ORIGINAL FORSKNING
Serum b2-mikroglobulin værdier blandt raske Brasilianerne ved hjælp af en DPC IMMULITE® – analyse
Værdier af b2-mikroglobulin em brasileiros saudáveis hjælp eller automatiseret system DPC IMMULITE®
Fabíola Branco Filippin; Liliete Stokke Souza
Institut for Klinisk Analyse, Videnskab og Sundhed Center, Federal University of Santa Catarina – Florianópolis/SC, Brasilien. E-mail: [email protected].,br
abstrakt
formål: den foreliggende undersøgelse var designet til at bestemme det normale interval af serum beta 2-mikroglobulin (Sb2M) niveauer blandt raske frivillige i Brasilien. Niveauer af Sb2M er forhøjet i human immundefekt virus (HIV)-inficerede patienter og har vist sig at være den bedste indikator for forekomsten af HIV-infektion status og visse maligne lidelser, især myelomatose., For at opnå den optimale anvendelse i brasiliansk klinisk diagnose blev der udført et passende referenceintervalstudie for SB2M IMMULITE assay-assay, baseret på det faktum, at dets referenceintervalgrænser blev evalueret blandt europæiske populationer.
metoder: seksoghalvfems sunde bloddonorer blev evalueret, og sb2m-niveauer blev målt ved kemiluminescerende en .ymimmunoassay ved anvendelse af IMMULITE automated automatiseret analysator.
RESULTATER: for det normale område af Sb2M værdier, der er etableret af en nonparametric statistisk metode, var 1.05 til 3,9 mg/mL, med den øvre grænse er højere end rapporteret andre steder.,
KONKLUSION: Denne undersøgelse, der præsenteres nye data, der viser, at der er en betydelig forskel mellem den nuværende reference grænser for Sb2M IMMULITE® – analyse og dem, der findes i Brasilien, der beviser, at der er betydelige forskelle, der er inden for rækkevidde af normale værdier, der kan forekomme blandt forskellige populationer, og at disse nye værdier skal anses for Brasiliansk enkeltpersoner.nøgleord: b2-mikroglobulin. Referenceinterval. Kemiluminescerende immunoassay. Sunde frivillige. Prognostisk værdi.,Formål: Formålet med denne undersøgelse var at bestemme basisværdier af serum B2-mikroglobulin (Sb2M) hos raske frivillige. Det er kendt, at denne parameter er høj hos patienter, der er smittet med human immundefekt virus (HIV) og har vist sig at være en bedre markør for HIV-infektion og maligne lidelser, især myelomatose., For at opnå den bedste kliniske diagnose blev et passende referenceområde for Sb2M for den brasilianske befolkning bestemt ved anvendelse af IMMULITE assay-assayet; da dette som parameter har et referenceområde bestemt fra europæiske populationer.
metoder: seksoghalvfems sunde bloddonorer blev evalueret, og sb2m-værdier blev målt ved kemiluminescerende en .ymimmunoassay-metode ved anvendelse af IMMULITE automated automatiseret analysator.
resultater: værdierne af Sb2M, der blev fastlagt ved ikke-parametrisk statistisk metode, var mellem 1,05 og 3.,9 mg / ml, og den opnåede øvre grænse var højere end den, der blev rapporteret i andre undersøgelser.
konklusion: denne undersøgelse, der præsenteres nye værdier, hvilket indikerer, at der er en betydelig forskel mellem reference grænser for Sb2M til rådighed for IMMULITE® og dem, der findes i den foreliggende undersøgelse, der dokumenterer forekomsten af store forskelle mellem forskellige befolkningsgrupper, og at nye værdier, der bør overvejes for Brasilianerne. B2-mikroglobulin. Referenceområde. Kemiluminescerende immunoassay. Sunde frivillige. Prognostisk værdi.,
Beta-2-mikroglobulin (b2M) et protein, der findes i alle kerneholdige celler, der er forbundet med histocompatibility klasse 1-antigener på celleoverfladen membraner (særligt rigt på lymfocytter og monocytter).1 Det blev først opdaget i urinen hos patienter med nyresvigt.2 på grund af dens lave molekylvægt (11.800 Dalton) elimineres 95% af al fri b2M i plasma ved glomerulær filtrering, og 99, 9% af den optages af pro proximimale rørformede celler. I nærvær af en normal renal filtreringshastighed indikerer forhøjede serum B2M (Sb2M) niveauer Høj B2M produktion eller frigivelse3., Ved aktivering af immunsystemet frigiver både B – og T-lymfocytter aktivt b2M i omløb, hvorfra det senere elimineres via glomerulær filtrering og tubulær reabsorption.4 Øget Sb2M koncentrationer er fundet i patienter med celler, blod dyscrasias, herunder myelomatose,5,6 malignant lymphoproliferative disorders,7 myeloproliferative lidelser,8 visse virale infektioner som HIV infection9, cytomegalovirus, ikke-A og non-B hepatitis, og mononukleose.,10 niveauet af Sb2M anvendes også som en vigtig prognostisk faktor hos patienter med multiple myeloma5,6 og HIV-infektioner.9
det normale referenceområde for Sb2M hos raske individer fundet i litteraturen blev bestemt ved anvendelse af nordamerikanske og europæiske populationer (DPC Immulite assay assay). I et forsøg på at bestemme det normale interval af sb2m-niveauer blandt asymptomatiske seronegative afrikanske individer, pi .o .ar et al. (1995) 10 fandt, at 50% af disse forsøgspersoner havde unormale værdier (middelværdier 2, 35 mg/mL). I en anden undersøgelse var den gennemsnitlige sb2m-værdi blandt raske frivillige 1, 36 mg/mL.,11 i denne rapport beskriver vi sb2m-værdier hos raske Brasilianske forsøgspersoner fra en gruppe bloddonorer ved Hematology and Hemotherapy Center of Santa Catarina (HEMOSC).
forsøgspersoner
bloddonorer, mænd og ikke-gravide kvinder i alderen fra 25 Til 50 år blev inkluderet i undersøgelsen. Alle personer gennemgik en klinisk vurdering evalueret af HEMOSC, herunder spørgeskemaer og screeningslaboratorietest i henhold til Brasilianske juridiske kriterier. Alle frivillige, der opfyldte disse kriterier, gav mundtligt og skriftligt samtykke til at få yderligere 5 mL blod trukket til studieformålet., Den eksperimentelle protokol blev godkendt af det etiske udvalg på Universitetshospitalet i Florianpolpolis, Federal University of Santa Catarina.
metoder
Fuldblod blev opsamlet med et Vacutainer-system i 10 mL tørre rør, og serum blev adskilt ved centrifugering. For at eliminere lipidkomponenter blev serumprøver ultracentrifugeret ved 18000 g i 20 minutter. Alle blodprøver blev opnået mellem 2: 00 og 6: 00 og blev behandlet inden for 5 timer efter venepunktur., Prøverne blev prediluted 1-i-41 i b2M Sample Diluent (IMMULITE® Beta2 Mikroglobulin kit, DPC, USA) i henhold til fabrikantens anvisninger, og 5 mL var nødvendige for analyseproceduren. Sb2M blev målt ved hjælp af en fast-fase 2-site kemiluminiscerende enzym immunoassay hjælp IMMULITE® Automatiseret Analysator (DPC, Los Angeles, USA).
Statistisk analyse
I referenceområdet undersøgelse for DPC IMMULITE® – analyse, middelværdien var 1.26 mg/mL., National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) behandler brugen af A priori og a posteriori udelukkelseskriterier for at opnå sunde prøver.12 Derfor blev alle forsøgspersoner med sb2m-værdier større end 2, 0 mg/mL klinisk revurderet for værdiaccept for at sikre, at hvert individ var “sundt”. Data blev indtastet og analyseret med Microsoft e .cel-soft .are. Middel – og standardafvigelsesværdierne blev beregnet. De 95. percentil referenceområder blev bestemt ved anvendelse af 2,5 og 97,5 percentiler., I henhold til den procedure, der anbefales af NCCLS, observationerne blev rangeret efter størrelse, og de 2,5 og 97.5 fraktilerne blev opnået som 0.025 (n + 1), 0.975 (n + 1) bestilte observationer henholdsvis (n= stikprøvestørrelse). Hvis de estimerede rangværdier ikke var heltal, blev lineær interpolation udført.12
resultater
seksoghalvfems Brasilianske bloddonorer, 60 mænd og 36 kvinder med middelalder (år) på 33 blev inkluderet i undersøgelsen. Værdier af Sb2M varierede mellem 1,05 og 3,9 mg/mL, som vist i Figur 1, og den gennemsnitlige blev 2.46 mg/mL (standardafvigelse = 0.73)., Derfor blev 12 3,9 mg/mL betragtet som den øvre normale grænse ved anvendelse af 97, 5.percentil ifølge en rutinemæssig nonparametrisk metode. Det etablerede interval var 1, 3-3, 9 mg/mL.
diskussion
forskere over hele verden har rapporteret nytten af sb2m som en pålidelig producent til evaluering af progression af HIV-infektion og multipelt myelom.5-8, 10, 13 hos HIV-inficerede individer ser Sb2M ud til at være en bedre forudsigelse af HIV-infektionsstatus end CD4-tællinger og også en bedre forudsigelse for overlevelse, med øgede sb2m-niveauer forbundet med sygdomsprogression.,10
øget produktion og deraf følgende frigivelse af Sb2M i kropsvæsker er rapporteret hos patienter med multipelt myelom. Betydningen af disse data for klinikere, der er baseret på det faktum, at myelomatose plasma-celler, der producerer Sb2M. Det er derfor antaget, at Sb2M værdier, der kunne indikere, ikke kun størrelsen, men også den proliferative aktivitet af myelomatose cells13 og kunne accepteres som en uspecifik kaffefaciliteter af tumormassen.5,6,13,14 derudover er den prognostiske rolle Sb2M i andre proliferative lidelser blevet bekræftet af mange forfattere,7,14,15, der letter klinisk vurdering.,15 på den anden side er det rapporteret, at hos patienter med lav glomerulær filtreringshastighed blev sb2m-niveauer hævet, og laboratoriefund skal fortolkes med forsigtighed.6,7,13
Referenceintervaller anvendes klinisk sammen med yderligere oplysninger som retningslinjer for patientens tilstand. Reference intervallet undersøgelse til IMMULITE® Sb2M (1.01.7 mg/mL, betyder 1.26 mg/mL), der er defineret af producenten blev bestemt ved hjælp af serum prøver fra næsten 800 voksne frivillige, herunder både mænd og nonpregnant kvinder, der spænder fra 20 til 70 år., Emnerne blev valgt ud fra spørgeskemaer. Der blev indsamlet prøver i Frankrig, Tyskland, Holland og Portugal, og de opnåede værdier blev analyseret nonparametrisk. Den foreslåede øvre grænse var 1, 7 mg / mL. Disse værdier er muligvis ikke repræsentative for Brasilianske individer. I mangel af passende referenceintervalgrænser for sb2m afledt af enhver Brasiliansk befolkning har mange efterforskere brugt data opnået fra nordamerikanske og europæiske forsøgspersoner, der præsenterede øvre grænser 2, 3 gange lavere end den, der blev opnået i den nuværende undersøgelse.,
Nccls anbefaler, at der anvendes ikke-parametriske referenceintervaller, og at prøvestørrelsen, n, skal bestå af mindst 120 værdier for at beregne et 95% referenceinterval, 2,5% og 97,5% point for fordelingen12. Dette tal er det mindste antal værdier, der er nødvendige for konstruktionen af konfidensintervallerne med oplysninger om nøjagtigheden af de beregnede referencegrænser.i denne undersøgelse blev 96 prøver evalueret., Vores mål var ikke at producere nye referenceintervaller, men at bringe mere fokus på behovet for, at hvert laboratorium producerer sine egne referenceintervaller for alle parametre på trods af mange vanskeligheder, inklusive praktiske og høje udgifter.
den foreliggende undersøgelse indikerer, at der kan forekomme signifikant forskellige intervaller af sb2m-værdier blandt forskellige populationer, hvilket antyder, at hvert Brasiliansk laboratorium skal fastsætte sine egne referencegrænser.,
anerkendelser
Vi takker hæmatologi-og Hæmoterapicentret i Santa Catarina og det kliniske analyselaboratorium, Universitetshospitalet i Florianpolpolis for prøverne og teknisk assistance. Vi er taknemmelige for DPC IMMULITE for for at have leveret reagenssættet gratis til denne undersøgelse og til Dr. Joanita del Moral fra Hematology Division, University Hospital of Florianpolpolis.
2. Berggard i & Bearn AG. Isolering og egenskaber af en lavmolekylær beta-2-globulin forekommer i humane biologiske væsker., J Biol Chem 1968;243(15):4095-103.
6. Greipp PR, Katzman JA, O ‘ Fallon WM, Kyle RA. Værdi af beta 2-mikroglobulinniveau og plasmacellemærkningsindeks som prognostiske faktorer hos patienter med nydiagnosticeret myelom. Blod 1988; 72 (1):219-23.
7. Constantines IP, Pathouli C, Karvountzis G, Papadopoulos S, Varvoutsi-Constantinides M, Eliakis P, et al. Serum-beta 2-mikroglobulin ved maligne lymfoproliferative lidelser. Kræft 1985; 15 (10): 2384-89.
8. Rodrigue.J, Cortes J, Talpa. M, O ‘ Brien S, Smith TL, Rios MB, et al., Serum-beta-2-mikroglobulinniveauer er en signifikant prognostisk faktor i Philadelphia chomosome-positiv kronisk myelogen leukæmi. Clin Cancer Res 2000;6:147-52.
10. Cooper E, Forbes M & Hammbling M. Serum beta-2-mikroglobulin og C-reaktivt protein koncentrationer i virale infektioner. J Clin Pathol 1985;37:1140-3.
11. Diamondstone LS, Tollerud DJ, Fuchs D, Wachter H, Brun LM, Maloney E, et al. Faktorer, der påvirker serum-neopterin-og beta-2-mikroglobulinniveauer i en sund, mangfoldig population. J Clin Immunol 1994;14(6):368-74.
12., National Committee for Clinical Laboratory Standards. Sådan defineres og bestemmes referenceintervaller i det kliniske laboratorium: godkendt retningslinje, nccls-dokument C28 – A og C28-A2, Villanova, PA, 1995, 2001, NCCLS.