ALKUPERÄINEN TUTKIMUS
Seerumin b2-mikroglobuliinin arvot keskuudessa terve Brasilialaiset käyttää DPC IMMULITE® assay
Arvot, b2-mikroglobuliinin em brasileiros saudáveis käyttäen tai automatisoitu järjestelmä DPC IMMULITE®
Fabíola Branco Filippin; Liliete Keppejä Souza
Department of Clinical Analysis, Tiede-ja terveyskeskus, Federal University of Santa Catarina – Florianópolis/SC, Brasilia. Sähköposti: [email protected].,br
TIIVISTELMÄ
TARKOITUS: tämän tutkimuksen tarkoituksena oli selvittää normaalin seerumin beeta-2-mikroglobuliini (Sb2M) tasot keskuudessa terveillä vapaaehtoisilla Brasiliassa. Tasot Sb2M ovat koholla ihmisen immuunikatovirus (HIV)-tartunnan saaneilla potilailla, ja on osoitettu olevan paras ennustaja HIV-infektio tilan ja joidenkin pahanlaatuisia sairauksia, erityisesti useita myelooma., Jotta voidaan saavuttaa optimaalinen käyttö Brasilian kliininen diagnoosi, riittävä reference interval tutkimus suoritettiin Sb2M IMMULITE® – määritystä, joka perustuu siihen, että sen vaihteluvälin rajoissa arvioitiin muun Euroopan populaatiot.
MENETELMÄT: yhdeksänkymmentäkuusi terveiden verenluovuttajien arvioitiin, ja Sb2M tasoa mitattiin kemiluminesenssi-entsyymi-immunomääritys käyttäen IMMULITE® automatisoitu analysaattori.
TULOKSET: normaali valikoima Sb2M arvot, perustettu-parametrinen tilastollinen menetelmä, oli 1,05 3,9 mg/mL, jossa yläraja on suurempi kuin todettu muualla.,
JOHTOPÄÄTÖKSET: Tässä tutkimuksessa esitetty uusia tietoja, mikä osoittaa, että on olemassa merkittävä ero nykyisen viite rajat Sb2M IMMULITE® assay ja ne löytyvät Brasiliasta, joka osoittaa, että merkittäviä eroja erilaisia normaaleja arvoja voi esiintyä eri populaatioissa, ja että nämä uudet arvot tulisi harkita Brasilian yksilöitä.
Asiasanat: b2-mikroglobuliini. Viiteväli. Kemiluminesenssi immunomääritys. Terveitä vapaaehtoisia. Ennustava arvo.,
tiivistelmä
tavoite: tämän tutkimuksen tavoitteena oli selvittää lähtötilanteessa arvot seerumin B2-mikroglobuliini (Sb2M) terveillä vapaaehtoisilla. Tiedetään, että tämä parametri on korkea potilailla, tartunnan immuunikatoviruksen (HIV) ja sen on osoitettu olevan parempi merkki HIV-infektioiden ja pahanlaatuisten sairauksien, erityisesti useita myelooma., Jotta saada paras kliininen diagnoosi, riittävä vaihteluvälin Sb2M Brasilian väestöstä oli päättänyt käyttää IMMULITE® assay; koska tämä on parametrina viite-alue, joka määritetään Euroopan populaatiot.
menetelmät: yhdeksänkymmentäkuusi terveiden verenluovuttajien arvioitiin ja Sb2M arvot mitattiin kemiluminesenssi-entsyymi-immunomääritys menetelmä käyttäen IMMULITE®automatisoitu analysaattori.
tulokset: nonparametrisellä tilastomenetelmällä määritetyt sb2m: n arvot olivat välillä 1,05-3.,9 mg / ml, ja saatu yläraja oli korkeampi kuin muissa tutkimuksissa.
johtopäätös: tämä tutkimus esitteli uusia arvoja, mikä osoittaa, että on merkittävä ero viite rajat Sb2M saatavilla IMMULITE® ja ne löytyvät tässä tutkimuksessa, osoittavat esiintyminen huomattavia eroja eri väestöjen välillä ja että uusia arvoja tulisi harkita Brasilialaiset.
Uniterms: B2-mikroglobuliini. Viitealue. Kemiluminesenssi immunomääritys. Terveitä vapaaehtoisia. Ennustava arvo.,
Beeta-2-mikroglobuliini (b2M) proteiini, jota esiintyy kaikissa tumallisiin soluihin, liittyy histocompatibility luokan 1 antigeenejä solun pinnalla limakalvojen (erityisesti runsas lymfosyytit ja monosyytit).1 se havaittiin ensimmäisen kerran munuaisten vajaatoimintaa sairastavien potilaiden virtsasta.2, Koska sen molekyylipaino on alhainen (11,800 daltonia), 95% kaikista vapaa-b2M plasmassa eliminoituu munuaiskerästen suodatuksen ja 99,9% siitä kuluu proksimaalisen tubulaarisen soluja. Läsnä on normaali munuaisten suodatusnopeus, kohonnut seerumin b2M (Sb2M) tasot osoittavat korkea b2M tuotanto-tai julkistus 3., Kun aktivointi immuunijärjestelmän, sekä B – ja T-lymfosyyttien aktiivisesti vapauta b2M liikkeeseen, josta se on myöhemmin eliminoituu glomerulusfiltraation ja tubulaarisen reabsorption.4 Lisääntynyt Sb2M pitoisuuksia on havaittu potilailla, joilla veren solujen muutokset, mukaan lukien multippeli myelooma,5,6 pahanlaatuisten lymfoproliferatiivisten häiriöiden,7 myeloproliferative häiriöt,8 tiettyjä virusinfektioiden, kuten HIV infection9, sytomegalovirus, ei-A ja ei-B-hepatiitti, ja mononukleoosin.,10 sb2m-tasoa käytetään myös tärkeänä ennustavana tekijänä multippelia myeloma5 -, 6-ja HIV-infektiota sairastavilla potilailla.9.
normaalin vaihteluvälin Sb2M terveillä henkilöillä löytyy kirjallisuudesta määritettiin käyttäen Pohjois-Amerikan ja Euroopan populaatiot (DPC Immulite® assay). Yritetään määrittää normaalin Sb2M tasoilla joukossa oireeton seronegatiivinen Afrikan yksilöitä, Piwowar et al. (1995)10 havaittiin, että 50%: lla näistä tutkimushenkilöistä oli epänormaalit arvot (keskiarvot 2, 35 mg/mL). Toisessa tutkimuksessa terveillä vapaaehtoisilla Keskimääräinen Sb2M-arvo oli 1,36 mg/mL.,11 tässä raportissa kuvataan sb2m-arvoja terveillä brasilialaisilla koehenkilöillä ryhmästä verenluovuttajia Santa Catarinan Hematologia-ja Hemoterapiakeskuksessa (HEMOSC).
tutkittavat
verenluovuttajat, 25-50-vuotiaat miehet ja ei-pregnantit naiset otettiin mukaan tutkimukseen. Kaikki henkilöt, tehtiin kliininen arviointi arvioi HEMOSC, kuten kyselylomakkeet ja seulonta laboratoriokokein mukaan Brasilian oikeudellisia perusteita. Kaikki vapaaehtoiset, jotka täyttivät nämä kriteerit, antoivat suullisen ja kirjallisen suostumuksen siihen, että tutkimukseen otetaan vielä 5 mL verta., Kokeellisen protokollan hyväksyi Santa Catarinan liittovaltion yliopiston Florianópoliksen yliopistollisen sairaalan eettinen komitea.
MENETELMÄT
Koko veri oli kerätty Vacutainer-järjestelmä 10-mL kuivaa putket, ja seerumi erotettiin sentrifugoimalla. Rasva-aineiden eliminoimiseksi seeruminäytteet ultrasentrifugoitiin 18000 g: n lämpötilassa 20 minuutin ajan. Kaikki verinäytteet saatiin kello 2.00-18.00 välisenä aikana ja ne käsiteltiin 5 tunnin kuluessa injektiokanyylin jälkeen., Näytteet olivat esilaimennettu 1–41 b2M Näytteen Laimennin (IMMULITE® Beeta2-Mikroglobuliini kit, DPC, USA) mukaan valmistajan ohjeiden, ja 5 mL olivat tarpeen määrityksen menettely. Sb2M mitattiin solid-phase 2-site kemiluminesenssi-entsyymi-immunomääritys käyttäen IMMULITE® Automatisoitu Analysaattori (DPC, Los Angeles, USA).
Tilastollinen analyysi
vaihteluvälin opiskella DPC IMMULITE® assay, keskiarvo oli 1.26 mg/mL., National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) – osoitteiden käyttö a priori ja a posteriori poissulkemisperusteet saada terve näytteitä.12 sentähden, kaikki aiheet Sb2M-arvot ovat yli 2,0 mg/mL olivat kliinisesti arvioida arvon hyväksyminen varmistaa, että jokainen yksilö oli ”terve”. Tiedot syötettiin ja analysoitiin Microsoft Excel-ohjelmistolla. Keskihajonta-ja keskihajonta-arvot laskettiin. 95.-persentiilin viite alueet määritettiin käyttämällä 2,5 ja 97,5 persentiilit., Mukaan menettely suositellaan NCCLS-laitoksen, havaintojen rankattiin koon mukaan, ja 2,5 ja 97,5 persentiilit saatiin kuin 0.025 (n + 1) ja takavarikoitiin 0,975 (n + 1) tilattu havaintoja lla (n= otoskoko). Jos arvioidut arvoarvot eivät olleet kokonaislukuja, suoritettiin lineaarinen interpolointi.Tutkimukseen osallistui 12
tulokset
Yhdeksänkymmentäkuusi brasilialaista verenluovuttajaa, 60 miestä ja 36 naista, joiden keski-ikä (yr) oli 33. Arvot Sb2M vaihteli välillä 1,05 ja 3,9 mg/mL, kuten Kuvassa 1, ja keskiarvo oli 2.46 mg/mL (keskihajonta = 0.73)., Siksi, käyttämällä 97.5 nnen persentiilin mukaan rutiini parametrinen menetelmä,12 3, 9 mg/mL pidettiin normaalialueen yläraja. Määritetty vaihteluväli oli 1,3-3,9 mg/mL.
KESKUSTELUA
Tutkijat eri puolilla maailmaa ovat raportoineet, hyödyllisyyttä Sb2M luotettava maker arvioitaessa etenemistä HIV-infektio ja multippeli myelooma.5-8,10,13 HIV-tartunnan saaneilla potilailla, Sb2M näyttää olevan parempi ennustaja HIV-infektio tilan kuin CD4-solujen määrä ja myös parempi ennustaja selviytymisen, lisääntynyt Sb2M tasoilla on liittyy sairauden etenemiseen.,Multippelia myeloomaa sairastavilla potilailla on raportoitu Sb2m: n tuotannon lisääntymistä ja siitä johtuvaa vapautumista kehon nesteisiin. Tärkeänä, että nämä tiedot lääkäreille perustuu siihen, että myelooma plasma solut tuottavat Sb2M. Siksi oletetaan, että Sb2M arvoja voi osoittaa paitsi koon, mutta myös proliferatiivinen aktiivisuus myelooma cells13 ja voidaan hyväksyä, koska epäspesifinen maker kasvain massa.5,6,13,14 lisäksi ennusteen rooli Sb2M muissa proliferatiiviset häiriöt on vahvistanut monet kirjoittajat,7,14,15 helpottaa kliinistä arviointia.,15 toisaalta, se on raportoitu, että potilailla, joilla on alhainen glomerulusfiltraatio, Sb2M tasoa nostettiin ja laboratorion tulokset on tulkittava varoen.6,7,13
Viite väliajoin käytetään kliinisesti, sekä muita tietoja, kuten ohjeita, jotka koskevat potilaan tilasta. Vaihteluvälin opiskella IMMULITE® Sb2M (1.01.7 mg/mL, keskiarvo 1.26 mg/mL), jotka on määritelty valmistajan määritettiin käyttämällä seerumin näytteet lähes 800 vapaaehtoisilla aikuisilla, mukaan lukien sekä miesten ja raskaana olevilla naisilla, jotka vaihtelevat 20-70-vuotiaita., Aiheet valittiin kyselylomakkeiden perusteella. Näytteitä kerättiin Ranskassa, Saksassa, Alankomaissa ja Portugalissa, ja arvot on saatu analysoitiin nonparametrically. Ehdotettu yläraja oli 1,7 mg/mL. Nämä arvot eivät välttämättä edusta brasilialaisia yksilöitä. Ilman riittävää vaihteluvälin raja-arvot Sb2M peräisin mistä tahansa Brasilian väestöstä, monet tutkijat ovat käyttäneet saatuja tietoja Pohjois-Amerikan ja Euroopan aiheita, että esitetty ylärajat 2,3 kertaa pienempi kuin saatu tässä tutkimuksessa.,
NCCLS suosittelee, että parametriset viite väliajoin voidaan käyttää ja että otoskoko, n, olisi kuuluttava vähintään 120-arvot, jotta voidaan laskea 95%: viite välein, 2.5% ja 97.5% pistettä distribution12. Tämä luku on luottamusvälien rakentamiseen tarvittavien arvojen vähimmäismäärä, joka antaa tietoa laskettujen viitearvojen oikeellisuudesta.
tässä tutkimuksessa arvioitiin 96 näytettä., Tavoitteenamme ei ole tuottaa uutta viite välein, mutta tuoda enemmän keskittyä jokaisen laboratorion tuottamaan oman viite välein kaikki parametrit huolimatta monia vaikeuksia, myös käytännöllisiä ja korkeat kulut.
tämä tutkimus osoittaa, että huomattavasti eri valikoimia Sb2M arvot voivat esiintyä eri populaatioissa, mikä viittaa siihen, että jokainen Brasilian laboratorio pitäisi perustaa oma viite rajoja.,
KIITOKSET
kiitos, Hematologian ja Hemotherapy Center of Santa Catarina ja Kliinisen Analyysin Laboratorio, University Hospital of Florianópolis varten näytteet ja teknistä apua. Olemme kiitollisia DPC IMMULITE® tarjoaa reagenssin asettaa ilmaiseksi tämän tutkimuksen ja Tohtori Joanita Del Moral päässä Hematologian Jako, University Hospital of Florianópolis.
2. Berggard I & Bearn AG. Ihmisen biologisissa nesteissä esiintyvän pienimolekyylisen beeta-2-globuliinin eristäminen ja ominaisuudet., Biol Chem 1968;243(15):4095-103.
6. Greipp PR, Katzman JA O ’ Fallon WM, Kyle RA. Arvo beeta-2mikroglobuliini tasolla ja plasman solun merkinnät indeksit ennustavat tekijät potilailla, joilla on äskettäin diagnosoitu myelooma. Blood 1988; 72(1): 219-23.
7. Constantines IP, Pathouli C, Karvountzis G, Papadopoulos P, Varvoutsi-Constantinides M, Eliakis P, et al. Seerumin beeta-2 mikroglobuliini pahanlaatuisissa lymfoproliferatiivisissa häiriöissä. Syöpä 1985;15(10):2384-89.
8. Rodriguez J, Cortes J, Talpaz M, O ’ Brien S, Smith TL, Rios MB, et al., Seerumin beeta-2-mikroglobuliinin pitoisuudet ovat merkittävä ennustava tekijä Philadelphia chomossome-positiivinen krooninen myelooinen leukemia. Clin Cancer Res 2000;6: 147-52.
10. Cooper E, Forbes M & Hammbling M. Seerumin beeta-2-mikroglobuliini ja C-reaktiivisen proteiinin pitoisuudet virusinfektioiden. J Clin Pathol 1985;37: 1140-3.
11. Diamondstone LS, Tollerud DJ, Fuchs D,Wachter H, Brown LM, Maloney e, et al. Tekijät, jotka vaikuttavat seerumin neopteriini-ja beeta-2-mikroglobuliinipitoisuuksiin terveessä monimuotoisessa populaatiossa. J Clin Immunol 1994;14(6): 368-74.
12., National Committee for Clinical Laboratory Standards. Miten määritellä ja määrittää viite välein kliininen laboratorio: hyväksytty ohje, NCCLS-asiakirjan C28-ja C28-A2, Villanova, PA, 1995, 2001, NCCLS.