Hémoglobinurie paroxystique Nocturne (HPN)

Table 1

Existe-Il des Facteurs Qui Pourraient influer sur les Résultats de Laboratoire?, En particulier, votre patient prend – il des médicaments – Médicaments En vente libre ou herbicides-qui pourraient affecter les résultats de laboratoire?

L’utilisation d’un mauvais tube de collecte, par exemple de L’EDTA, peut bloquer l’activation du complément et produire des résultats faussement négatifs lors du test de lyse du saccharose. La plupart des méthodes utilisent maintenant des solutions de saccharose tamponnées, car les solutions de saccharose Non tamponnées peuvent également produire des résultats faussement négatifs. L’EDTA peut également bloquer l’activation du complément dans le test sérique acidifié, produisant un résultat faussement négatif. Un ajustement précis du pH est nécessaire au pH 6.78 +/- 0.1 pour des résultats fiables., L’utilisation d’un laboratoire de référence peut être nécessaire si la lyse du saccharose et les tests sériques acidifiés ne sont pas routiniers dans votre établissement. L’hémosidérine urinaire n’a pas besoin d’être intracellulaire pour être considérée comme positive, étant donné que l’urine normale doit être négative pour les granules d’hémosidérine.

quels résultats de laboratoire sont absolument Confirmatifs?

un diagnostic définitif de L’HPN est disponible par cytométrie en flux. Les patients atteints d’HPN ont diminué l’expression d’une protéine appelée protéines d’ancrage du glycophosphatidylinositol (GPI) sur les globules rouges., Par conséquent, il y aura diminution de la liaison de CD55 et CD59, qui modulent l’activité du complément et se lient principalement à la surface cellulaire GPI. CD55 et CD59 peuvent être diminués sur les surfaces des globules rouges; cependant, puisque CD55 est plus fortement exprimé que CD59, il est plus susceptible de fournir le résultat définitif.

la cytométrie en flux est très sensible et peut mesurer de petites populations cellulaires ou des clones affectés par la maladie (jusqu’à 1-5%). Il peut également détecter l’émergence de ces clones chez les patients atteints d’anémie aplasique ou de moelle osseuse hypoplasique., Comme pour la plupart des cytométries en flux, le sang doit être prélevé dans des tubes héparinisés et évalué dans les 24 heures suivant le prélèvement pour un test optimal.

quels Tests de confirmation dois-je demander pour mon Dx clinique? En outre, quels tests de suivi pourraient être utiles?

le gène responsable de L’HPN est le gène phosphatidylinositolglycan A (PIG-A). Il se trouve sur le chromosome X. Les mutations somatiques associées à la PNH peuvent être très variables. La plupart des mutations consistent en de petites suppressions ou insertions de paires de bases, mais des substitutions de bases peuvent également se produire., Les mutations mènent typiquement à un frameshift D’ADN et par conséquent ont comme conséquence la transcription et la traduction réduites du produit de protéine.

Les mutations peuvent également se produire à plusieurs endroits dans le gène PIG-A. Les Mutations dans l’HPN associée à l’anémie aplasique ont tendance à être plus importantes et/ou plus fréquentes que chez les patients atteints d’HPN uniquement. En plus des protéines modulant le complément (CD55 et CD59), le GPI lie de nombreuses autres protéines qui peuvent affecter de manière variable la stabilité de la membrane et l’activation du complément., L’un des problèmes les plus déroutants dans l’identification de L’HPN est la variabilité de l’expression du GPI, ce qui entraîne chez les patients une suppression légère à sévère de la synthèse du GPI. L’utilisation de la cytométrie en flux pour la détection de la liaison CD55 réduite est une façon de trier ce mosaïcisme ou cette expression. En fin de compte, le séquençage systématique des gènes et du génome entier peut conduire à des informations importantes concernant L’HPN et son association avec l’anémie aplasique.

Quels facteurs, le cas échéant, pourraient affecter les résultats de laboratoire?, En particulier, votre patient prend – il des médicaments – Médicaments En vente libre ou herbicides-qui pourraient affecter les résultats de laboratoire?

en raison de la rareté de L’HPN, de nombreuses erreurs sont liées au dépistage de l’HPN chez les patients qui n’ont pas été évalués en profondeur pour les étiologies les plus courantes de leur présentation, qu’il s’agisse d’une maladie hémolytique chronique ou d’une anémie ferriprive. La plupart des erreurs résultent de cette analyse clinique incomplète et se produisent aux premiers stades de l’examen clinique., Tous les patients présentant l’apparition de l’anémie ferriprive, par exemple, devraient être soigneusement examinés pour les sources de saignement et évalués à L’aide de CBC standard, différentiel, et des tests de dépistage de l’anémie ferriprive avant de poursuivre le test PNH., De même, un patient présentant une maladie hémolytique chronique doit faire l’objet d’un examen approfondi pour les transfusions antérieures, l’hémolyse induite par le médicament et d’autres causes chroniques d’hémolyse avant de procéder à des tests D’HPN plus spécifiques

étant donné que les tests de dépistage de L’HPN (test de lyse du saccharose, test de Ham) reposent sur du matériel biologique du patient, par rapport aux globules rouges normaux, les tests de nécessité sont moins précis et potentiellement moins sensibles lorsqu’ils sont mal effectués. Ces résultats d’essai sont qualitatifs et basés sur l’inspection visuelle., Il est important d’évaluer adéquatement les tubes témoins pour le manque d’hémolyse dans le test de lyse du saccharose et le test de Ham. Ainsi, il est utile de faire effectuer de tels tests dans un laboratoire de référence ayant l’expérience de la normalisation de ces tests.

la cytométrie en Flux est probablement le plus précis des tests disponibles pour la PNH; cependant, même la cytométrie en flux a plusieurs problèmes. Un problème est la mesure de l ‘” absence  » du marqueur CD55. Prouver des résultats négatifs est toujours une interprétation plus difficile pour le pathologiste de la cytométrie en flux., De plus, le fait que CD59 soit exprimé à des niveaux huit fois inférieurs à CD55 fait de CD59 un marqueur de « sauvegarde” inadéquat pour L’HPN.