CERCETARE
Ser b2-microglobulina valori printre sănătos Brazilienii folosind un DPC IMMULITE® test
Valorile b2-microglobulina le brasileiros saudáveis utilizarea sau sistem automatizat DPC IMMULITE®
Fabíola Branco Filippin; Liliete Bastoane Souza
Departamentul de Analize Clinice, Știință și Centru de Sănătate, Universitatea Federală din Santa Catarina – Florianópolis/SC, Brazilia. E-mail: [email protected].,scopul: studiul de față a fost conceput pentru a determina intervalul normal al nivelurilor serice de beta 2-microglobulină (Sb2M) în rândul voluntarilor sănătoși din Brazilia. Nivelurile de Sb2M sunt crescute la pacienții infectați cu virusul imunodeficienței umane (HIV) și s-au dovedit a fi cel mai bun predictor al statusului infecției cu HIV și al unor afecțiuni maligne, în special mielomul multiplu., Pentru a obține utilizarea optimă în diagnosticul clinic Brazilian, a fost efectuat un studiu adecvat al intervalului de referință pentru testul Sb2M IMMULITE®, bazat pe faptul că limitele intervalului de referință au fost evaluate în rândul populațiilor Europene.
metode: au fost evaluați nouăzeci și șase de donatori sănătoși de sânge, iar nivelurile Sb2M au fost măsurate prin imunotest enzimatic chemiluminescent folosind analizorul automat IMMULITE®.
rezultate: un interval normal de valori Sb2M, stabilit printr-o metodă statistică neparametrică, a fost de 1,05 până la 3,9 mg/mL, limita superioară fiind mai mare decât cea raportată în altă parte.,
CONCLUZII: Acest studiu a prezentat noile date indică faptul că există o diferență semnificativă între actualele limite de referință pentru Sb2M IMMULITE® test și cele găsite în Brazilia, oferind dovezi că există diferențe semnificative în intervalul de valori normale poate apărea între diferite populații, și că aceste valori ar trebui să fie luate în considerare pentru Brazilian persoane fizice.
cuvinte cheie: B2-microglobulină. Interval de referință. Testul imunologic Chemiluminescent. Voluntari sănătoși. Valoarea prognostică.,obiectiv: obiectivul acestui studiu a fost de a determina valorile inițiale ale microglobulinei B2 serice (Sb2M) la voluntari sănătoși. Se știe că acest parametru este ridicat la pacienții infectați cu virusul imunodeficienței umane (HIV) și s-a dovedit a fi un marker mai bun al infecției cu HIV și al afecțiunilor maligne, în special al mielomului multiplu., Pentru a obține cel mai bun diagnostic clinic, a fost determinat un interval de referință adecvat de Sb2M pentru populația braziliană folosind testul IMMULITE®; deoarece acesta are ca parametru un interval de referință determinat de populațiile Europene.
metode: nouăzeci și șase donatori sănătoși, au fost evaluate și Sb2M valorile au fost măsurate de chimioluminiscență metoda imunoenzimatică folosind IMMULITE®analizor automat.
rezultate: valorile Sb2M, stabilite prin metoda statistică neparametrică, au fost cuprinse între 1,05 și 3.,9 mg / ml, iar limita superioară obținută a fost mai mare decât cea raportată în alte studii.
concluzie: acest studiu a prezentat noile valori, indicând faptul că există o diferență semnificativă între limitele de referință de Sb2M disponibile pentru IMMULITE® și cele găsite în studiul de față, care atestă apariția unor variații importante între diferite populații și că noi valori ar trebui să fie luate în considerare pentru Brazilieni.
Uniterms: B2-microglobulină. Interval de referință. Testul imunologic Chemiluminescent. Voluntari sănătoși. Valoarea prognostică.,Beta 2-microglobulină (b2M) o proteină găsită în toate celulele nucleate, este asociată cu antigene de clasă de histocompatibilitate 1 pe membranele suprafeței celulare (în special abundente pe limfocite și monocite).1 a fost descoperit pentru prima dată în urina pacienților cu insuficiență renală.2 datorită greutății sale moleculare mici (11800 daltoni), 95% din totalul B2M liber din plasmă este eliminat prin filtrare glomerulară, iar 99,9% din acesta este preluat de celulele tubulare proximale. În prezența unei rate normale de filtrare renală, nivelurile crescute de B2M seric (Sb2M) indică o producție sau o eliberare ridicată de b2m3., La activarea sistemului imunitar, atât limfocitele B cât și T eliberează activ B2M în circulație, de unde este ulterior eliminat prin filtrare glomerulară și reabsorbție tubulară.4 a Crescut Sb2M concentrații au fost găsite la pacienții cu celulele sanguine discrazii, inclusiv mielom multiplu,5,6 maligne limfoproliferative,7 tulburări mieloproliferative,8 anumite infecții virale, cum ar fi HIV infection9, citomegalovirus, non-a și non-B, hepatita, și mononucleoza infecțioasă.,10 Nivelul Sb2M este,de asemenea, utilizat ca factor de prognostic important la pacienții cu mielom multiplu5, 6 și infecții cu HIV.9
intervalul normal de referință pentru Sb2M la indivizii sănătoși găsit în literatura de specialitate a fost determinat utilizând populațiile din America de Nord și Europa (DPC Immulite® assay). În încercarea de a determina intervalul normal al nivelurilor Sb2M în rândul persoanelor africane seronegative asimptomatice, Piwowar și colab. (1995) 10 a constatat că 50% dintre acești subiecți au avut valori anormale (valori medii 2,35 mg/mL). Într-un alt studiu, valoarea medie a Sb2M la voluntarii sănătoși a fost de 1, 36 mg/mL.,11 În acest raport, vom descrie Sb2M valori sănătoase Brazilian subiecții dintr-un grup de donatori de sânge la Hematologie și Hemotherapy Centrul de Santa Catarina (HEMOSC).în studiu au fost incluși donatori de sânge, bărbați și femei fără sarcină cu vârste cuprinse între 25 și 50 de ani. Toate persoanele au fost supuse unei evaluări clinice evaluate de HEMOSC, inclusiv chestionare și teste de laborator de screening în conformitate cu criteriile legale braziliene. Toți voluntarii care îndeplineau aceste criterii și-au dat acordul verbal și scris pentru a li se extrage încă 5 mL de sânge în scopul studiului., Protocolul experimental a fost aprobat de Comitetul de etică al Spitalului Universitar din Florianópolis, Universitatea Federală din Santa Catarina.sângele integral a fost colectat cu un sistem Vacutainer în tuburi uscate de 10 mL, iar serul a fost separat prin centrifugare. Pentru a elimina componentele lipidice, probele de ser au fost ultracentrificate la 18000 g timp de 20 min. Toate probele de sânge au fost obținute între orele 2:00 și 6:00 și au fost prelucrate în termen de 5 ore de la venipunctură., Probele au fost prediluate 1-în41 în diluantul de probă b2M (IMMULITE® Beta-2 Microglobulin kit, DPC, SUA) conform instrucțiunilor producătorului și au fost necesare 5 mL pentru procedura de testare. Sb2M a fost măsurat printr-un test imunologic enzimatic chemiluminescent în fază solidă cu 2 situsuri, utilizând analizorul automat IMMULITE® (DPC, Los Angeles, SUA).în studiul de referință pentru testul DPC IMMULITE®, valoarea medie a fost de 1,26 mg/mL., Comitetul Național pentru standarde clinice de laborator (NCCLS) abordează utilizarea criteriilor de excludere a priori și a posteriori pentru a obține probe sănătoase.12 Prin urmare, toți subiecții cu valori ale Sb2M mai mari de 2, 0 mg/mL au fost reevaluați clinic pentru acceptarea valorii pentru a se asigura că fiecare individ este „sănătos”. Datele au fost introduse și analizate cu software-ul Microsoft Excel. Au fost calculate valorile medii și deviația standard. Intervalele de referință 95th-percentile au fost determinate utilizând percentilele 2.5 și 97.5., Conform procedurii recomandate de NCCLS, observațiile au fost clasificate în funcție de mărime, iar percentilele 2.5 și 97.5 au fost obținute ca observații ordonate 0.025 (n + 1) și respectiv 0.975 (n + 1) (n= dimensiunea eșantionului). Dacă valorile de rang estimate nu erau întregi, s-a efectuat interpolarea liniară.96 de donatori de sânge Brazilieni, 60 de bărbați și 36 de femei, cu vârsta medie (an) de 33 de ani, au fost incluși în studiu. Valorile Sb2M au variat între 1,05 și 3,9 mg/mL, așa cum se arată în Figura 1, iar media a fost de 2,46 mg/mL (deviația standard = 0,73)., Prin urmare,utilizând percentila 97, 5 Conform unei metode nonparametrice de rutină, 12 3, 9 mg/mL a fost considerată limita normală superioară. Intervalul stabilit a fost de 1,3-3,9 mg/mL.cercetătorii din întreaga lume au raportat utilitatea Sb2M ca un producător de încredere în evaluarea progresiei infecției cu HIV și a mielomului multiplu.5-8,10,13 infectați cu HIV subiecte, Sb2M pare a fi un predictor mai bun al infecției cu HIV statut decât numărul de CD4 și, de asemenea, un predictor mai bun de supraviețuire, cu creșterea Sb2M niveluri fiind asociat cu progresia bolii.,10
creșterea producției și eliberarea consecutivă de Sb2M în fluidele corporale au fost raportate la pacienții cu mielom multiplu. Importanța acestor date pentru clinicieni se bazează pe faptul că mielom celule plasmatice produce Sb2M. Prin urmare, se presupune că Sb2M valori ar putea indica nu numai dimensiunea, dar, de asemenea, activitatea proliferativă de mielom cells13 și ar putea fi acceptată ca un nespecifice producatorul de mase tumorale.5,6,13,14 În plus, rolul prognostic al Sb2M în alte proliferativă tulburări a fost confirmat de mai mulți autori,7,14,15, facilitând evaluarea clinică.,15 Pe de altă parte, s-a raportat că la pacienții cu rată scăzută de filtrare glomerulară, nivelurile Sb2M au fost crescute, iar rezultatele de laborator trebuie interpretate cu prudență.6,7,13
intervale de referință sunt utilizate clinic, împreună cu informații suplimentare, ca orientări privind starea pacientului. Intervalului de referință studiu pentru IMMULITE® Sb2M (1.01.7 mg/mL, adică de 1,26 mg/mL) este definit de către producător a fost determinat prin probe de ser de la aproape 800 de voluntari adulți, inclusiv atât bărbații, cât și femeile neinsarcinate, variind de la 20 la 70 de ani., Subiecții au fost selectați pe baza chestionarelor. Probele au fost colectate în Franța, Germania, Olanda și Portugalia, iar valorile obținute au fost analizate neparametric. Limita superioară sugerată a fost de 1, 7 mg/mL. Este posibil ca aceste valori să nu fie reprezentative pentru persoanele braziliene. În absența unor limite de referință adecvate pentru Sb2M derivate din orice populație Braziliană, mulți investigatori au folosit date obținute de la subiecți din America de Nord și Europa care au prezentat limite superioare de 2,3 ori mai mici decât cele obținute în studiul de față.,
NCCLS recomandă utilizarea intervalelor de referință neparametrice și ca dimensiunea eșantionului, n, să fie formată din cel puțin 120 de valori pentru a calcula un interval de referință de 95%, 2,5% și 97,5% puncte de distribuție12. Acest număr este numărul minim de valori necesare pentru construirea intervalelor de încredere care oferă informații despre exactitatea limitelor de referință calculate.
în acest studiu, au fost evaluate 96 de probe., Scopul nostru nu a fost acela de a produce noi intervale de referință, ci de a pune mai mult accent pe necesitatea ca fiecare laborator să producă propriile intervale de referință pentru toți parametrii, în ciuda multor dificultăți, inclusiv a celor practice și a cheltuielilor mari.studiul de față indică faptul că pot apărea intervale semnificativ diferite de valori Sb2M între diferite populații, sugerând că fiecare laborator Brazilian ar trebui să-și stabilească propriile limite de referință.,mulțumim Centrului de Hematologie și Hemoterapie din Santa Catarina și Laboratorului de analize clinice, Spitalului Universitar din Florianópolis pentru probe și asistență tehnică. Suntem recunoscători DPC IMMULITE® pentru furnizarea de reactiv stabilit gratuit pentru acest studiu și Dr. Joanita Del Moral de la Divizia de Hematologie, Spitalul Universitar din Florianópolis.
2. Berggard I & Bearn AG. Izolarea și proprietățile unei beta-2-globulină cu greutate moleculară mică care apare în fluidele biologice umane., J Biol Chem 1968; 243 (15): 4095-103.
6. Greipp PR, Katzman JA, O ‘ Fallon WM, Kyle RA. Valoarea indicilor beta 2microglobulinei și a indicilor de etichetare a celulelor plasmatice ca factori prognostici la pacienții cu mielom nou diagnosticat. Sânge 1988; 72 (1): 219-23.
7. Constantines IP, Pathouli C, Karvountzis G, Papadopoulos P, Varvoutsi-Constantinides M, Eliakis P, et al. Beta 2 microglobulină serică în afecțiuni limfoproliferative maligne. Rac 1985;15(10):2384-89.
8. Rodriguez J, Cortes J, Talpaz M, O ‘ Brien S, Smith TL, Rios MB, et al., Nivelurile serice de beta-2 microglobulină sunt un factor de prognostic semnificativ în leucemia mielogenă cronică Chomossome-pozitivă din Philadelphia. Res Cancer Clin 2000; 6: 147-52.
10. Cooper E, Forbes M & Hammbling M. Ser beta 2-microglobulinei și a proteinei C-reactive concentrații în infecții virale. J Clin Pathol 1985; 37: 1140-3.
11. Diamondstone LS, Tollerud DJ, Fuchs D, Wachter H, Maro LM, Maloney E, et al. Factorii care influențează nivelurile serice de neopterină și beta 2-microglobulină într-o populație sănătoasă diversă. J Clin Immunol 1994; 14 (6):368-74.
12., Comitetul Național pentru standarde clinice de laborator. Cum se definesc și se determină intervalele de referință în laboratorul clinic: ghid aprobat, documentul NCCLS C28-A și C28-A2, Villanova, PA, 1995, 2001, NCCLS.