recherche originale
valeurs de B2-microglobuline sérique chez les Brésiliens en bonne santé utilisant un dosage DPC IMMULITE®
valeurs de b2-microglobuline em brasileiros saudáveis utilisant ou système automatisé DPC IMMULITE®
Fabíola Branco Filippin; liliete Canes Souza
département D’analyse clinique, Centre des sciences et de la santé, Université fédérale de Santa Catarina – Florianópolis/SC, Brésil. E-mail: [email protected].,br
résumé
objet: la présente étude a été conçue pour déterminer la gamme normale de taux sériques de bêta-2-microglobuline (Sb2M) chez des volontaires sains au Brésil. Les niveaux de Sb2M sont élevés chez les patients infectés par le virus de l’immunodéficience humaine (VIH) et se sont avérés être le meilleur prédicteur de l’état d’infection par le VIH et de certains troubles malins, en particulier le myélome multiple., Afin d’obtenir son utilisation optimale dans le diagnostic clinique Brésilien, Une étude d’intervalle de référence adéquat a été réalisée pour Sb2M IMMULITE®, basée sur le fait que ses limites de plage de référence ont été évaluées parmi les populations européennes.
méthodes: quatre-vingt-seize donneurs de sang sains ont été évalués et les niveaux de Sb2M ont été mesurés par immunoessai enzymatique chimiluminescent à l’aide de L’analyseur automatisé IMMULITE®.
résultats: une plage normale de valeurs Sb2M, établie par une méthode statistique non paramétrique, était de 1,05 à 3,9 mg/mL, la limite supérieure étant supérieure à celle indiquée ailleurs.,
CONCLUSIONS: cette étude a présenté de nouvelles données indiquant qu’il existe une différence significative entre les limites de référence actuelles pour L’essai Sb2M IMMULITE® et celles trouvées au Brésil, fournissant des preuves que des différences significatives dans la gamme des valeurs normales peuvent se produire entre différentes populations, et que ces nouvelles valeurs devraient être prises en compte
mots clés: b2-microglobuline. Intervalle de référence. Immunoessai chimiluminescent. Les volontaires en bonne santé. Valeur pronostique.,
résumé
objectif: l’objectif de cette étude était de déterminer les valeurs de base de la B2-microglobuline sérique (Sb2M) chez des volontaires sains. On sait que ce paramètre est élevé chez les patients infectés par le virus de l’immunodéficience humaine (VIH) et s’est avéré être un meilleur marqueur de l’infection par le VIH et des troubles malins, en particulier le myélome multiple., Afin d’obtenir le meilleur diagnostic clinique, une plage de référence adéquate de Sb2M pour la population brésilienne a été déterminée à l’aide du test IMMULITE®; étant donné que cela a comme paramètre une plage de référence déterminée à partir de populations européennes.
méthodes: quatre-vingt-seize donneurs de sang sains ont été évalués et les valeurs Sb2M ont été mesurées par une méthode d’immunoessai enzymatique chimiluminescent à L’aide D’un analyseur automatisé IMMULITE®.
résultats: les valeurs de Sb2M, établies par une méthode statistique non paramétrique, étaient comprises entre 1,05 et 3.,9 mg / ml, et la limite supérieure obtenue était supérieure à celle rapportée dans d’autres études.
conclusion: Cette étude a présenté de nouvelles valeurs, indiquant qu’il existe une différence significative entre les limites de référence de Sb2M disponibles pour IMMULITE® et celles trouvées dans la présente étude, mettant en évidence l’occurrence de variations importantes entre les différentes populations et que de nouvelles valeurs devraient être prises en compte pour les Brésiliens.
Uniterms: B2-microglobuline. La plage de référence. Immunoessai chimiluminescent. Les volontaires en bonne santé. Valeur pronostique.,
La bêta-2-microglobuline (B2M), une protéine présente dans toutes les cellules nucléées, est associée à des antigènes de classe 1 d’histocompatibilité sur les membranes de surface cellulaire (particulièrement abondants sur les lymphocytes et les monocytes).1 Il a été découvert pour la première fois dans l’urine de patients atteints d’insuffisance rénale.2 en raison de son faible poids moléculaire (11 800 daltons), 95% de tout le B2M libre dans le plasma est éliminé par filtration glomérulaire et 99,9% de celui-ci est absorbé par les cellules tubulaires proximales. En présence d’un taux de filtration rénale normal, des taux sériques élevés de B2M (Sb2M) indiquent une production ou un relâchement élevé de b2m3., Lors de l’activation du système immunitaire, les lymphocytes B et T libèrent activement b2M dans la circulation d’où il est ensuite éliminé par filtration glomérulaire et réabsorption tubulaire.4 des concentrations accrues de Sb2M ont été observées chez des patients atteints de dyscrasies des cellules sanguines, y compris le myélome multiple,5,6 troubles lymphoprolifératifs malins,7 troubles myéloprolifératifs,8 certaines infections virales telles que l’infection par le HIVE9, le cytomégalovirus, les hépatites Non A et non B et la mononucléose infectieuse.,10 le niveau de Sb2M est également utilisé comme facteur pronostique important chez les patients atteints de myéloma5,6 multiples et d’infections par le VIH.9
La gamme de référence normale pour Sb2M chez les individus en bonne santé trouvée dans la littérature a été déterminée à l’aide de populations nord-américaines et européennes (DPC Immulite® assay). Dans une tentative de déterminer la plage normale des niveaux de Sb2M chez les individus africains séronégatifs asymptomatiques, Piwowar et al. (1995) 10 ont constaté que 50% de ces sujets présentaient des valeurs anormales (valeurs moyennes de 2,35 mg/mL). Dans une autre étude, la valeur Sb2M moyenne chez les volontaires sains était de 1,36 mg / mL.,11 dans ce rapport, nous décrivons les valeurs de Sb2M chez des sujets Brésiliens en bonne santé provenant d’un groupe de donneurs de sang au centre D’hématologie et D’hémothérapie de Santa Catarina (HEMOSC).
sujets
donneurs de sang, hommes et femmes non enceintes âgés de 25 à 50 ans, ont été inclus dans l’étude. Toutes les personnes ont subi une évaluation clinique évaluée par HEMOSC, y compris des questionnaires et des tests de laboratoire de dépistage selon des critères juridiques Brésiliens. Tous les volontaires remplissant ces critères ont donné leur consentement verbal et écrit pour faire prélever 5 mL de sang supplémentaires aux fins de l’étude., Le protocole expérimental a été approuvé par le Comité D’éthique de l’Hôpital Universitaire de Florianópolis, Université Fédérale de Santa Catarina.
méthodes
le sang total a été recueilli avec un système Vacutainer dans des tubes secs de 10 mL, et le sérum a été séparé par centrifugation. Afin d’éliminer les composants lipidiques, les échantillons de sérum ont été ultracentrifugés à 18000 g pendant 20 min. Tous les échantillons de sang ont été prélevés entre 14 h et 18 h et ont été traités dans les 5 heures suivant la ponction veineuse., Les échantillons ont été prédilutés 1 sur 41 dans le diluant D’échantillon b2M (IMMULITE® Beta2 Microglobulin kit, DPC, USA) conformément aux instructions du fabricant, et 5 mL ont été nécessaires pour la procédure d’analyse. Sb2M a été mesuré par un immunoessai enzymatique chimiluminescent en phase solide à 2 sites à l’aide de L’Analyseur automatisé IMMULITE® (DPC, Los Angeles, États-Unis).
analyse statistique
dans l’étude de la gamme de référence pour L’essai DPC IMMULITE®, la valeur moyenne était de 1,26 mg / mL., Le National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) aborde l’utilisation de critères d’exclusion a priori et a posteriori pour obtenir des échantillons sains.12 par conséquent, tous les sujets ayant des valeurs de Sb2M supérieures à 2,0 mg/mL ont été réévalués cliniquement pour l’acceptation de la valeur afin de s’assurer que chaque individu était « en bonne santé ». Les données ont été saisies et analysées avec le logiciel Microsoft Excel. Les valeurs moyennes et d’écart type ont été calculées. Les fourchettes de référence du 95e percentile ont été déterminées à l’aide de 2,5 et 97,5 percentiles., Selon la procédure recommandée par les NCCLS, les observations ont été classées en fonction de la taille, et les percentiles 2,5 et 97,5 ont été obtenus en tant qu’observations ordonnées de 0,025 (n + 1) et 0,975 (n + 1) respectivement (n= Taille de l’échantillon). Si les valeurs de rang estimées n’étaient pas des entiers, une interpolation linéaire a été effectuée.12
résultats
quatre-vingt-seize donneurs de sang Brésiliens, 60 hommes et 36 femmes, ayant un âge moyen de 33 ans, ont été inclus dans l’étude. Les valeurs de Sb2M variaient entre 1,05 et 3,9 mg/mL, comme le montre la Figure 1, et la moyenne était de 2,46 mg/mL (écart type = 0,73)., Par conséquent,en utilisant 97,5 th percentile selon une méthode non paramétrique de routine, 12 3,9 mg/mL a été considéré comme la limite normale supérieure. La fourchette établie était de 1,3 à 3,9 mg/mL.
DISCUSSION
des chercheurs du monde entier ont signalé l’utilité de Sb2M en tant que fabricant fiable dans l’évaluation de la progression de l’infection par le VIH et du myélome multiple.5-8, 10, 13 chez les sujets infectés par le VIH, Sb2M semble être un meilleur prédicteur de l’état d’infection par le VIH que le nombre de CD4 et également un meilleur prédicteur de la survie, l’augmentation des niveaux de Sb2M étant associée à la progression de la maladie.,10
Une augmentation de la production et la libération conséquente de Sb2M dans les fluides corporels ont été rapportées chez des patients atteints de myélome multiple. L’importance de ces données pour les cliniciens est basée sur le fait que les plasmocytes du myélome produisent Sb2M. par conséquent, on suppose que les valeurs Sb2M pourraient indiquer non seulement la taille mais aussi l’activité proliférative des cellules du myélome13 et pourraient être acceptées comme un fabricant non spécifique de la masse tumorale.5,6,13,14 en outre, le rôle pronostique du Sb2M dans d’autres troubles prolifératifs a été confirmé par de nombreux auteurs,7,14,15 facilitant l’évaluation clinique.,15 D’autre part, il a été rapporté que chez les patients présentant un faible taux de filtration glomérulaire, les niveaux de Sb2M ont été augmentés et les résultats de laboratoire doivent être interprétés avec prudence.6,7,13
les intervalles de référence sont utilisés cliniquement, avec des informations supplémentaires, comme lignes directrices concernant l’état du patient. L’étude de référence pour IMMULITE ® Sb2M (1,0-1,7 mg/mL, moyenne 1,26 mg/mL) définie par le fabricant a été déterminée à l’aide d’échantillons de sérum provenant de près de 800 volontaires adultes, hommes et femmes non enceintes, âgés de 20 à 70 ans., Les sujets ont été sélectionnés sur la base de questionnaires. Des échantillons ont été prélevés en France, en Allemagne, aux Pays-bas et au Portugal, et les valeurs obtenues ont été analysées de manière non paramétrique. La limite supérieure suggérée était de 1,7 mg / mL. Ces valeurs peuvent ne pas être représentatives pour les personnes Brésiliennes. En l’absence de limites de référence adéquates pour le Sb2M dérivé de n’importe quelle population brésilienne, de nombreux chercheurs ont utilisé des données obtenues de sujets nord-américains et européens qui présentaient des limites supérieures 2,3 fois inférieures à celles obtenues dans la présente étude.,
le NCCLS recommande d’utiliser des intervalles de référence non paramétriques et que la taille de l’échantillon, n, comprenne au moins 120 valeurs afin de calculer un intervalle de référence de 95%, des points de 2,5% et de 97,5% de la distribution12. Ce nombre est le nombre minimum de valeurs nécessaires à la construction des intervalles de confiance donnant des informations sur la précision des limites de référence calculées.
Dans cette étude, 96 échantillons ont été évalués., Notre objectif n’était pas de produire de nouveaux intervalles de référence, mais de mettre davantage l’accent sur la nécessité pour chaque Laboratoire de produire ses propres intervalles de référence pour tous les paramètres malgré de nombreuses difficultés, y compris pratiques et dépenses élevées.
la présente étude indique que des plages significativement différentes de valeurs de Sb2M peuvent se produire entre différentes populations, ce qui suggère que chaque laboratoire Brésilien devrait établir ses propres limites de référence.,
remerciements
Nous remercions le centre D’hématologie et D’hémothérapie de Santa Catarina et le laboratoire D’analyse clinique de L’Hôpital Universitaire de Florianópolis pour les échantillons et l’assistance technique. Nous sommes reconnaissants à DPC IMMULITE® d’avoir fourni le réactif mis gratuitement pour cette étude et au Dr. Joanita Del Moral de la Division D’Hématologie de L’Hôpital Universitaire de Florianópolis.
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