発作性夜間ヘモグロビン尿症(PNH)

表1

検査結果に影響を与える可能性のある要因はありますか？, 特に、あなたの患者は、検査結果に影響を与える可能性のある薬（OTC薬または薬草）を服用していますか？

誤った収集チューブ、例えばEDTAの使用は、補体活性化をブロックし、ショ糖溶解試験において偽陰性の結果を生じる可能性がある。 バッファリングされていないスクロース溶液も偽陰性の結果を生成する可能性があるため、ほとんどの方法ではバッファリングされ EDTAはまた偽陰性の結果を作り出す酸性化された血清テストの補体の活発化を妨げることができます。 正確なpHの調節はpHに要求されます6.78 +/- 0.1 信頼できる結果のため。, ショ糖溶解および酸性化血清検査があなたの施設で日常的でない場合は、参照検査室の使用が必要になることがあります。 正常な尿がhemosiderinの微粒のために陰性べきであることを考えれば尿のhemosiderinは陽性と考慮されるために細胞内である必要がありません。

どのような検査結果が絶対に確認されていますか？

PNHの確定診断は、フローサイトメトリーによって利用可能である。 PNHの患者は赤血球のglycophosphatidylinositol(GPI)のアンカー蛋白質と呼出される蛋白質の表現を減らしました。, その結果、補体活性を調節し、主に細胞表面GPIに結合するCD55およびCD59の結合が減少するであろう。 赤血球表面ではCD55とCD59の両方が減少することがありますが、CD55はCD59よりも高度に発現しているため、決定的な結果をもたらす可能性が高いです。

フローサイトメトリーは非常に敏感であり、疾患の影響を受けた小さな細胞集団またはクローンを測定することができる（1-5％のレベルまで）。 それはまた再生不良性貧血またはhypoplastic骨髄の患者のこれらのクローンの出現を検出できます。, ほとんどのフローサイトメトリーと同様に、血液をヘパリンチューブに採取し、最適な検査のために採取から24時間以内に評価する必要があります。

臨床Dxのためにどのような確認テストを要求すべきですか？ また、そこでは、どのような追試験にも便利なのでしょう？

PNHを担う遺伝子は、ホスファチジルイノシトールグリカンA（PIG-A）遺伝子である。 それはX染色体上に見出される。 ＰＮＨに関連する体細胞突然変異は、非常に可変であり得る。 ほとんどの突然変異は、小さな塩基対の欠失または挿入からなるが、塩基置換もまた起こり得る。, 突然変異は、典型的にはDNAフレームシフトにつながり、その結果、タンパク質産物の転写および翻訳の減少をもたらす。

突然変異はまた、PIG-A遺伝子内の複数の場所でも起こり得る。 再生不良性貧血に関連するPNHの突然変異は、PNHのみを有する患者と比較して、より大きくおよび/またはより頻繁になる傾向がある。 GPIは、補体調節蛋白質（CD55およびCD59）に加えて、膜安定性および補体活性化に可変的に影響を及ぼす可能性のある他の多くの蛋白質に結合する。, ＰＮＨの同定におけるより当惑する問題の一つは、ＧＰＩ発現の変動であり、その結果、ＧＰＩ合成の軽度から重度の抑制の範囲の患者が生じる。 還元されたCD55結合の検出のためのフローサイトメトリーの使用は、このモザイクまたは発現を分類する一つの方法である。 最終的に、日常的な遺伝子および全ゲノム配列決定は、PNHおよび再生不良性貧血との関連に関する重要な情報につながる可能性がある。

検査結果にどのような要因があれば影響するのでしょうか？, 特に、あなたの患者は、検査結果に影響を与える可能性のある薬（OTC薬または薬草）を服用していますか？

PNHの希少性のために、慢性溶血性疾患であろうと鉄欠乏性貧血であろうと、提示のより一般的な病因について徹底的に評価されていないPNH ほとんどのエラーは、この不完全な臨床分析から生じ、臨床レビューの初期段階で発生します。, 例えば、鉄欠乏性貧血の出現を有するすべての患者は、出血源について徹底的に検討し、PNH検査を実施する前に、鉄欠乏性貧血の標準CBC、差動検査、および, 同様に、慢性溶血性疾患を呈している患者は、より特異的なPNH検査を追求する前に、以前の輸血、薬物誘発性溶血、およびその他の慢性溶血の原因について徹底的に見直されるべきである

PNHのスクリーニング検査（スクロース溶解検査、ハム検査）は、患者の生物学的材料に依存しているため、正常な赤血球と比較して、必要な検査は正確ではなく、不適切に行われたときには感受性が低くなる可能性がある。 これらの試験結果は、定性的であり、目視検査に基づいている。, しょ糖溶解試験およびＨａｍ試験の両方において溶血の欠如について対照管を適切に評価することが重要である。 したがって、これらの試験を標準化した経験を持つ参照実験室でこのような試験を行うことは価値があります。

フローサイトメトリーはおそらくPNHで利用可能なテストの中で最も正確ですが、フローサイトメトリーでさえいくつかの問題があります。 一つの問題は、CD55マーカーの”不在”の測定です。 否定的な結果を証明することは流れのcytometry病理学者のためのより困難な解釈常にである。, また、CD59がCD55よりも八倍小さいレベルで表現されているという事実は、CD59がPNHのための不十分な”バックアップ”マーカーになります。