Napadowe nocne Hemoglobinuria (PNH)

Tabela 1

tr

czy są jakieś czynniki, które mogą mieć wpływ na wyniki badań laboratoryjnych?, W szczególności, czy pacjent przyjmuje jakieś leki-leki OTC lub zioła-które mogą mieć wpływ na wyniki badań laboratoryjnych?

użycie niewłaściwej rurki do zbierania, na przykład EDTA, może zablokować aktywację dopełniacza i dać fałszywie ujemne wyniki w teście lizy sacharozy. Większość metod wykorzystuje obecnie buforowane roztwory sacharozy, ponieważ niebuforowane roztwory sacharozy mogą również dawać wyniki fałszywie ujemne. EDTA może również blokować aktywację dopełniacza w zakwaszonym teście surowicy, uzyskując wynik fałszywie ujemny. Dokładna regulacja pH jest wymagana do pH 6.78 +/- 0.1 dla wiarygodnych wyników., W przypadku braku rutynowych badań w Twojej placówce może być wymagane użycie laboratorium referencyjnego. Hemosyderyna w moczu nie musi być wewnątrzkomórkowa, aby była uważana za dodatnią, biorąc pod uwagę, że normalny mocz powinien być ujemny dla granulek hemosyderyny.

jakie wyniki badań są absolutnie potwierdzające?

ostateczna diagnoza PNH jest dostępna za pomocą cytometrii przepływowej. U pacjentów z PNH stwierdzono zmniejszoną ekspresję białka o nazwie glifosfatydyloinozytol (GPI) kotwiczącego białka w krwinkach czerwonych., W konsekwencji nastąpi zmniejszenie wiązania CD55 i CD59, które modulują aktywność dopełniacza i przede wszystkim wiążą się z powierzchnią komórki GPI. Zarówno CD55, jak i CD59 mogą być zmniejszone na powierzchni krwinek czerwonych; Jednakże, ponieważ CD55 wykazuje większą ekspresję niż CD59, jest bardziej prawdopodobne, że da ostateczny wynik.

cytometria przepływowa jest bardzo wrażliwa i może mierzyć małe populacje komórkowe lub klony dotknięte chorobą (do poziomu 1-5%). Może również wykryć pojawienie się tych klonów w niedokrwistości aplastycznej lub hipoplastycznej szpiku kostnego pacjentów., Podobnie jak w przypadku większości cytometrii przepływowej, krew powinna być pobierana w probówkach heparynizowanych i oceniana w ciągu 24 godzin od pobrania w celu uzyskania optymalnego badania.

jakie badania potwierdzające należy zlecić dla mojego klinicznego Dx? Ponadto, jakie badania kontrolne mogą być przydatne?

genem odpowiedzialnym za PNH jest gen fosfatydyloinozytolglikanu A (PIG-a). Występuje na chromosomie X. Mutacje somatyczne związane z PNH mogą być bardzo zmienne. Większość mutacji polega na małych delecjach lub wstawieniu pary zasad, ale mogą również wystąpić podstawienia., Mutacje zazwyczaj prowadzą do zmiany struktury DNA i w konsekwencji prowadzą do zmniejszenia transkrypcji i translacji produktu białkowego.

mutacje mogą również wystąpić w wielu miejscach w obrębie genu Świnia-A. Mutacje w PNH związane z niedokrwistością aplastyczną wydają się być większe i / lub częstsze w porównaniu do pacjentów z PNH tylko. Oprócz białek modulujących dopełniacz (CD55 i CD59), GPI wiąże wiele innych białek, które mogą różnie wpływać na stabilność błon i aktywację dopełniacza., Jednym z bardziej kłopotliwych problemów w identyfikacji PNH jest zmienność w ekspresji GPI, w wyniku czego pacjenci, które wahają się od łagodnego do ciężkiego tłumienia syntezy GPI. Zastosowanie cytometrii przepływowej do wykrywania zmniejszonego wiązania CD55 jest jednym ze sposobów uporządkowania tej mozaiki lub ekspresji. Ostatecznie, rutynowe genu i całego genomu sekwencjonowania może prowadzić do ważnych informacji dotyczących PNH i jego związku z niedokrwistością aplastyczną.

jakie czynniki, jeśli w ogóle, mogą mieć wpływ na wyniki badań laboratoryjnych?, W szczególności, czy pacjent przyjmuje jakieś leki-leki OTC lub zioła-które mogą mieć wpływ na wyniki badań laboratoryjnych?

ze względu na rzadkość PNH, wiele błędów jest związanych z testowaniem pacjentów na PNH, którzy nie zostali dokładnie zbadani pod kątem bardziej wspólnej etiologii ich prezentacji, czy to przewlekłej choroby hemolitycznej lub niedokrwistości z niedoboru żelaza. Większość błędów wynika z tej niekompletnej analizy klinicznej i występuje na wczesnych etapach przeglądu klinicznego., Wszyscy pacjenci z pojawieniem się niedokrwistości z niedoboru żelaza, na przykład, powinny być dokładnie sprawdzane pod kątem źródeł krwawienia i oceniane przy użyciu standardowych CBC, różnicowe, i badania przesiewowe na niedokrwistość z niedoboru żelaza przed kontynuowaniem badania PNH., Podobnie, pacjent z przewlekłą chorobą hemolityczną powinien być dokładnie sprawdzony pod kątem poprzednich transfuzji, hemolizy wywołanej lekami i innych przewlekłych przyczyn hemolizy przed realizacją bardziej szczegółowych badań PNH

ponieważ badania przesiewowe dla PNH (test lizy sacharozy, test Ham) opierają się na materiałach biologicznych od pacjenta, w porównaniu do normalnych krwinek czerwonych, testy z konieczności są mniej precyzyjne i są potencjalnie mniej wrażliwe, gdy niewłaściwie wykonywane. Te wyniki badań są jakościowe i oparte na oględzinach., Ważne jest, aby odpowiednio ocenić probówki kontrolne pod kątem braku hemolizy zarówno w teście lizy sacharozy, jak i w teście szynki. Dlatego warto zlecić takie badania w laboratorium referencyjnym z doświadczeniem w standaryzacji tych badań.

cytometria przepływowa jest prawdopodobnie najbardziej precyzyjnym z testów dostępnych dla PNH; jednak nawet cytometria przepływowa ma kilka problemów. Jedną z kwestii jest pomiar „braku” markera CD55. Udowodnienie negatywnych wyników jest zawsze trudniejszą interpretacją dla patologa cytometrii przepływowej., Ponadto fakt, że CD59 jest wyrażany na poziomie ośmiokrotnie mniejszym niż CD55 sprawia, że CD59 jest niewystarczającym markerem „zapasowym” dla PNH.