Etik
Denne undersøgelse blev gennemført i overensstemmelse med bestemmelserne i Helsinki-Erklæringen (1964) og i overensstemmelse med den Regionale Etiske Komité, Göteborg.
Hunde
To hunde blev brugt, Hanna, en 10-årig sort Giant Schnauzer (chip nr., 967000000389928), og Lotti, en 6-årig sort Giant Schnauzer (chip nr. 098100311386). Ejeren og handleren er GH. Hundene lever som familie kæledyr med ejeren og hans familie. Der er fri adgang til ferskvand hele dagen og fodring tre gange om dagen. Hundene tilbringer flere timer hver dag i en have eller på vandreture. Sundhedstjek foretages på V .rmd.Dyreklinik, Gustavsberg.
træning
træningsmetoden er beskrevet detaljeret andetsteds . I 2 år før den nuværende undersøgelse blev der kun brugt en gang om ugen vedligeholdelsesuddannelse., Hver af træningssessionerne omfattede 4-10 kasser, hvoraf 0-3 indeholdt kræftvæv eller blod fra patienter med ovariecarcinom. Opsætningen blev tilfældigt valgt før hver session. Dette program gjorde det muligt for hundene at blive konfronteret med et andet problem at løse i hver Trænings lejlighed. Hundene blev kun belønnet for en korrekt identifikation. Blodprøver med >500 U / ml CA-125 værdier som indikator for ovariecarcinom blev anvendt til træning. En dråbe af træningsprøven blev anbragt i en lille plastskål inde i hver kasse., De blodprøver, der blev anvendt i træningsperioden, blev ikke brugt i testene. Hundene blev brugt i eksperimentet med tilladelse fra Regional Ethical Revie.Board i Gthteborg, licensnummer: s-220-08. Hundene havde fri adgang til ferskvand under træning og test timer. Efter 2 timers arbejde blev hundene gået eller havde 20 minutters fritid.
patientvalg
patienter blev udvalgt til optagelse i denne retrospektive undersøgelse fra klinikken og bio-bank databaser. Sidstnævnte indeholder blod og kræftvæv fra patienter med kræft i æggestokkene., Materiale blev indsamlet efter at have fået tilladelse fra den enkelte patient og blev reguleret af behandlingsprogrammet for kræft i æggestokkene i Vestsverige. Patientvalg blev først foretaget fra klinikdatabasen, derefter blev resultaterne korreleret med bio-bank-databasen for at få blodprøver.
det vigtigste udvælgelseskriterium, der blev anvendt for alle forsøgspatienter, var klinisk fuldstændig remission (CR) inden det sjette (endelige) planlagte kemoterapikursus. Patienter udvalgt til Serie I blev opdelt i 3 grupper., Gruppe A, inkluderede patienter med 3 års tilbagefaldsfri overlevelse, gruppe B inkluderede patienter, der var tilbagefaldet inden for 6 måneder efter den sidste behandlingssession; og for gruppe C inkluderede patienter, der var tilbagefaldet mellem 1 og 2 år efter behandlingen. I alt 66 patienter med CR i årene 2001-2007 blev udvalgt i Serie 1. Alle var fra Gthteborg-området og var også i bio-bank-databasen. Toogfyrre patienter havde prøver i en biobank svarende til et af de tre sekundære udvælgelseskriterier for optagelse i gruppe A, B eller C., Valg til Serie II blev kun foretaget ved hjælp af biobank-databasen.
blodprøver
blodprøver blev indsamlet fra patienter, der bor i Gthteborg-området i Vestsverige. Befolkningen er omkring 600.000. Behandlingsprogrammet for kræft i æggestokkene kræver ca-125-analyse ved to lejligheder. Først før eller direkte efter primær kirurgi, og den anden før det sjette kursus af kemoterapibehandling. Som sædvanligt i behandlingsprogrammet for ovariecarcinom blev CA-125-niveau imidlertid ikke inkluderet i opfølgningen, selvom læger har mulighed for at kontrollere det., Blodprøver med >500 U / ml CA-125 værdier blev brugt til hundetræning, hvor en dråbe blev anbragt i en lille plastskål inde i hver kasse. Blodprøver anvendt i træningsperioden blev ikke anvendt i testene.
referenceblodprøver
materiale til referencegruppen blev valgt fra bio-bank-databasen. Klinikopatologiske variabler blev ikke overvejet, fordi vores tidligere undersøgelsesresultater viste, at de ikke påvirker hundens følsomhed for påvisning ., I alt 62 prøver (42 for Serien, som jeg og 20 til Række II), fra forskellige personer, med CA-125 værdier >200 U/ml blev tilfældigt udvalgt som reference materiale i Serie i og II.
Test af blodprøver i Serien, som jeg
Fyrre-to af prøverne blev indsamlet og brugt som test materiale i Serie I. Disse blodprøver blev taget, før den sjette løbet af kemoterapi. Patienterne blev opdelt i tre grupper., Gruppe A bestod af 13 patienter, der havde en CR, 3 – årig tilbagefaldsfri overlevelse og normal (<35 U/ml) CA-125værdier før deres sidste behandlingsforløb. Gruppe B bestod af 12 patienter, der havde en CR, recidiverende inden for 6 måneder, og alle undtagen 2 (61 U/ml; <200 U/ml) havde CA-125 <35UI. Gruppe C bestod af 17 patienter med en CR, gentagelse mellem 1 og 2 år og normale CA-125-værdier. Tumorhistopatologi, Stadium og klasse varierede inden for grupperne.,
blodprøver med>500 U/ml CA-125 værdier blev brugt til træning, hvor en dråbe blev anbragt i en lille plastskål inde i hver kasse. Blodprøver anvendt i træningsperioden blev ikke anvendt i testene.
test blodprøver i Serie II
prøver blev taget 3 og 6 måneder efter det sjette, sidste kemoterapikursus. Desværre kunne vi ikke følge patienter i Serie I, Gruppe A, fordi ingen af dem havde blod i blodbanken. Vi indsamlede blod fra 10 andre patienter, der blev fulgt regelmæssigt., Median donor alder var 65 år (interval, 38-78 år).
kontrolblodprøver
kontrolprøver blev indsamlet i løbet af de 2 år mellem 2007 og 2009, hovedsagelig fra frivillige kvindelige medicinske medarbejdere i Gthteborg. Inklusionskriterier var, at patienterne følte sig sunde, ikke var gravide og var fri for gynækologisk sygdom. Kontrol – og testmaterialer var ikke aldersmatchede. Yngre personer blev bevidst valgt som kilde til kontrolprøver for at reducere risikoen for forekomst af asymptomatisk kræft i æggestokkene., Således havde både kontrol-og testgrupperne prøver fra præ-og postmenopausale kvinder.
Prøvepræparation
blodprøver blev opsamlet i EDTA-rør og centrifugeres derefter ved 3000 o / min i 10 minutter med plasmapotter over de små plastrør. Efter centrifugering blev plasmaet opdelt i to dele, en til ca-125-analyse og den anden til efterfølgende forsøg. Den sidste del blev holdt ved -80.C i tumorbanken (etisk Udvalgs licensnummer: S-220-08, Regional Ethical Revie. Board i Gthteborg)., Kontrol plasmaprøver blev behandlet og opbevaret identisk med målene. Imidlertid blev rør med kontrolblod opbevaret separat. Median donor alder var 45 år (interval, 29-65 år).
testdesign
Test blev udført på dobbeltblind måde som tidligere beskrevet . For at opsummere blev både testleder og handler blindet til placeringen af målprøverne og var kun til stede på teststedet, når hundene arbejdede. Hundene blev testet i to serier. Serie i dækkede 4 dage (2 dage pr.lejlighed), mens serie II dækkede 2 dage., Ti kørsler blev udført på hver dag, bortset fra en dag i Serie I, da 11 kørsler blev udført. Hver kørsel omfattede syv kasser, placeret i en cirkel omkring 2 m fra hinanden. Hver kasse indeholdt en dråbe plasma; fem indeholdt kontrolmaterialer, en indeholdt en prøve, og en indeholdt en referenceprøve. Referencematerialer blev taget før eller kort efter den primære operation og havde således en høj koncentration af lugtmolekyler. Placeringen af mål-og referencebokse blev ændret af en assistent mellem hvert løb. Hver kasse blev rengjort med alkohol mellem kørsler., Testene blev dokumenteret på papir og DVD af testlederen og en assistent .
hundesvar
et positivt svar blev defineret som at indikere målboksen ved at ridse med forbenet, ligge og snuse den (og ikke indikere kontrolprøverne). En negativ reaktion blev defineret som sniffing og indikerer en kontrolboks og ikke angiver målet. En usikker reaktion blev defineret som at stoppe ved kassen, lugte den, ridse på den og muligvis bjælke, men gå lige videre og ikke ligge ned.,
Behandling af ovariecancer karcinomer
I overensstemmelse med standard behandling program i Vest-Sverige, patienter, der blev behandlet med total hysterektomi, bilateral salpingo-ooforektomi omentectomy, flere peritoneal biopsier, og peritoneal vask med cytologi. 4 uger efter primær kirurgi blev den første kombination af carboplatin, cyclophosphamid og epirubicin givet. I alt seks kurser blev administreret med 4 ugers intervaller.,
Statistiske metoder
De rå data, der blev sammenfattet som følsomhed (den betingede sandsynlighed for hunden angivelse af kræft, når den tilstand, som var til stede) og test specificitet (den betingede sandsynlighed for hunden at ignorere en prøve fra en rask donor). Følsomhed og specificitet giver indsigt i den generelle klassifikation evne hundene.
den positive og negative forudsigelige Sandsynlighed for, at testen ville give den korrekte diagnose, blev også beregnet. Point estimater blev beregnet med 95% konfidensintervaller ., Både følsomhed og specificitet blev udtrykt som proportioner, således standard teknikker for proportioner kunne anvendes til statistisk inferens. Konfidensintervaller var baseret på den normale tilnærmelse, p.1.96 p 1 − p / n, hvor p er den estimerede følsomhed, respektive specificitet og n er antallet af testkørsler.