oppiaineet
naiset rekrytoitiin tehtaan urban yhteisön Cuernavaca, 89 km etelään Mexico City., Kaikkien tehtaan naisten hemoglobiinipitoisuus määritettiin finger-prick – verinäytteistä ja sen jälkeen laskimoverinäytteestä seerumin ferritiinin määrittämiseksi ei-aneemisilla naisilla. Yhteensä 20 ei-aneeminen naiset, joilla on alhaiset rauta-kaupat rekrytoitiin perustuu hemoglobiinin ⩾125 g/l ja seerumin ferritiini pitoisuus <25 µg/l. Poissulkukriteerit raskauden ja imetyksen aikana, maha-tai aineenvaihdunnan häiriöt (tulehduksellinen suolistosairaus, krooninen ripuli, kystinen fibroosi), muut krooniset sairaudet ja ne, ottaen rauta täydentää., Riittävän hemoglobiinin omaavista äideistä rekrytoitiin kaikkiaan 20 ilmeisesti tervettä lasta (6-24 kuukauden ikäisiä) ja 20 ilmeisesti tervettä lasta (2-5-vuotiaita). Tutkittavat ja lasten vanhemmat olivat täysin perillä tutkimuksen tavoitteista ja menettelyistä, ja kirjallista suostumusta saatiin. Eettinen Komitea Instituto Nacional de Salud Pública, Cuernavaca, Meksiko ja Sveitsin Liittovaltion Institute of Technology, Zürich, Sveitsi tarkistaneet ja hyväksyneet pöytäkirjan.,
otoskoko
Otoksen koko laskelmat perustuivat yksilöiden välisiä ja intraindividual vaihtelut raudan imeytymistä, kuten on havaittu aiemmissa tutkimuksissa raudan biosaatavuus imeväisten ja pikkulasten (Davidsson et al., 1994, 1997, 2000, 2004). Se oli arvioitu, että 20 lasta olisi otoksen vähimmäiskoko havaitsemaan 50% merkittävä ero log tarkoittaa raudan imeytymistä alkaen aritmeettinen keskiarvo lähtötilanteessa raudan imeytymistä 7%, 90% tehon, on merkittävää tasolla 0,05 (pariton t-testi) ja tyypin I virhe, korko 5%., Näiden arvioiden mukaan 10 prosentin keskeyttämisprosentin ennakointi edellyttää vähintään 20 koehenkilöä kussakin ryhmässä tutkimusten suorittamiseen.
Tutkimuksen suunnittelu
Naisten, imeväisten ja lapset satunnaistettiin saamaan testi aterian joko ferrosulfaatti tai ferrofumaraatti peräkkäisinä päivinä. Koeateria annettiin aamiaiseksi yön yli kestäneen paaston jälkeen. Testiaterian hyväksyttävyys varmistettiin jokaisella lapsella ja lapsella ennen tutkimukseen osallistumista. Mitään ruokaa tai juomaa ei sallittu 3 tuntiin merkityn aterian täydellisen nauttimisen jälkeen., Imeväiset ja lapset pysyivät tarkassa valvonnassa koeaterian aikana ja sen jälkeen.
kaikkiaan 5 ml laskimoverta vedettiin EDTA-hoitoa saaneisiin putkiin juuri ennen ensimmäisen koeaterian nauttimista ja uudelleen 14 päivää myöhemmin. Verinäytteitä analysoitiin raudan tilan indikaattoreista (hemoglobiini ja seerumin ferritiini) ja raudan isotooppikoostumuksesta. Ruumiinpaino ja pituus mitattiin jokaisessa verinäytteenottopaikassa.
koeateria
koeateria oli makeutettu maissimaitojuoma, joka perustui paikalliseen meksikolaiseen maissijauhopuurojuomaan ”atole”. Se on valmistettu degermoidusta maissijauhosta (24.,7%), koko maitojauhe (11.7%), ’piloncillo’ (kiinteässä muodossa puhdistamaton ruskea sokeri; 63.5%) ja puhdistettua vettä (200 ml) ilman lisättyä rautaa tai askorbiinihappoa. Standardoitu testi aterioita valmistettiin erityisesti tutkimuksen paikallisesti saatavilla elintarvikkeita ostetaan irtotavarana, lukuun ottamatta degermed maissijauhoa, joka oli käytettävissä Meksikossa ja oli saatu Sveitsi (Swiss Mylly, Zürich, Sveitsi). Degermed maissijauhoa käytetään minimoimaan fytiinihappo sisältö jauhot, joka muutoin vähentää hyötyosuutta rauta testi ateria (Hurrell et al., 2002)., Testi ateria oli keitetyt keittiössä laitos ja kuljetetaan kuuma ruokinta center tehtaalla, jossa tarjoilu 220 g per nainen ja 60 g per lapsi ja lapsi oli valmistaa aamiaista ja seurasi saanti vettä. Kaikki koe-ateriat olivat samanlaisia paitsi lisäämällä joko 4 mg Fe (naiset) tai 2,5 mg Fe (imeväisten ja lasten) kuin joko -ferrofumaraatti tai -ferrous sulfate, joka lisättiin testi aterian juuri ennen tarjoilua. Ferrofumaraatti jauhe lisättiin suoraan testi -, ateria-ja ferrosulfaatti lisättiin ratkaisu.,
Vakaa isotooppi tarrat
Isotooppisesti merkitty-ferrofumaraatti oli valmistettu Tohtori Paul Lohmann GmbH (Emmerthal Saksa) alkaen rikastettu alkuaine rauta käyttäen downscaled menettely vastaa niiden kaupallinen valmistus prosessi. Samaa menettelyä on käytetty aiemmissa tutkimuksissa (Davidsson ym., 2000, 2001, 2002; Fidler ym., 2003; Sarker ym., 2004). Yksittäiset rautafumaraattiannokset punnittiin ennalta polyeteeniputkiksi, jolloin lisätty tarkka määrä määritettiin putken painon mukaan, minkä jälkeen ne varastoitiin., -ferrosulfaatti oli valmistettu isotooppisesti rikastettu alkuaine rauta (Chemgas, Boulogne, Ranska), joka liuotettiin 0,1 mol H2SO4/l ja tehty asianmukaiset pitoisuus. Liuosta säilytettiin argon-kaasukehän alla polyetyleenipullossa, kunnes se oli tarpeen, ja se punnittiin yksittäisannoksiksi ennen ruokintaa.,
isotooppikoostumus sekä tarrat oli mitattu kolmena kappaleena negatiivinen terminen ionisaatio massaspektrometria käyttäen magneettinen sektorin alalla massaspektrometri (MAT262; Finnigan MAT, Bremen, Saksa), joka on varustettu multi-keräilijä järjestelmä Faradayn kupit ion havaitseminen. Raudan pitoisuus jokainen tarra oli mitattu kolmena kappaleena, jonka käänteinen isotooppien laimennus analyysi (Walczyk, 1997). Ferrofumaraatti liuotettiin väkevään typpihappoon ennen isotooppilaimennusta., Rauta-standardin luonnollista isotooppista koostumusta oli valmis gravimetrisesti alkaen-isotoopin vertailuaineisto (IRMM-014; E. U. Institute of Reference Materials and Measurements, Geel, Belgia). Isotooppisuhteet mitattiin negatiivisella termisellä ionisaatiomassaspektrometrialla (Walczyk, 1997).
isotooppikoostumus verinäytteet
Rikastuttanut koko-verinäytteet olivat mineralisoituneet mikroaalloilla ruoansulatusta käyttämällä sekoitus väkevää HNO3 ja H2O2 (30%) kuin hapettavat aineet., Rauta oli erotettu matriisi, jonka anioninvaihtajan exchange chromatography-ja neste–neste-uutto astua dietyylieetteri (Walczyk et al., 1997). Kemiallisia aihioita käsiteltiin koko menettelyn ajan. Erotetun raudan isotooppikoostumus mitattiin negatiivisella termisellä ionisaatiomassaspektrometrialla.
Iron tila
Juuri laadittu koko-verinäytteet olivat aliquoted mittaus hemoglobiinin pitoisuuden avulla kannettava HemoCue photometer (Hemocue Oy., Angelholm, Ruotsi) ja standardoituja tekniikoita., Vastaava laadunvalvontamateriaali analysoitiin jokaisen näytteenottopäivän alussa (Hemocue Inc., Angelholm, Ruotsi). Määräosa koko veri oli erotettu seerumin ferritiiniarvot automaattisia immunomääritys (Immulite Yksi; DPC, Los Angeles, CA, USA) ETH, Zürich, ja loput koko veri oli jäädytetty myöhempää analysointia isotooppikoostumus.,
Laskeminen raudan imeytymistä
määrät 57Fe ja 58Fe isotooppien tarroja verta, 14 päivää sen jälkeen, kun hallinto, laskettu muutos Fe isotooppien suhteet ja arvioitu määrä verenkierrossa rauta elimistössä. Laskelmat perustuivat periaatteet, isotooppi-laimennus, ottaen huomioon, että raudan isotooppien tarrat eivät ole mono-isotooppi. Kiertävä rauta laskettiin veren tilavuuden ja hemoglobiinipitoisuuden perusteella. Veren tilavuuslaskelmat perustuivat ruumiinpainoon ja pituuteen Brown et al. (1962) naisten ja Linderkamp et al., (1977) lapsille. Laskelmat murto raudan imeytymistä, 80% sisällyttäminen imeytyy rautaa punasolujen oletettiin naisten (Hosein et al., 1967) ja 90% lapsille (9). Ferrofumaraatin RBV-arvo laskettiin kullekin tietokokonaisuudelle.
Tilastollinen analyysi
Murto-raudan imeytymistä arvot ovat esitetty geometrinen tarkoittaa, ja s.d. Kaikki tilastolliset testit olivat powered 80% ja suoritetaan 95%: n luottamusväli log-muuntaa tietoja, kuten raudan imeytymistä arvot eivät ole normaalisti jakautunut., Opiskelijan paritettua t-testiä käytettiin vertailemaan tietoja kunkin ikäryhmän sisällä. Rautafumaraatin RBV-arvoa verrattiin ikäryhmien välillä opiskelijan parittamattomalla t-testillä. Tilastollinen tehoanalyysi tehtiin kaupallisilla ohjelmistoilla (StatMate 2; GraphPad Software Inc., San Diego, CA, Yhdysvallat). Lineaarinen regressio käytettiin arvioimaan suhdetta raudan imeytymistä ja raudan myymälöissä (edustaa seerumin ferritiini) ja Pearsonin korrelaatiota käytettiin tutkia suhdetta seerumin ferritiini ja RBV.