Kliiniset ja Laboratoriokokeet Trichomonas vaginalis-Infektio,

DIAGNOSTIIKKA

Havaitseminen infektio voidaan toteuttaa erilaisia tekniikoita, jotka vaihtelevat kliininen diagnoosi laboratorio-pohjainen testaus (Taulukko 1). Kliininen diagnoosi on sopiva naisille, esittelee infektio-oireita; vastuuvapauden, kutinaa ja/tai emättimen hajua. Yleisimmin käytetty diagnostinen testi on märkävalmistemikroskopia., Moppi on tapana kerätä materiaalia emättimen fornix ja sijoitetaan pieni määrä, 0,5-1,0 ml normaalia suolaliuosta. Tippa suolaliuosta asetetaan liukumäkeen ja katsotaan mikroskoopilla, jolla on 40× tavoite. Motile trichomonads voidaan nähdä liikkuvan valmisteessa erottuva asynkroninen liike. Flagellan ja organismin toisella puolella olevan aaltoilevan kalvon on oltava näkyvissä., Hoito on toteutettava sen varmistamiseksi, että eliöt ovat liikkuvia, koska koko trichomonad on suunnilleen sama kuin valkosolujen, jotka todennäköisesti läsnä yksilöitä potilailla vastuuvapauden. Eliöt menettävät motiliteettiaan ex vivo lämpötilasokin vuoksi, joten diat on valmistettava ja luettava mahdollisimman pian keräyksen jälkeen väärien negatiivisten tulosten välttämiseksi. Vaikka liikkuvien trichomonads ovat erittäin erottuva, jos havaitaan mikroskooppisesti, organismi kuorma tarvitaan, jotta kaapata riittävästi organismien visualisointi on tuntematon., Verrattuna uudempi diagnostisia määrityksiä viittaa siihen, että märkä valmistelu mikroskopia on vain 40-60% herkkä, jopa kesken oireenmukainen naisilla (24). Matelitrichomonadien tarkkailu on kuitenkin erittäin spesifistä, joten se on erittäin hyödyllinen hoitojakson määrittämisessä. Mikroskooppia ei saa koskaan käyttää oireettomien naisten seulontamenetelmänä.

Parempia vaihtoehtoja mikroskopia ovat käytettävissä, joka voi havaita enemmän infektioita ja voidaan käyttää itsenäisesti läsnäolo oireita. Yksi tällainen määritys, joka voidaan käyttää point of care (POC) on OSOM (Sekisui, Framingham, MA) immunochromatographic entsyymi määritys suoritetaan kapillaarisen virtauksen mittatikku laitteen emättimen moppi näyte. Määritys perustuu lateksi-merkittyjä vasta-aine sitoo erityisesti trichomonas proteiineja ja toissijainen capture-vasta-aine sitoo monimutkainen lateral flow-laitteen., Testistä on luovuttu kliinisistä Laboratorionparannusmuutoksista (CLIA), jolloin se soveltuu POC-käyttöön, ja tulokset ovat saatavilla 15 minuutin kuluessa. Tämän määrityksen suoritusominaisuudet ovat varsin hyvät. Useissa tutkimuksissa tämän testin käyttö on parantanut tapausmääriä merkittävästi verrattuna vain mikroskopialla havaittujen tapausten määrään. Tutkimuksissa verrataan OSOM assay kanssa nukleiinihappomonistuksen (NAATs), POC-testi suoritetaan melko hyvin, herkkyys samanlainen kuin NAATs (>80% verrattuna NAATs osoitteessa >90%) (24, 25)., Ainoa haittapuoli tässä testissä on, että sitä voidaan käyttää vain naisille eikä sitä voida niputtaa POC klamydia/tippuri seulonta. Siten naiset, jotka hoidetaan trichomonas-infektio aikana toimiston vierailun perusteella positiivinen OSOM testi voi vielä palata hetkeksi käymään, jos ne on myöhemmin diagnosoitu joko klamydia tai tippuri perusteella laboratorio diagnostinen testi.

minkä tahansa POC-testin käyttö on selvästi perusteltua, kun oireenmukaiset naiset osallistuvat diagnostiseen arviointiin., Kyky määrittää aiheuttajaa ja antaa asianmukaista hoitoa, kun potilas on vielä vastaanotolla on ensiarvoisen tärkeää vähentää taudin leviämistä (26). Kuitenkin, kun luottaa mikroskopia, tuottajien olisi oltava tietoisia siitä, että negatiiviset tulokset voivat olla vääriä, puuttuu 50% tai enemmän infektioita, ja laboratorion arviointi voi tarjota hyödyllisiä tietoja. Tämä on erityisen tärkeää naisille, joilla ei ole merkkejä tai oireita, ja miehille (myös niille, joilla on oireita)., Märkä valmistelu mikroskopia on hyödyllinen ensimmäinen testi naisille, joilla on oireita, koska hoito voidaan antaa heti. Sitä olisi kuitenkin käytettävä kaskadiprosessissa, jossa mikroskopi-negatiiviset näytteet lähetetään laboratorioon lisäarviointia varten.

Laboratorio-pohjainen diagnostiikka on haitta ei tarjoa välittömiä tuloksia, kun potilas odottaa niin, että hoito voidaan antaa ennen loppua potilas käy., Kuitenkin, kyky eristää organismit käyttävät molekyyli-teknologiaa, testi useita taudinaiheuttajia, jotka ovat usein löytyy yhdessä, tai ajaa suuret eräkoot saattavat johtaa mittakaavaetuja ja muita lääketieteellisiä tietoja, jotka tukevat käyttää näitä testejä monet asetukset. Nämä edut ovat erityisen tärkeitä naisille ilman oireita, mutta joiden infektioriski on korkea, ja miehet yleensä, koska organismi kuormitus näyttää olevan kevyempi näissä ryhmissä ja siten korkea herkkyys ja alhaiset toteamisrajat ovat tarpeen.,

perinteinen laboratorio-pohjainen diagnostinen testi oli trichomonas kulttuuri muutettu Diamond medium. Viljelmiä arvioidaan mikroskoopilla, joka on valmistettu pisara viljelyainetta päivittäin enintään 7 päivän ajan. Merkittävä edistysaskel kulttuuri oli nähnyt saatavuus InPouch (Biomed Diagnostiikka, Santa Clara, CA) – järjestelmä, joka sisältää kulttuuri keskisuurten pussi, joka voidaan sijoittaa mikroskoopilla vaiheessa. Näin voidaan arvioida koko viljelmän tilavuus trichomonadien esiintymiseksi., InPouch-järjestelmä lisäsi herkkyyttä rutiinikulttuuriin (27), mutta järjestelmän todellinen etu on parantunut logistiikka. Tämä järjestelmä on mahdollinen apuohjelma resurssi-rajoitettu ympäristöissä, joissa klinikka-pohjainen mikroskopia voi olla mahdollista, mutta keskeinen laboratorio voi tarjota matalan teknologian tarpeisiin, kuten inkubointi ja mikroskooppinen arviointi. High-resource-asetukset, ainoa todellinen hyödyllisyys kulttuuri on saada elinkelpoisia organismeja, jotka saattavat olla merkityksellisiä mikrobilääkeherkkyyden testaus., Raportit kestävyys metronidatsoli, yleisimmin käytetty hoitoon trichomonas infektioita, on kuvattu kirjallisuudessa, mutta totta, missä määrin tämä ongelma on tuntematon ja herkkyysmääritykseen ei suoriteta rutiininomaisesti (5).

Ei-kulttuuria-pohjainen testit antavat usein lisätä kykyä havaita infektioita, koska elinkelpoisten organismien ei enää tarvita. Ensimmäinen kaupallisesti saatavilla oleva T. vaginaliksen ei-kulttuuripohjainen testi oli Affirm VPIII (BD, Sparks, MD). Tämä määritys käyttää DNA-luotaimen tekniikkaa Candida albicansin, Gardnerella vaginalisin ja T., vaginalis DNA yksittäisessä emätinpyyhkeessä. Testi on suunniteltu käytettäväksi vain sellaisten naisten näytteiden kanssa, joilla on emätinvuoto. Testi on nopea (tulokset ovat saatavilla <1 s) ja on ajaa pieni, määritys-erityinen väline. Määritys voidaan suorittaa CLIA: n keskivaikean kompleksisuuden testaamiseen akkreditoiduissa kliinisissä tai paikan laboratorioissa. Määrityksen suorituskykyyn havaitsemiseen T. vaginalis naisilla, emätintulehdus on parempi kuin mikroskopia (28), mutta merkittävästi huonompi kuin NAATs., Todellinen markkinarako tämän määrityksen on disentangling aiheuttajia emättimen vastuuvapauden populaatioissa, joissa STIs (esim klamydia tai tippuri) eivät ole yleisiä. Kyvyttömyys hyödyntää tämä testi seulonta keskuudessa korkean riskin oireettomia naisia ja puute kumppani klamydia/tippuri-testit samalla alustalla raja-tämä testi on sovellettavissa monia asetuksia.

NAATs on tullut tunnustettu kultaa standardi seulonta ja diagnoosi C. trachomatis ja N. gonorrhoeae (29)., Vuotuinen klamydian seulontaa suositellaan kaikille naisille <25 vuotta vanha, riippumatta siitä, käyttäytymisen riskitekijöitä tai oireita, yhdysvalloissa ja monissa Euroopan maissa. Suositukset seulonnasta gonokokki-infektiot ovat sidottu tiettyihin käyttäytymisen riskitekijöitä, pikemminkin kuin yleinen seulonta, koska paljon pienempi esiintyvyys tämän taudinaiheuttajan. Kuten edellä on mainittu, korkean riskin potilasryhmissä olevien naisten kohdennettua seulontaa trichomonas-infektion varalta suositellaan (7)., Huolimatta näistä eroista suosituksia, erityisesti yhdysvalloissa, yleinen käytäntö on nippu klamydia ja tippuri testaus naisille, jotka ovat oikeutettuja klamydian seulonta. Viime 5 vuotta, useita valmistajat klamydia/tippuri NAATs on tuotettu trichomonas NAATs, joka voidaan tehdä samasta näytteestä (emättimen moppi on näytteen valinta, mutta endoservikaalisia näytteitä ja naisten virtsa tyhjennetään näyte tyyppejä, jotkut määritykset)., Seurauksena, STI hallita ohjelmia on nyt mahdollisuus tarjota seulonta-ja diagnostisia palveluja ja samanaikaisesti tuottaa paremman epidemiologisia tietoja tartunnan T. vaginalis eri väestöryhmissä. Alla on kuvauksia useista nykyisin saatavilla olevista Naateista, jotka hyödyntävät erilaisia vahvistustekniikoita. Koska tartuntatautien diagnostiikka muuttuu nopeasti, luettelo ei ole tyhjentävä, vaan siinä keskitytään määrityksiin, joista on tällä hetkellä saatavilla Tietoja. Tässä yhteydessä ei myöskään esitetä erityisiä suorituskykyominaisuuksia., Perusteena on, että herkkyys-ja spesifisyysarviot ovat vain yhtä hyviä kuin testit, joihin uutta määritystä verrataan. Mikroskopia saattoi siis vaikuttaa erittäin herkältä verrattuna pelkkään kliiniseen havainnointiin. Tiedämme kuitenkin nyt, että mikroskopia toimii huonosti uudempiin testeihin verrattuna. Luontainen harhojen pitoisuus arviointi ovat lukuisia ja tehdä eri vertailujen vaikea kohta, että ne ovat lähes uninterpretable. Vaikka tarkka-piste-arvioilla on vain vähän merkitystä, on selvää, että NAATs päihittää kaikki muut T. vaginalis-testiluokat.,

ensimmäinen NAAT havaitsemiseen T. vaginalis olla hyväksynyt Food and Drug Administration (FDA) yhdysvalloissa on Aptima-TV assay (Hologic, San Diego, CA). Määritys on mukaelma Aptima Combo 2-Klamydia/Tippuri testi, jolloin hyödyntäminen näytteitä kerätään klamydia/tippuri seulonta (30). Kliinikon-kerätään emätintupoissa, endoservikaalisia näytteitä, ja endoservikaalisia näytteitä PreservCyt (Hologic, San Diego, CA), neste-pohjainen sytologia medium, ovat hyväksytyn näytteen tyypit määritys., Tekniikka perustuu rRNA uuttamalla näytteet, jonka jälkeen transkriptio välittyvät vahvistus kiinni rRNA. Tämän tavoitteen käyttö antaa luonnollisen piristysruiskeen havaitsemisrajalle, sillä kussakin organismissa on 102-103 kopiota. Isotermisen vahvistuksen tuloksena syntyvät monistetut tuotteet havaitaan kemiluminesenssireaktiolla, joka mitataan luminometrillä. Testi voidaan suorittaa joko Tigris DTS system-tai Panther system, jotka molemmat ovat täysin automatisoitu ja voi tuottaa 275 400 tulokset yhdessä 8 h työvuoro., Testaus on erillinen klamydia/tippuri testaus, niin että alkuperäinen näyte on otettava näyte kaksi kertaa saada tulokset kaikkien kolmen organismeja, mutta testaus voidaan tehdä samanaikaisesti Panther-järjestelmä niin, että kaikki tulokset ovat saatavilla samaan aikaan. Suorituskykyä tämä määritys on erinomainen, jossa herkkyys ja spesifisyys arviot >90% >95%, vastaavasti (30).

Toinen korkean suorituskyvyn, täysin automatisoitu järjestelmä, jossa hyväksytty määritys T., vaginalis on Viper XTR-järjestelmä, joka suorittaa BD ProbeTec Trichomonas vaginalis Qx (TVQ) assay (BD, Sparks, MD). Tämä määritys perustuu strand siirtymä, vahvistus (SDA) DNA uutetaan potilaan näytteet, joissa rautaoksidia (31). SDA on isoterminen prosessi reaaliaikainen vahvistus ja tunnistus valon päästöjen erinomainen herkkyys ja spesifisyys (>95% ja >99%, vastaavasti) (31)., Viper alustan voi tuottaa >700 tulokset yhden työvuoron ja voi testata klamydia/tippuri ja trichomonas-infektiot yhden kiinnittää potilaan näyte astiaan (toisin sanoen, yksittäinen DNA: n eluointi vaihe voi tarjota kaikki kolme tulokset). Lisäksi potilas-saadut emätintupoissa ja endoservikaalisia näytteitä, tämä määritys on FDA: n vaatimus naisten virtsasta. Kun nainen virtsaa ei ole ihanteellinen näytteen tyyppi trichomonas (tai klamydia/tippuri) infektio testaus (29), se on yleisesti saatu näyte tyyppi, joten tämä hyödyllinen etu.,

vaikka vertailulaboratorioiden suuritehoiset alustat voivat auttaa saavuttamaan kustannussäästöjä, saattaa olla olemassa merenkulku-ja aikakustannuksia, jotka tekevät testauksesta pienemmissä, paikallisissa laboratorioissa houkuttelevan vaihtoehdon. Edellä mainittu Affirm-määritys on esimerkki testistä (CLIA moderate), jota voidaan käyttää paikan päällä olevassa laboratoriossa. Kuten kuitenkin mainittiin, tämä määritys on tarkoitettu käytettäväksi vain sellaisten naisten näytteiden kanssa, joilla on emätintulehdus. NAATs ovat nopeasti tulossa saataville, joiden on tarkoitus täyttää tämä testaus kapealla ja tarjota parannettu herkkyys liittyy NAATs., Nämä määritykset ovat tärkeitä STI ohjaus ponnisteluja ja muuttaa nykyisen paradigman kuka testataan ja missä asetuksissa. Naisille, joilla on infektion merkkejä tai oireita, näistä määrityksistä voi olla hyötyä, koska ne ovat herkkiä ja suhteellisen nopeasti tuloksia. Esimerkiksi naisen lantion kipua, mutta ei valkovuoto ei olisi oikeutettu testaus Vahvistaa, assay, mutta voisi hyötyä NAAT käyttää hätätilanteessa department (ED) tai vankilassa ympäristössä, jossa on 60 – 90 min odottamaan tuloksia ei olisi kohtuuton.,

Yksi tällainen määritys, joka sai FDA: n hyväksynnän vuonna 2015 on AmpliVue Trichomonas määritys (Quidel, San Diego, CA). Tässä määrityksessä käytetään isotermistä helikaasiriippuvaista vahvistusta (32) trichomonas DNA: n havaitsemiseen sivuttaisvirtauksella. Tarvitaan pieni, määrityskohtainen analysaattori, ja tämä määritys on nimetty CLIA-keskitason testiksi. Tulokset ovat käytettävissä 1 s, ja herkkyys ja spesifisyys näyttävät olevan samanlaisia kuin kulttuuri., On huomattava, että n julkaisut ovat saatavilla koskien välisiä vertailuja tämä testi ja muut NAATs, joten herkkyys data package insert, joka on saatu verrattuna vähemmän herkkä mikroskopia ja kulttuuri-menetelmiä, olisi otettava mahdollisena yliarvioida. Valitettavasti tätä määritystä ei voida suorittaa klamydia/tippuri-testauksen yhteydessä samalla alustalla, mikä jossain määrin rajoittaa sen sovellettavuutta monissa asetuksissa.,

tällä kertaa, Xpert-TV assay (Cepheid, Sunnyvale, CA) ei ole vielä hyväksynyt FDA, mutta se on saatavana CE-merkki Euroopassa, ja sen odotetaan olevan saatavilla yhdysvalloissa lähitulevaisuudessa. Tämä määritys käyttää reaaliaikaista PCR-järjestelmää kertakäyttöisessä sylinteriampullissa. Soittimet vaihtelevat yhden sylinteriampullin moduulista 80 sylinteriampullin soittimiin. Läpimeno vaihtelee instrumentoinnin koon mukaan siten, että jokainen sylinteriampulli vaatii trichomonas-tulosten tuottamiseen noin 60 minuuttia., Xpert-järjestelmän etuna on, että tämän Alustan valikko on laaja ja joustava, koska kaikki määritykset suoritetaan patruunoiden sisällä. Näin trichomonas-patruuna voi olla käynnissä, kun klamydia / tippuri-patruuna on käynnissä seuraavassa moduulissa. Menu ulottuu Sukupuolitaudit laaja valikoima taudinaiheuttajia, joten tämä instrumentti on ihanteellinen matala suoritusteho asetuksia, jotka haluavat vahvistaa suuri määrä testejä yhdelle alustalle., Esimerkiksi ED voi käyttää tätä järjestelmää luoda STI tulokset potilas esittelee valituksia, jotka liittyvät seksuaaliterveyteen, kun samanaikaisesti käynnissä metisilliiniresistentti Staphylococcus aureus ja Clostridium difficile-testaus muiden potilaiden. Edelleen, tämä määritys on väite Euroopassa, ja se on toivottavaa, on yksi yhdysvalloissa uros virtsaa, joten tämä ainoa alusta, jolla testaus voidaan tarjota miehille. Tämä on oleellista, sillä trichomonas-infektiota sairastavien naisten sukupuoliyhteydessä olevien miesten tartuntojen määrän on raportoitu olevan jopa 70% (16).,

T. vaginalis-infektio on ollut paljolti huomiotta jätetty STI jo vuosia. Viime vuosikymmenen aikana epidemiologinen tutkimus on kuitenkin johdonmukaisesti osoittanut yhteenliittymiä, joilla on vältettävissä olevia kielteisiä terveysvaikutuksia. Kun perusteita ei lisäämällä T. vaginalis, että ilmoitettavien tautien luetteloon yhdysvalloissa on ääni (9), on edelleen tarvetta parantaa testauksen mahdollisuuksia, erityisesti naisille., Monet asetukset, vaikka ei ole suosituksen CDC, kun seulonta klamydia/tippuri suoritetaan ensimmäisen raskauskolmanneksen aikana synnytystä terveydenhuollon, trichomonas-infektio seulonta on nyt lisätty. Tämä seulonta on lisätty suurelta osin seurauksena kätevästi voisivat tilata useita testejä yhden potilaan näytettä. Seulontaa tukevat tiedot vahvistuvat, kun käytetään entistä enemmän laadukkaita testejä ja tuotetaan tarkempia tietoja (20)., Lisäksi useimmissa naistenklinikka ja perhesuunnittelu asetukset yhdysvalloissa, määrä trichomonas-infektio on huomattavasti korkeampi kuin tippuri ja kun tarjoajia on pääsy tietoja heidän erityispotilasryhmissä, he ovat hyvin kiinnostuneita, joilla on pääsy tämän testauksen.

kehitteillä on monia POC-ja low-in-vaihtoehtoja, jotka mahdollistavat paikallisen testauksen. Ne, jotka on suurin vaikutus ovat testejä, joilla on mahdollisuus ajaa klamydia/tippuri testaus, on korkea herkkyys, ja tuottaa tuloksia nopeasti., Kuten kaikki lääketieteellinen testaus -, kustannus on keskeinen rooli kertymä, mutta laajentaa kilpailua markkinoilla auttaa pitämään kustannukset kohtuullisina. Klinikka virtauksen malleja, joita voi hyödyntää potilas-saadut näytteet ja rutiini testi tilaus voi hyödyntää testi-ja-hoitoon paradigman sisällä rutiini seksuaalista terveydenhuolto tai kiireellinen hoito vierailla., Saatavuus testaus miehille, jotka ovat seksikumppanit naisista trichomonas infektioita, mikä on tärkeää, koska korkea-infektion samanaikaisuuden sisällä seksuaalista kumppanuuksia (16), tai miehiä, jotka ovat virtsaputken todennäköisesti lisää kysyntää, jos testaus voi olla tarjotaan lähellä-potilaan nopea testi. Seulonta alueilla, kuten kaakkois-yhdysvalloissa, jossa sekä trichomonas levinneisyyttä ja HIV: n esiintyvyys keskuudessa mustat naiset ovat korkein maassa, voi tarjota ylimääräinen työkalu meidän HIV prevention toolkit (23)., Näin, trichomonas testaus on tullut jäädäkseen ja on vain tullut useammin hyödyntää tulevaisuudessa, kun määritykset käytettävissä, että testaus edelleen parantaa tarkkuutta ja mukavuutta sekä potilaille ja terveydenhuollon tarjoajille.