Paroxysmale nächtliche Hämoglobinurie (PNH)

Tabelle 1

Gibt es Faktoren, die die Laborergebnisse beeinflussen könnten?, Nimmt Ihr Patient insbesondere Medikamente – OTC – Medikamente oder Kräuter-ein, die sich auf die Laborergebnisse auswirken könnten?

Die Verwendung des falschen Sammelrohrs, z. B. EDTA, kann die Komplementaktivierung blockieren und im Saccharose-Lysetest falsch negative Ergebnisse liefern. Die meisten Methoden verwenden jetzt gepufferte Saccharoselösungen, da ungepufferte Saccharoselösungen auch falsch negative Ergebnisse liefern können. EDTA kann auch die Komplementaktivierung im angesäuerten Serumtest blockieren, was zu einem falsch negativen Ergebnis führt. Genaue pH-Einstellung ist erforderlich, um pH 6.78 +/- 0.1 für zuverlässige Ergebnisse., Die Verwendung eines Referenzlabors kann erforderlich sein, wenn Saccharoselyse und angesäuerte Serumtests in Ihrer Einrichtung nicht routinemäßig durchgeführt werden. Urin Hämosiderin muss nicht intrazellulär sein, um als positiv zu gelten, da normaler Urin für Hämosideringranulate negativ sein sollte.

Welche Laborergebnisse sind absolut bestätigend?

Eine definitive Diagnose von PNH ist durch Durchflusszytometrie möglich. PNH-Patienten haben eine verminderte Expression eines Proteins namens Glycophosphatidylinositol (GPI) – Ankerproteine auf roten Blutkörperchen., Folglich wird es eine verminderte Bindung von CD55 und CD59 geben, die die Komplementaktivität modulieren und hauptsächlich an die Zelloberfläche GPI binden. Sowohl CD55 als auch CD59 können auf Oberflächen roter Blutkörperchen verringert werden; Da CD55 jedoch stärker exprimiert wird als CD59, ist es wahrscheinlicher, dass es das endgültige Ergebnis liefert.

Die Durchflusszytometrie ist sehr empfindlich und kann kleine Zellpopulationen oder Klone messen, die von der Krankheit betroffen sind (bis zu 1-5%). Es kann auch das Auftreten dieser Klone bei aplastischen Anämie-oder hypoplastischen Knochenmarkspatienten nachweisen., Wie bei den meisten Durchflusszytometrien sollte Blut in heparinisierten Röhrchen gesammelt und innerhalb von 24 Stunden nach der Entnahme für optimale Tests beurteilt werden.

Was Bestätigungstests Sollte ich Antrag für Meine Klinische Dx? Welche Follow-up-Tests könnten außerdem nützlich sein?

Das für PNH verantwortliche Gen ist das Phosphatidylinositolglycan A (PIG-A) – Gen. Es ist auf dem X-Chromosom gefunden. Die mit PNH assoziierten somatischen Mutationen können sehr variabel sein. Die meisten Mutationen bestehen aus kleinen Basenpaarlöschungen oder-einfügungen, aber es können auch Basenersetzungen auftreten., Die Mutationen führen typischerweise zu einem DNA-Frameshift und führen folglich zu einer reduzierten Transkription und Translation des Proteinprodukts.

Die Mutationen können auch an mehreren Stellen innerhalb des PIG-A-Gens auftreten. Mutationen bei aplastisch-Anämie assoziierten PNH sind tendenziell größer und / oder häufiger als bei Patienten mit nur PNH. Neben komplementmodulierenden Proteinen (CD55 und CD59) bindet GPI viele andere Proteine, die die Membranstabilität und Komplementaktivierung variabel beeinflussen können., Eines der verwirrendsten Probleme bei der Identifizierung von PNH ist die Variabilität der GPI-Expression, was zu Patienten führt, die von leichter bis schwerer Unterdrückung der GPI-Synthese reichen. Die Verwendung der Durchflusszytometrie zum Nachweis einer reduzierten CD55-Bindung ist eine Möglichkeit, diesen Mosaizismus oder diese Expression zu klären. Letztendlich kann die routinemäßige Gen-und Gesamtgenomsequenzierung zu wichtigen Informationen über PNH und seine Assoziation mit aplastischer Anämie führen.

Welche Faktoren, wenn überhaupt, könnten die Laborergebnisse beeinflussen?, Nimmt Ihr Patient insbesondere Medikamente – OTC – Medikamente oder Kräuter-ein, die sich auf die Laborergebnisse auswirken könnten?

Aufgrund der Seltenheit von PNH hängen viele Fehler mit dem Testen von Patienten auf PNH zusammen, die nicht gründlich auf die häufigeren Ätiologien ihrer Präsentation untersucht wurden, sei es chronische hämolytische Erkrankung oder Eisenmangelanämie. Die meisten Fehler resultieren aus dieser unvollständigen klinischen Analyse und treten in den frühen Stadien der klinischen Überprüfung auf., Alle Patienten mit dem Auftreten einer Eisenmangelanämie sollten beispielsweise gründlich auf Blutungsquellen untersucht und mit Standard-CBC -, Differential-und Screening-Tests auf Eisenmangelanämie bewertet werden, bevor PNH-Tests durchgeführt werden., Ebenso sollte ein Patient mit chronischer hämolytischer Erkrankung gründlich auf frühere Transfusionen, medikamenteninduzierte Hämolyse und andere chronische Ursachen der Hämolyse untersucht werden, bevor spezifischere PNH-Tests durchgeführt werden

Da die Screening-Tests für PNH (Saccharose-Lyse-Test, Ham-Test) auf biologisches Material des Patienten beruhen, sind die erforderlichen Tests im Vergleich zu normalen roten Blutkörperchen weniger präzise und möglicherweise weniger empfindlich, wenn sie nicht ordnungsgemäß durchgeführt werden. Diese Testergebnisse sind qualitativ und basieren auf Sichtprüfung., Es ist wichtig, Kontrollröhrchen sowohl im Saccharose-Lyse-Test als auch im Ham-Test auf mangelnde Hämolyse hinreichend zu bewerten. Daher lohnt es sich, solche Tests in einem Referenzlabor mit Erfahrung in der Standardisierung dieser Tests durchführen zu lassen.

Die Durchflusszytometrie ist wahrscheinlich der genaueste der für PNH verfügbaren Tests; Selbst die Durchflusszytometrie weist jedoch mehrere Probleme auf. Ein Problem ist die Messung für das „Fehlen“ des CD55 Markers. Der Nachweis negativer Ergebnisse ist für den Durchflusszytometriepathologen immer schwieriger., Auch die Tatsache, dass CD59 auf Ebenen achtfach weniger als CD55 ausgedrückt wird, macht CD59 zu einem unzureichenden „Back-up“ – Marker für PNH.