연구 과목
여성들이 모집 공장에서 도시의 지역 사회의 쿠에르나바카,89km 떨어진 멕시코의 도시입니다., 헤모글로빈 농도에서 모든 여성이 공장에서 결정되었에서 손가락을 찌 혈액 샘플에 의해 다음,정맥 혈액 샘플을 결정하는 혈청 ferritin 사이에서 비 빈혈이 여자입니다. 총 20 개의 비 빈혈을 가진 여성이 낮은 철은 매장들을 모집에 따라 헤모글로빈 농도⩾125g/l 및 혈청 ferritin 농도<25µg/l. 제외 기준에 포함되어 있는 임신 및 수유,위장관 또는 신진대사 장애(선동적인 장 질환,만성,설사,낭포성 섬유증),기타 만성 질환과 복용하는 사람들이 철 보충입니다., 에서 20 분명히 건강한 유아(세 6-24months)and20 분명히 건강한 아이들(2-5 세)은 모집에 어머니와 함께 적절한 헤모글로빈 레벨. 피험자와 아동의 부모는 연구 목적과 절차에 대해 완전히 통보 받았으며 서면 동의를 얻었습니다. Instituto Nacional de Salud Pública,Cuernavaca,Mexico 및 스위스 취리히(Zürich)스위스 연방 공과 대학(Swiss Federal Institute Of Technology)의 윤리위원회는 프로토콜을 검토하고 승인했습니다.,
샘플 크기
샘플 크기 계산반에서의 개인간 및 intraindividual 변 철분 흡수으로 관찰된 이전 연구에서 철의 생체 이용률에서 유아와 어린 아이들(Davidsson et al., 1994, 1997, 2000, 2004). 그것은 약 20 어린이 될 것이 최소 샘플 크기를 탐지하의 50%상당한 차이가 로그에 의 철분 흡수에서 산술 평균 기준 철분 흡수의 7%,90%힘,중요성의 수준 0.05(짝이 없는 t-테스트)및 종 오류율의 5%이다., 10%의 탈락률을 예상하면서,이 추정치는 각 그룹에서 적어도 20 명의 피험자가 연구를 완료하는 데 필요할 것이라고 지적했다.
디자인을 공부
여성,유아와 아이들이 무작위로 할당을 받는 테스트는 식사를 하나로 황산 철 또는 비철 푸마르산염에 연속적인 일입니다. 시험 식사는 밤새 빠른 후에 아침 식사로 투여되었다. 시험 식사의 수용 가능성은 연구에 등록하기 전에 각 유아 및 아동과 함께 확인되었다. 라벨이 붙은 식사를 완전히 섭취 한 후 3 시간 동안 음식이나 음료를 섭취 할 수 없었습니다., 유아와 어린이는 시험 식사 섭취 중 및 후에 면밀한 감독하에 남아있었습니다.
모두,5ml 의 정맥혈을 첫 번째 시험 식사 섭취 직전에 EDTA 처리 된 튜브로 그리고 14 일 후에 다시 채취 하였다. 혈액 샘플을 철 상태 지표(헤모글로빈 및 혈청 페리틴)및 철 동위 원소 조성에 대해 분석 하였다. 체중과 신장은 각 혈액 샘플링 지점에서 측정되었습니다.
시험 식사
시험 식사는 현지 멕시코 옥수수 가루 죽 음료’atole’을 기본으로 한 달게 한 옥수수 우유 음료였습니다. 그것은 degermed 옥수수 가루에서 만들어졌다(24.,7%),온-우유 분말(11.7%),’piloncillo'(고체의 형태로 거칠은 갈색 설탕;63.5%)및 순화한 물(200ml)없이 추가 철 또는 아스코르브산입니다. 표준화된 테스트는 식사들을 위해 특별히 준비 연구에서 로컬로 사용할 수 있는 식품을 대량 구입을 제외하고,degermed 옥수수가루 사용할 수 없는 멕시코에서 획득하였 Switzerland(스위스 선반,Zurich,Switzerland). Degermed 옥수수가루 사용되었을 최소화하는 피틴산의 콘텐츠 밀가루,그렇지 않으면을 줄일의 생체 이용률에서 철 시험 식사는(Hurrell et al., 2002)., 이 테스트는 식사를 요리했다 부엌에서 시설 및 운송에 뜨거운 먹이터 공장에서는 봉사의 220g 당한 여자와 60g 당하는 유아 및 아동 준비되었으로는 아침 식사와 다음의 섭취를 물. 모든 테스트는 식사들을 제외하고는 동일한 하나의 4mg Fe(여자)또는 2.5mg Fe(유아*어린이)중 하나로 비철 푸마르산염 또는철 황산염,는 추가 테스트는 식사를 즉시 전에 제공합니다. 철 푸마 레이트 분말을 시험 식사에 직접 첨가하고 황산 제 1 철을 용액으로 첨가 하였다.,
안정 동위 원소 라벨
동위 원소 표철 푸마르산염에 의해 제작되었 Dr 폴 Lohmann GmbH(Emmerthal,Germany)에서 풍부한 원소의 철을 사용하여는 축소된 절차의 동일한 상업 생산 공정을 확보할 수 있습니다. 동일한 절차가 이전 연구에 사용되었습니다(Davidsson et al.,2000,2001,2002;피들러 외.,2003;Sarker 외., 2004). 개인철 푸마르산 용량을 미리 무게로 폴리에틸렌 튜브,그것에 의하여 정확한 금액을 추가로 결정했으로 관 무게,그리고 다음 저장된다., -황산 제 1 철은 0.1mol H2SO4/l 에 용해되어 적절한 농도로 제조 된 isotopically enricated elemental iron(Chemgas,Boulogne,France)으로부터 제조되었다. 용액을 필요할 때까지 폴리에틸렌 병에 아르곤 분위기 하에서 보관하고 공급하기 전에 개별 용량으로 칭량 하였다.,
는 동위 원소 조성의 라벨에서 측정되었 세중에 의해 부정적인 열 이온화 질량 분석을 사용하여 자기 분야드 질량 분석계(MAT262;Finnigan 매트,Bremen,Germany)장착된 멀티 컬렉터 시스템의 패러데이 컵을 위한 이온을 감지합니다. 각 라벨의 철 농도는 역 동위 원소 희석 분석에 의해 삼중 항으로 측정되었다(Walczyk,1997). 철 푸마 레이트는 동위 원소 희석 전에 농축 질산에 용해되었다., 철 표준의 자연적인 동위 원소 구성비 gravimetrically 에서 동위 원소 참조 자료(IRMM-014;E.U. 연구소의 참고 자료와 측정,길,벨기에). 동위 원소 비율은 음의 열 이온화 질량 분석법(Walczyk,1997)에 의해 측정되었다.
동위 원소 조성의 혈액 샘플
풍부한 전체 혈액 샘플이에 의해 광물자 소화의 혼합물을 사용하여 집중 HNO3H2O2(30%)에 산화제., 철을 음이온 교환 크로마토 그래피에 의해 매트릭스로부터 분리하고 디 에틸 에테르로의 액체-액체 추출 단계(Walczyk et al., 1997). 화학 블랭크는 절차 전반에 걸쳐 처리되었습니다. 분리 된 철의 동위 원소 조성은 음의 열 이온화 질량 분석법에 의해 측정되었다.
철 status
갓 그린 전체 혈액 샘플이 aliquoted 측정하기 위한 헤모글로빈의 농도를 사용하여 휴대용 HemoCue 광도계(Hemocue Inc.,Angelholm,스웨덴)및 표준화 된 기술., 각 샘플링 일(Hemocue Inc.)의 시작 부분에 해당 품질 관리 자료를 분석했습니다.,Angelholm,스웨덴). 킵 전체 혈액의 분리에 대한 혈청 ferritin 측정하여 자동화된 면역 분석법(Immulite 한;DPC,로스앤젤레스,캘리포니아,미국)ETH Zurich,나머지 전체 혈액결되었고 나중에 분석의 동위 원소 구성입니다.,
산의 철분 흡수
의 양 57Fe 및 58Fe 동위 원소 라벨에서 혈액,14 일 투여 후,계산반에 변화의 Fe isotopic ratios 및 예상 금액 순환의 철습니다. 계산은 철 동위 원소 라벨이 단 동위 원소가 아니라는 것을 고려하여 동위 원소 희석의 원리에 기초했다. 순환 철분은 혈액량과 헤모글로빈 농도를 기준으로 계산되었습니다. 혈액량 계산은 Brown et al.에 따라 체중과 신장을 기준으로 하였다. (1962)여성과 Linderkamp 등의 경우., (1977)어린이를위한. 분수 철 흡수의 계산을 위해,흡수 된 철분을 적혈구에 80%혼입시키는 것이 여성에 대해 가정되었다(Hosein et al. 그 결과,아동의 연령에 따라 아동의 연령이 달라지는 것으로 나타났습니다. 철 푸마 레이트의 RBV 는 각 데이터 세트에 대해 계산되었습니다.
통계분석
분수 철분 흡수 값으로 제시된 기하학적 의미와 s.d. 모든 통계적 테스트 전원이 80%에서 수행하는 95%의 신뢰 구간에서는 변환된 데이터로,철분 흡수 값은 일반적으로 배포됩니다., 학생의 쌍 t-테스트는 각 연령 그룹 내의 데이터를 비교하는 데 사용되었습니다. 연령 집단 사이의 철 푸마 레이트의 RBV 는 학생의 짝이없는 t-테스트를 사용하여 비교되었다. 통계 전력 분석은 상용 소프트웨어(StatMate2;GraphPad Software Inc.)를 사용하여 수행되었습니다.,샌디에고,캘리포니아,미국). 선형 회귀었을 평가하는 데 사용되는 사이의 관계를 철분 흡수하고 철 저장(에 의해 표현된 혈청 ferritin)및 피어슨 상관관계가 사용되었 간의 관계를 조사하기 위해 혈청 ferritin 및 RBV.